新型N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物的合成及其抗腫瘤活性

錢 宇，田 靜，常霄巍，巴俊杰

(內蒙古醫科大學藥學院，內蒙古呼和浩特 010110)

磺酰脲類化合物具有生物活性高、毒性小等優點，在醫藥和農藥領域具有廣泛應用，主要被用于降糖藥和除草劑。此外，一些磺酰脲類化合物還具有利尿、抗血栓、降血脂和抗中風等生物活性［1-2］。近年來研究發現芳基磺酰脲類化合物具有較強的抗腫瘤活性，尤其用于治療結腸癌、卵巢癌、肺癌等實體腫瘤，已經被確定為對實體腫瘤有顯著性作用的一類新型化療藥物［3-6］。

細胞周期分裂蛋白25B(Cdc25B)有促進細胞有絲分裂作用，對G2-M期的待修復檢驗點有重要作用，是一種潛在的癌基因，在人類腫瘤(乳腺癌、肺癌、大腸癌、胃癌、前列腺癌、卵巢癌、淋巴瘤和黑素瘤等)細胞系中過度表達［7］，因此，尋找Cdc25B抑制劑是發現抗腫瘤藥物的重要途徑。

Scheme 1

本文根據芳基磺酰脲類化合物與芳基磺酰胺類化合物化學結構相似和抗腫瘤作用機制均為抑制細胞有絲分裂的原理［8-9］，以具有抗腫瘤活性的二芳基磺酰胺類化合物CA-4系列咔唑磺酰胺類化合物為參照［10］，將其磺酰氨基換成磺酰脲基，根據在二芳基磺酰脲另一個芳環上連接中性、親脂性及體積較小的基團能增強抗腫瘤活性的原理［11-12］，設計并合成了30個新型的N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物(7a～7Ⅳ)。以9-烷基咔唑為原料，經磺化、氯化和氨化反應制得9-烷基咔唑-3-磺酰胺(4a和4o);取代苯胺(5a～5n，5s，5Ⅳ)與三光氣反應制得取代苯基異氰酸酯(6a～6n，6s，6Ⅳ);4分別與6經縮合反應合成了7a～7Ⅳ，其結構經1H NMR，IR和ESI-MS表征。并對其進行了Cdc25B抑制活性的篩選。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

XT4A型數字顯微熔點儀(溫度未校正);ZF-1型紫外分析儀;Bruker AvanceⅢ500型核磁共振儀(DMSO-d6為溶劑，TMS為內標);Affinity-1型紅外光譜分析儀(KBr壓片);Finnigan Lcq Advantage Max型質譜儀。

所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1)2a和2o的合成通法［13］

冰鹽浴冷卻下，在反應瓶中依次加入1 11.04 mmol和二氯甲烷35 mL，降溫至-15℃以下，滴加氯磺酸1.29 g(11.15 mmol)，滴畢，于 -10 ℃以下反應30 min;于室溫反應3 h(TLC檢測)。抽濾，濾餅用二氯甲烷洗滌，真空干燥得灰綠色固體9-甲基-3-咔唑磺酸(2a，收率 69.4%)和 9-乙基-3-咔唑磺酸(2o，收率 80.1%)。

(2)3a和3o的合成通法［14］

冰鹽浴冷卻下，在反應瓶中依次加入五氯化磷1.59 g(7.66 mmol)，2 3.83 mmol和 DMF 10 mL，于-10℃以下反應30 min;于室溫反應2.5 h(TLC檢測)。倒入冰水中，抽濾，濾餅用蒸餾水洗滌至中性，真空干燥得淡黃色固體9-甲基-3-咔唑磺酰氯(3a，收率 83.2%，m.p.142 ℃ ～145℃)和 9-乙基-3-咔唑磺酰氯(3o，收率 84.3%，m.p.132 ℃ ～135 ℃)。

