西門子ADVIA2400生化儀的抗干擾評價

蔣曉軍　羅甫花

【摘要】 目的 對西門子ADVIA2400生化儀的抗干擾能力進行評價。方法 采用SPSS和Excel軟件依照CLSI（美國實驗室標準化委員會）EP7-A2與EP9-A2文件對總蛋白、白蛋白、前白蛋白等不同方法學不同波長的18個項目進行抗干擾試驗測試。結果 β2微球蛋白（β2-MG）總蛋白（TP）、前白蛋白（PA）、低密度脂蛋白（LDL）、尿酸（UA）在輕度脂血的干擾下P<0.005，結果有明顯差異，白蛋白（ALB）在輕度脂血的干擾下P<0.05，結果有差異。丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（AKP）、γ谷氨?；D移酶（GGT）、總膽汁酸（TBA）、尿素（BUN）、肌酐（CREA）、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸肌酶（CK）、葡萄糖（GLU）、鈣（CA）、淀粉酶（AMS）在不同濃度脂血干擾下P>0.05無明顯差異。除PA外受干擾的項目作線性分析都呈線性。討論 西方子生化分析儀ADVIA2400采用的是稀釋模式，不同方法學、不同的標本與試劑比例對脂血的抗干擾能力有較大差異，速率法較終點法、膠乳增強免疫透射比濁法較免疫透射比濁法優。

【關鍵詞】 抗干擾；CLSI；生化儀；評價

文章編號：1004-7484（2014）-06-3052-02

【Abstract】Objective To evaluate anti-interference ability of SIEMENS ADVIA2400 biochemical analyzer.Methods Using Spss and Excel software according to CLSI（American Laboratory Standards Committee）EP7-A2 EP9-A2 document to test 18 different wavelengths projects（total protein、 albumin、 prealbumin et al.）of anti-interference ability with different methods.Results There are significant differences（P<0.005）of these projects include β2-microglobulin 、uric acid（UA）in mild lipemia interference；there is differences（P<0.05）of Albumin（ALB）in mild lipemia interference；there is no significant difference（P>0.05）of these projects include alanine aminotransferase（ALT）、aspartate aminotransferase（AST）、alkaline phosphatase（AKP）、 γ-glutamyl transferase（GGT）、total bile acid（TBA）、urea（BUN）、 creatinine（CREA）、 lactate dehydrogenase（LDH）、creatine kinase（CK）、glucose（GLU）、calcium（CA）and amylase（AMS）at different concentrations lipemia interference；Interference project linear analysis were tested for linearity With the exception of PA.Conclusion SIEMENS biochemical analyzer ADVIA2400 dilution mode is used，the different methodologies of specimen and reagent proportion has bigger difference to the anti-interference ability of the blood lipid；the rate method is better than the end-point method and the Latex-enhanced immunoturbidimetric method is superior to the immune turbidimetric method.

【Key words】 Anti-interference；CLSI；Biochemical analyzer；Evaluation

西門子ADVIA2400是目前唯一使用稀釋血清反應的生化分析儀，因使用稀釋血清時會相對減少試劑的用量，最小的試劑用量是60ul，是目前生化儀中試劑消耗最少的。由于模式的改變從而使生化反應的線性、抗干擾能力和反應的曲線等與其他不稀釋模式的生化儀有所差異，臨床上最常見的標本干擾大多來自于脂血，特進行對血脂的抗干擾能力測試。

1 材料與方法

1.1 低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、淀粉酶（AMS）選用寧波美康生物科技有限公司，β2微球蛋白（β2-MG）選用（四川邁克生物科技股份有限公司）；總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、前白蛋白（PA）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（AKP）、γ谷氨?；D移酶（GGT）、總膽汁酸（TBA）、尿素（BUN）、肌酐（CREA）、尿酸（UA）、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸肌酶（CK）、甘油三酯（TG）葡萄糖（GLU）、鈣（CA）試劑來自（上?？迫A生物股份有限公司）；脂肪乳：商品名力能，（華瑞制藥有限公司），中/長鏈脂肪乳注射液

1.2 儀器 西門子生化儀ADVIA2400。

1.3 校準品與質控品 校準品與質控品為英國朗道（RANDOX）公司生產，批號為校準品CAL2350-585UN，質控品中值為HN1530-624UN；高值為HE1532-403UE。

1.4 臨床判定標準 根據CLIA'88能力驗證計劃的分析質量要求，規定的室間質量評價標準靶值±允許誤差，以CLIA'88要求的總誤差的1/4作為批內變異系數允許范圍和系統誤差（SE，%）的臨床可接受標準。

1.5 精密度分析 中值與高值質控品重復測定20次及每天隨機測定2次，連續測定20天。

1.6 干擾試驗 依據EP7-A2文件收集足夠多的外觀清亮的血清混合，3000r/min5分鐘離心備用，分別吸取3.8ml加入0.2ml生理鹽水為對照；3.8ml血清加入0.2ml脂肪乳相當于TG23.6mmol/L為重度脂血；3.8ml血清加入0.10ml脂肪乳、0.10ml生理鹽水相當于TG11.8mmol/L中度脂血；3.8ml血清加入0.05ml脂肪乳、0.15ml生理鹽水相當于TG6.1mmol/L為輕度脂血；按照CLSI文件要求對每個加入干擾物的樣品重復測試8次對結果進行統計學分析[4]。