(3)4a和4o的合成通法［15］

冰鹽浴冷卻下，在反應瓶中加入氨水5 mL，攪拌下緩慢滴加3 3.58 mmol的THF(10 mL)溶液，滴畢，于0℃以下反應20 min;于室溫反應1 h(TLC檢測)。倒入冰水中，用稀鹽酸調至pH≈6，抽濾，濾餅真空干燥得灰白色固體9-甲基-3-咔唑磺酰胺(4a，收率 82.1%，m.p.223 ℃ ～226℃)和 9-乙基-3-咔唑磺酰胺(4o，收率 85.2%，m.p.182 ℃ ～185 ℃)。

(4)6a～6n，6s，6Ⅳ的合成通法

在三口燒瓶中加入固體光氣(BTC)6.00 g(0.02 mol)和甲苯30 mL，攪拌使其溶解;冰水浴冷卻下緩慢滴加5(0.04 mol)的甲苯(15 mL)溶液和三乙胺5～7滴的混合溶液，滴畢(1 h)，于室溫反應1 h;回流反應至澄清(TLC檢測)。常壓蒸出甲苯，剩余液減壓蒸餾得取代苯基異氰酸酯(6a～6n，6s，6Ⅳ)。

6a:白色晶體，收率 65.2%，b.p.100 ℃/4.0 KPa。6b:無色透明液體，收率56.0%，b.p.84 ℃ /6.0 KPa。6c:白色晶體，收率54.0%，b.p.120℃/5.3 KPa。6d:無色透明液體，收率55.9%，b.p.110 ℃ /4.7 KPa。6e:無色透明液體，收率57.5%，b.p.80 ℃ /4.7 KPa。6f:無色透明液體，收率 41.8%，b.p.152 ℃ /6.7 KPa。6g:無色透明液體，收率45.4%，b.p.114℃/3.3 KPa。6h:白色晶體，收率 59.6%，b.p.125℃/6.0 KPa。6i:無色透明液體，收率 54.2%，b.p.125 ℃/6.0 KPa。6j:無色透明液體，收率52.1%，b.p.145 ℃/4.0 KPa。6k:無色透明液體，收率20.5%，b.p.118 ℃ /3.3 KPa。6l:白色晶體，收率 40.5%，b.p.102 ℃ /4.0 KPa。6m:白色晶體，收率 46.6%，b.p.110 ℃ /2.7 KPa。6n:無色透明液體，收率58.5%，b.p.103℃/6.0 KPa。6s:無色透明液體，收率30.0%，b.p.75℃/2.0 KPa。6Ⅳ:白色晶體，收率 56.6%，b.p.123 ℃ /8.0 KPa。

(5)7a ～7Ⅳ的合成(以7a 為例)［16］

在三口燒瓶中加入4a 1.00 g(3.85 mmol)和乙腈30 mL，攪拌下于室溫反應1 h。加入K2CO31.59 g(11.54 mmol)，回流反應 1 h。滴加 6a 0.89 g(5.78 mmol)的乙腈(10 mL)溶液，滴畢(0.5 h);回流反應6 h(TLC檢測)。冷卻，抽濾，濾餅分別用蒸餾水和乙醇洗滌，真空干燥得白色粉末 7a 1.01 g。

用類似方法合成白色粉末7b～7Ⅳ。

7a:收率 63.3%，m.p.298℃ ～300℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.47(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.93 ～ 7.90(m，1H)，7.61(d，J=8.5 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.50 ～ 7.46(m，1H)，7.44 ～ 7.42(m，2H)，7.24(t，J=7.0 Hz，1H)，7.07 ～7.05(m，2H)，3.89(s，3H);IR ν:3 352，2 934，1 641，1 589，1 522，1 494，1 396，1 130，1 061 cm-1;ESI-MSm/z:412.21{［M -H］-}。

7b:收率 65.5%，m.p.282℃ ～284℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.33(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.93 ～ 7.90(m，1H)，7.61(d，J=8.0 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49 ～7.46(m，1H)，7.41 ～7.39(m，2H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，6.88 ～6.84(m，2H)，3.86(s，3H);IR ν:3 350，2 936，1 636，1 595，1 526，1 476，1 404，1 128，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:396.23{［M -H］-}。

7c:收率 56.9%，m.p.283 ℃ ～285℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.47(s，1H)，8.18(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=8.5 Hz，1H)，7.61(d，J=8.0 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=7.5 Hz，1H)，7.39 ～7.37(m，2H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，7.18 ～7.16(m，2H)，3.89(s，3H);IR ν:3 352，2 934，1 643，1 587，1 524，1 492，1 392，1 124，1 061 cm-1;ESI-MSm/z:457.99{［M -H］-}。

7d:收率 52.1%，m.p.264℃ ～266℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19 ～8.14(m，2H)，7.91(d，J=8.5 Hz，1H)，7.61(d，J=8.5 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.0 Hz，1H)，7.29 ～7.27(m，2H)，7.23(t，J=7.0 Hz，1H)，6.86 ～6.84(m，2H)，3.84(s，3H)，2.12(s，3H);IR ν:3 352，2 924，1 628，1 591，1 514，1 476，1 358，1 128，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:392.12{［M -H］-}。

7e:收率 59.1%，m.p.136 ℃ ～137℃;1H NMR δ:10.57(s，1H)，8.76(s，1H)，8.67(s，1H)，8.33(d，J=8.0 Hz，1H)，8.04 ～8.02(m，1H)，7.79(d，J=8.5 Hz，1H)，7.71(d，J=8.5 Hz，1H)，7.58 ～7.55(m，1H)，7.32(t，J=7.5 Hz，1H)，7.21 ～7.18(m，2H)，6.78 ～6.75(m，2H)，3.95 ～ 3.89(m，5H)，1.27(t，J=7.50 Hz，3H);IR ν:3 347，2 980，1 689，1 593，1 514，1 477，1 248，1 157，1 038 cm-1;ESI-MSm/z:422.17{［M -H］-}。

7f:收率 75.2%，m.p.273℃ ～275 ℃;1H NMR δ:8.53(s，1H)，8.20 ～8.18(m，1H)，8.13(s，1H)，7.94 ～ 7.92(m，1H)，7.62(d，J=8.0 Hz，1H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=8.0 Hz，1H)，7.34 ～7.29(m，2H)，7.24(t，J=8.0 Hz，1H)，6.67 ～6.65(m，2H)，3.89(s，3H)，3.62(s，3H);IR ν:3 345，2 938，1 634，1 597，1 526，1 475，1 409，1 125，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:408.37{［M -H］-}。

7g:收率 40.6%，m.p.263 ℃ ～265 ℃;1H NMR δ:8.70(s，1H)，8.51(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.92 ～ 7.90(m，1H)，7.84(s，1H)，7.62(d，J=8.5 Hz，1H)，7.56(t，J=8.5 Hz，1H)，7.50(t，J=7.5 Hz，1H)，7.25 ～ 7.22(m，3H)，3.89(s，3H);IR ν:3 339，2 932，1 632，1 584，1 518，1 477，1 285，1 115，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:446.21{［M -H］-}。

7h:收率 43.8%，m.p.283 ℃ ～285 ℃;1H NMR δ:8.58(s，1H)，8.52(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.93 ～ 7.90(m，1H)，7.67 ～7.61(m，2H)，7.55(d，J=8.5 Hz，1H)，7.50 ～7.47(m，1H)，7.25(t，J=7.5 Hz，1H)，7.11 ～7.01(m，2H)，3.89(s，3H);IR ν:3 341，2 932，1 639，1 618，1 516，1 476，1 431，1 115，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:414.17{［M -H］-}。

7i:收率 51.1%，m.p.209℃ ～211 ℃;1H NMR δ:8.53(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，8.13(s，1H)，7.93 ～ 7.91(m，1H)，7.63 ～7.55(m，2H)，7.50(t，J=7.0 Hz，1H)，7.26 ～ 7.18(m，2H)，7.09 ～ 7.07(m，1H)，6.80(d，J=8.0 Hz，1H)，3.89(s，3H)，2.06 ～2.04(m，6H);IR ν:3 518，3 284，2 920，1 618，1 593，1 506，1 477，1 387，1 130，1 067 cm-1;ESI-MSm/z:406.44{［M -H］-}。