1.7 線性分析 對脂血影響較大的項目作線性分析，選取低值和高值標本各一個，低值標本為1號，高值標本為5號，二者3：1混勻為2號，等份混勻為3號，1：3混勻為4號，每份樣品測定8次，設定值濃度=（C1V1+C5V5）/（V1+V5），C為濃度，V為體積。

2 結 果

2.1 干擾分析 當TG為23.6mmol/L重度脂血時AST、ALT、CK、AMS、LDH、TBA、UREA、AKP、GGT、CREA、GLU、CA結果差異均無統計學意義。當TG為6.1mmol/L輕度脂血時TP、UA、LDL、PA、β2-MG的P<0.005結果有顯著性差異，ALBP<0.05有差異，見表1。

3 討 論

現今隨著大型全自動生化分析儀的廣泛應用于臨床，儀器的精密度得到了較大的提高，生化檢驗的誤差主要來自于標本的前處理，2006年國際臨床化學雜志報導100個醫院實驗室出現結果的錯誤，分析前產生的誤差占總誤差的46-68.2%，分析中誤差占15%，又主要來自于試劑方法學與廠家的選擇[1]。西門子ADVIA2400生化分析儀是目前唯一使用稀釋模式的大型生化分析儀，經過稀釋后的樣品與試劑比例和常用的生化儀不同，在選擇試劑上要求會更苛刻，并且在線性和最低檢測限及抗干擾方面會有差異。乳糜血是臨床檢驗工作中最棘手的問題，本人依據CLSI的EP9A文件對ADVIA2400上使用的不同方法學不同波長的18個項目進行了抗干擾評價[2]，乳糜物質對使用速率法的AST、ALT、CK、AMS、LDH、TBA、UREA、AKP、GGT等9個項目在重度脂血TG達到23.6mmol/L的時結果差異均無統計學意義[3-4]。終點法的8個項目中GLU、CREA副波長分別為800nm與660nm與主波長有較大差異，而且是雙試劑，樣品與試劑比較大因此消除了乳糜的干擾。TP與ALB都是終點法單試劑，受乳糜影響結果偏高與董立杰結論的不同[5]，TP因為樣品與試劑比例為1：50較ALB1：100小，因些受干擾的程度較嚴重。而LDL由于采用的是選擇性抑制法，可能試劑1無法消除較多的TG、CM、VLDL的干擾。β2MG與PA都是免疫透射比濁法，PA在日常工作中經常有些標本因為脂血干擾引起吸光度異常無法計算結果，而β2MG為膠乳增強免疫比濁法，雖然也受到一定干擾，結果偏低，但是抗干擾能力要優于PA。通過試驗我們得知脂血對速率法影響較小，對于終點法影響程度不一，可以根據不同項目選擇適合的試劑，比如TP我們可以改變樣品與試劑的比例，或者改成雙試劑法如西門子原裝TP試劑為雙縮脲雙試劑法，可以一定程度的消除脂血的干擾，如果只能是單試劑，現在的儀器可以在脂血樣品檢測時樣品空白檢測來消除脂血干擾。而使用免疫比濁法的項目盡量考慮使用膠乳增強免疫比濁法?，F在有些廠家在胱抑素C等項目上又推出了膠體金免疫增強比濁法，在靈敏度、抗干擾及穩定性上更好。脂血樣本的干擾大多為線性干擾，我們通過回歸方程可以得到不同濃度干擾物所對檢測項目的干擾值，理論上可以對有干擾的項目進行修正，但由于樣品中可能同時存在除TG以外的如乳糜微粒、溶血、膽紅素的干擾而難以準確的校正。有文獻報道[6]可以用聚乙二醇（PEG）處理樣品檢測可以一定程度的消除脂血干擾，但在實際工作中較難實行，并且PEG為外來物質，對某些廠家的試劑及某些樣品可能也存在不可知的干擾，須進行大量的臨床檢驗來證實，或者使用超高速的離心儀來分離血清。在無法徹底消除脂血干擾的情況下，我們應按照CLSI文件對本科的儀器及試劑作好抗干擾的驗證，并在所發的報告中提醒醫生有較大干擾的項目，以便醫生作出正確的判斷，如有必要可調節飲食后復檢。

參考文獻

[1] 葉應嫵，王毓三.申子的瑜全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006.

[2] 楊昌國，許葉，張抗.線性評價和干擾試驗中NCCLS評從方案的應用[J].臨床檢驗雜志，1999，17（1）：184-186.

[3] 楊濱，李貴生，李萍，等.血清胰淀粉酶試劑盒方法性能評價[J].華西醫學，2008，23（4）：832-83.

[4] 胡勤辛，王強，畢其華，于小妹.常用酶類檢測項目干擾試驗的實驗分析[J].檢驗醫學，2008，1（23）：86-88.

[5] 董立杰.標本脂血對臨床生化檢測結果的評估及其對策[J].實用醫技雜志，2010，17（4）：344-346.

[6] 林景濤，等.高脂血對血清酶類活性測定影響及處理方法[J].醫學檢驗與臨床，2010，8（7）：1542-1545.