7j:收率 71.7%，m.p.262 ℃ ～264 ℃;1H NMR δ:8.53(s，1H)，8.43(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.93 ～ 7.91(m，1H)，7.63 ～7.55(m，2H)，7.50(t，J=8.0 Hz，1H)，7.41(d，J=6.0 Hz，1H)，7.26 ～7.21(m，2H)，7.06 ～ 7.03(m，1H)，3.89(s，3H)，2.16(s，3H);IR ν:3 348，2 930，1 630，1 587，1 528，1 476，1 404，1 321，1 128，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:426.52{［M -H］-}。

7k:收率 72.1%，m.p.276℃ ～278℃;1H NMR δ:8.72(s，1H)，8.52(s，1H)，8.20(d，J=8.0 Hz，1H)，7.93 ～7.91(m，1H)，7.66 ～7.60(m，2H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=7.0 Hz，1H)，7.25 ～7.17(m，2H)，7.10 ～7.07(m，1H)，3.89(s，3H);IR ν:3 350，2 931，1 645，1 592，1 521，1 477，1 415，1 325，1 125，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:430.69{［M -H］-}。

7l:收率 71.4%，m.p.193℃ ～195 ℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.44(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=8.5 Hz，1H)，7.63 ～7.60(m，2H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.50 ～7.47(m，1H)，7.25(t，J=7.5 Hz，1H)，7.15 ～ 7.12(m，1H)，6.70 ～ 6.98(m，1H)，3.89(s，3H)，2.14(s，3H);IR ν:3 335，2 926，1 622，1 595，1 503，1 477，1 377，1 126，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:426.22{［M -H］-}。

7m:收率 34.5%，m.p.136℃ ～138℃;1H NMR δ:10.79(s，1H)，9.06 ～9.03(m，1H)，8.77(s，1H)，8.34(d，J=7.5 Hz，1H)，8.06 ～8.03(m，1H)，7.90 ～7.79(m，1H)，7.70(d，J=7.5 Hz，1H)，7.59 ～7.50(m，2H)，7.32(t，J=7.5 Hz，1H)，7.26 ～7.19(m，2H)，7.03 ～6.99(m，1H)，3.95(s，3H);IR ν:3 339，2 936，1 717，1 589，1 541，1 477，1 327，1 161，1 078 cm-1;ESI-MSm/z:412.27{［M -H］-}。

7n:收率 62.3%，m.p.241℃ ～243℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.20 ～8.17(m，2H)，7.93 ～7.91(m，1H)，7.61(d，J=8.0 Hz，1H)，7.54(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49(t，J=7.5 Hz，1H)，7.26 ～7.21(m，2H)，7.17(d，J=8.5 Hz，1H)，6.93 ～6.89(m，1H)，6.49(d，J=7.5 Hz，1H)，3.95(s，3H)，2.13(s，3H);IR ν:3 341，2 922，1 626，1 591，1 533，1 476，1 427，1 119，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:392.18{［M -H］-}。

7o:收率 69.9%，m.p.264 ℃ ～266 ℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.48(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.90(d，J=8.5 Hz，1H)，7.62(d，J=8.5 Hz，1H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.49 ～7.43(m，3H)，7.24 ～7.21(m，1H)，7.05(d，J=8.0 Hz，2H)，4.47 ～4.43(m，2H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 353，2 983，1 651，1 592，1 538，1 492，1 316，1 125，1 090 cm-1;ESI-MSm/z:426.33{［M -H］-}。

7p:收率 56.5%，m.p.292 ℃ ～294 ℃;1H NMR δ:8.55(s，1H)，8.40(s，1H)，8.20(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=8.0 Hz，1H)，7.63 ～7.55(m，2H)，7.49 ～7.41(m，3H)，7.23(t，J=7.5 Hz，1H)，6.90 ～6.86(m，2H)，4.49 ～4.43(m，2H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 355，1 632，1 605，1 560，1 510，1 325，1 125，1 085 cm-1;ESI-MSm/z:410.37{［M -H］-}。

7q:收率 80.1%，m.p.258℃ ～260℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.49(s，1H)，8.18(d，J=7.5 Hz，1H)，7.90(d，J=8.0 Hz，1H)，7.62(d，J=8.0 Hz，1H)，7.56(d，J=8.5 Hz，1H)，7.47(t，J=7.5 Hz，1H)，7.40 ～7.38(m，2H)，7.23(t，J=7.5 Hz，1H)，7.19 ～ 7.17(m，2H)，4.47 ～4.43(m，2H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 350，2 980，1 624，1 593，1 533，1 496，1 321，1 126，1 093 cm-1;ESI-MSm/z:470.52{［M-H］-}。

7r:收率 44.3%，m.p.265℃ ～267 ℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19 ～8.16(m，2H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.62(d，J=8.0 Hz，1H)，7.55(d，J=8.5 Hz，1H)，7.47(t，J=8.0 Hz，1H)，7.29(d，J=8.5 Hz，2H)，7.22(t，J=7.5 Hz，1H)，6.85(d，J=8.0 Hz，2H)，4.47 ～4.29(m，2H)，2.13(s，3H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 352，2 985，1 645，1 595，1 537，1 470，1 315，1 140，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:406.14{［M -H］-}。

7s:收率 45.3%，m.p.292 ℃ ～294 ℃;1H NMR δ:8.77(s，1H)，8.53(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.92(d，J=7.5 Hz，1H)，7.64 ～7.56(m，4H)，7.50 ～7.46(m，1H)，7.37(d，J=8.0 Hz，2H)，7.24 ～7.21(m，1H)，4.48 ～4.43(m，2H)，1.32(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 327，2 980，1 652，1 589，1 535，1 471，1 346，1 114，1 051 cm-1;ESI-MSm/z:460.13{［M -H］-}。

7t:收率 50.3%，m.p.122 ℃ ～124 ℃;1H NMR δ:10.55(s，1H)，8.76(s，1H)，8.63(s，1H)，8.33(d，J=7.5 Hz，1H)，8.04 ～8.01(m，1H)，7.82(d，J=8.0 Hz，1H)，7.72(d，J=8.5 Hz，1H)，7.57(t，J=7.5 Hz，1H)，7.32(t，J=7.5 Hz，1H)，7.21 ～ 7.18(m，2H)，6.79 ～6.76(m，2H)，4.54 ～4.49(m，2H)，3.94 ～3.89(m，2H)，1.35(t，J=6.0 Hz，3H)，1.26(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 344，2 978，1 683，1 591，1 541，1 450，1 334，1 149，1 076 cm-1;ESI-MSm/z:436.19{［M -H］-}。

7u:收率 78.7%，m.p.240℃ ～243℃;1H NMR δ:8.56(s，1H)，8.20(d，J=8.0 Hz，2H)，7.93 ～7.91(m，1H)，7.65 ～7.59(m，2H)，7.50 ～ 7.47(m，1H)，7.32 ～ 7.22(m，3H)，6.68 ～6.66(m，2H)，4.48 ～4.44(m，2H)，3.63(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 331，2 974，1 624，1 593，1 523，1 477，1 325，1 130，1 064 cm-1;ESI-MSm/z:422.43{［M -H］-}。

7v:收率 64.3%，m.p.259℃ ～261℃;1H NMR δ:8.72(s，1H)，8.51(s，1H)，8.19(d，J=7.5Hz，1H)，7.90(d，J=8.5 Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.63(d，J=8.0 Hz，1H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.26 ～ 7.22(m，3H)，4.48 ～ 4.44(m，2H)，1.31(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 340，2 980，1 637，1 593，1 508，1 475，1 377，1 116，1 062 cm-1;ESI-MSm/z:460.16{［M -H］-}。

7w:收率 49.4%，m.p.265℃ ～267℃;1H NMR δ:8.59(s，1H)，8.52(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.91 ～ 7.89(m，1H)，7.67 ～7.62(m，2H)，7.57(d，J=7.5 Hz，1H)，7.48(t，J=6.0 Hz，1H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，7.11 ～7.01(m，2H)，4.48 ～4.44(m，2H)，1.31(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 350，2 976，1 620，1 593，1 539，1 475，1 384，1 125，1 089 cm-1;ESI-MSm/z:428.18{［M -H］-}。

7x:收率 69.7%，m.p.159℃ ～161℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，8.09(s，1H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.63(d，J=8.5 Hz，1H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.5 Hz，2H)，7.24 ～7.20(m，2H)，7.10 ～7.08(m，1H)，6.79(d，J=8.0 Hz，1H)，4.48 ～ 4.43(m，2H)，2.05(s，6H)，1.31(t，J=6.0 Hz，3H);IR ν:3 321，2 974，1 627，1 593，1 506，1 475，1 384，1 130，1 066 cm-1;ESI-MSm/z:420.44{［M -H］-}。

7y:收率 65.9%，m.p.241 ℃ ～243 ℃;1H NMR δ:8.52(s，1H)，8.43(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.92 ～7.9(m，1H)，7.64(d，J=8.0 Hz，1H)，7.57(d，J=9.0 Hz，1H)，7.49 ～7.46(m，1H)，7.42(s，1H)，7.25 ～7.21(m，2H)，7.05 ～7.03(m，1H)，4.47 ～4.45(m，2H)，2.16(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 336，2 976，1 625，1 593，1 485，1 475，1 381，1 128，1 067 cm-1;ESI-MSm/z:440.63{［M -H］-}。

7z:收率 81.0%，m.p.263℃ ～265 ℃;1H NMR δ:8.72(s，1H)，8.52(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.66 ～7.62(m，2H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.25 ～7.17(m，2H)，7.09 ～7.08(m，1H)，4.48 ～4.45(m，2H)，1.32(t，J=7.5 Hz，3H);IR ν:3 354，2 972，1 631，1 593，1 514，1 475，1 417，1 325，1 128，1 091 cm-1;ESI-MSm/z:446.81{［M -H］-}。

7Ⅰ:收率 81.7%，m.p.202℃ ～204℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.43(s，1H)，8.19(d，J=8.0 Hz，1H)，7.90(d，J=8.5 Hz，1H)，7.64 ～7.62(m，2H)，7.57(d，J=8.5 Hz，2H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.24(t，J=7.5 Hz，1H)，7.15 ～ 7.13(m，1H)，6.99 ～ 6.97(m，1H)，4.48 ～4.43(m，2H)，2.14(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 337，2 974，1 633，1 593，1 506，1 475，1 377，1 124，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:440.25{［M -H］-}。

7Ⅱ:收率 51.3%，m.p.175℃ ～177℃;1H NMR δ:8.57(s，1H)，8.52(s，1H)，8.19(d，J=7.5 Hz，1H)，7.91(d，J=8.5 Hz，1H)，7.66(s，1H)，7.63(d，J=8.5 Hz，1H)，7.57(d，J=8.5 Hz，1H)，7.48(t，J=7.0 Hz，1H)，7.25 ～7.22(m，2H)，7.05(t，J=8.0 Hz，1H)，6.70 ～ 6.68(m，1H)，4.48 ～ 4.44(m，2H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 337，2 978，1 636，1 585，1 519，1 476，1 325，1 121，1 061 cm-1;ESI-MSm/z:426.25{［M -H］-}。

7Ⅲ:收率 67.1%，m.p.156℃ ～158℃;1H NMR δ:8.51(s，1H)，8.19 ～8.17(m，2H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.63(d，J=8.0 Hz，1H)，7.55(d，J=8.5 Hz，1H)，7.47(t，J=7.5 Hz，1H)，7.27 ～7.21(m，2H)，7.16(d，J=8.0 Hz，1H)，6.91(t，J=8.0 Hz，1H)，6.49(d，J=7.5 Hz，1H)，4.47 ～4.43(m，2H)，2.13(s，3H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 354，2 978，1 638，1 593，1 531，1 481，1 327，1 129，1 063 cm-1;ESI-MSm/z:406.19{［M -H］-}。

7Ⅳ:收率 33.0%，m.p.234℃ ～235℃;1H NMR δ:8.87(s，1H)，8.51(s，1H)，8.20 ～8.18(m，1H)，8.09(d，J=5.0 Hz，1H)，7.91 ～7.89(m，1H)，7.63(d，J=8.0 Hz，1H)，7.59 ～7.56(m，2H)，7.48(t，J=7.5 Hz，1H)，7.36 ～ 7.34(m，1H)，7.25 ～ 7.21(m，1H)，4.47 ～4.45(m，2H)，1.32(t，J=7.0 Hz，3H);IR ν:3 331，2 980，2 937，1 626，1 593，1 518，1 491，1 476，1 327，1 128，1 065 cm-1;ESI-MSm/z:494.57{［M -H］-}。

1.3 抗腫瘤活性測試

采用熒光底物OMFP考察7a～7Ⅳ對Cdc25B的抑制活性。OMFP經Cdc25B去磷酸化后得產物OMF，OMF被485 nm激發光激發后可發射出波長為535 nm的可檢測的熒光信號，從而觀察Cdc25B的活性變化以及7a～7Ⅳ對其抑制情況。

2 結果與討論

2.1 合成

在制備2時，控制氯磺酸的加入量至關重要，其量過大時容易在1的其它位置進行取代;量少時則反應不完全，實驗發現氯磺酸過量0.1 mmol較為合適。

在3的合成中，嘗試了多種氯化試劑。(1)以二氯亞砜為氯化劑時，得粘稠產物，且副產物多。(2)以三氯氧磷為氯化劑時，反應強烈，條件不易控制，后處理危險，且收率低。(3)以五氯化磷為氯化劑，即本文所采用的方法，收率均在80%以上，且后處理簡單，只需水洗至中性，干燥即可。五氯化磷用量為2 eq.，需分批加入，以控制溫度在-10℃以下。后處理時要將反應液緩慢滴加入冰水中，防止由于未反應的五氯化磷遇水放出大量熱而發生副反應。

在4的合成中，滴液方式有兩種:一種是將氨水滴入3中;另一種則相反。按前者操作，易發生3與產物4的氨化反應，生成大量副產物。因此，本實驗采用后一種滴液方式，保證氨化反應中3始終在氨水過量狀態下參與反應，從而減少副產物，提高收率。

2.2 抗腫瘤活性

7a～7Ⅳ的抗腫瘤活性結果見表1。由表1可見，在用藥濃度為 20 μg·mL-1時，以 Na3VO4(IC50=1.51 ±0.23 μmol·L-1)為陽性對照，7b，7g，7h，7j，7k，7l，7n，7s，7v，7y，7Ⅰ和7Ⅳ 的抑制率大于90%，對Cdc25B具有良好的抑制活性。

整體看來，N-甲基咔唑系列磺酰脲類化合物比N-乙基咔唑系列的抑制活性高。苯環為單取代時，對位取代比鄰、間位抑制活性較高;對位上連有氟、氯和三氟甲基時抑制活性較高。苯環為二取代時，抑制活性較單取代高;間、對位上連氟、氯、三氟甲基和甲基的抑制活性高。

表1 7a～7Ⅳ對Cdc25B的抑制活性Table 1 Inhibition of 7a～7Ⅳ to Cdc25B

3 結論

合成了30個新型的N-取代苯基-9-烷基-3-咔唑磺酰脲類化合物。初步的體外活性測試結果表明:7b，7g，7h，7j，7k，7l，7n，7s，7v，7y，7Ⅰ和7Ⅳ對Cdc25B具有良好的抑制作用，可能成為潛在的具有抗腫瘤活性的Cdc25B抑制劑。目標化合物的結構優化和進一步的抗腫瘤活性研究正在進行中。

致謝:活性篩選實驗由國家新藥篩選中心協助測定，在此表示誠摯的謝意。

［1］Simard J M，Woo1 S K，Schwartzbauer G T.Sulfonylurea receptor 1 in central nervous system injury:A focused review［J］.Journal of Cerebral Blood Flow ＆Metabolism，2012，32:1699 -1717.

［2］Kim S，Park J H，Koo S Y，et al.Novel diarylsulfonylurea derivatives as potent antimitotic agents［J］.Bioorganic ＆ Medicinal Chemistry Letters，2004，14:6075-6078.

［3］Houghton P J，Houghton J A.Antitumor diarylsulfonylureas:Novel agents with unfulfilled promise［J］.Invest New Drugs，1996，14:271 -280.

［4］Neeraj M，Jing-Ping L，Jang-Yang C，et al.Antitubulin agents for the treatment of cancer a medicinal chemistry update［J］.Exp Opin Ther，2006，16:647 -691.

［5］Li H Q，Lv P C，Yan T.Urea derivatives as anticancer agents［J］.Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry，2009，9(4):471 -480.

［6］Giulia P，Loredana U，Pierfranco C，et al.Effects of sulfonylureas on tumor growth:A review of the literature［J］.The Oncologist，2013，18:1118 -1125.

［7］Park H，Bahn Y J，Jung S K，et al.Discovery of novel Cdc25 phosphatase inhibitors with micromolar activity based on the structure-based virtual screening［J］.J Med Chem，2008，51(18):5533 -5541.

［8］Piao W，Yoo J，Lee D K，et al.Induction of G(2)/M phase arrest and apoptosis by a new synthetic anticancer agent，DW2282，in promyelocytic leukemia(HL-60)cells［J］.Biochemical pharmacology，2001，62(11):1439-1447.

［9］Kim D M，Won M，Chung C S.JNK-mediated transcriptional upregulation of RhoB is critical for apoptosis of HCT-116 colon cancer cells by a novel diarylsulfonylurea derivative［J］.Apoptosis，2010，15(12):1540-1548.

［10］Hu L X，Li Zh R，Li Y，et al.Synthesis and structure-activity relationships of carbazole sulfonamides as a novel class of antimitotic agents against solid tumors［J］.J Med Chem，2006，49:6273 - 6282.

［11］Sharma V K，Lee K C，Venkateswararao E.Structure-activity relationship study of arylsulfon-ylimidazolidinones as anticancer agents［J］.Bioorganic ＆Medicinal Chemistry Letters，2011，21:6829 -6832.

［12］Jeffry H J，Sue G C，Thomas A，et al.Novel agents effectiveagainstsolid tumors:Thediarylsulfonylureas:Synthesis，activities，and analysis of quantitative structure-activity relationships［J］.J Med Chem，1990，33(9):2393 -2407.

［13］Susumu M，Tatsuo T，Tsunetoshi H，et al.Synthesis and biological activity of various derivatives of a novel class of potent，Selective，and orally active prostaglandin D2 receptor antagonists bicyclo［2.2.1］heptane derivatives［J］.J Med Chem，2003，46:2436 -2445.

［14］Jatinder P B，Richard J C，Swinbourne J F.Chlorosulfonation of some polynuclear heterocyclic compounds［J］.Phosphorus Sulfur and Silicon，1992，72:157-170.

［15］Christopher A L，Millichip I，Parker B，et al.A convenient synthesis of sulfonylureas from carboxylic acids and sulfonamides via an insitu Curtius rearrangement［J］.Tetrahedron Letters，2007，48:8878 -8882.

［16］Sun L Q，Zhu L，Qian K D，et al.Design，synthesis，and preclinical evaluations of novel 4-substituted 1，5-diarylanilines as potent HIV-1 non-nucleoside reverse transcriptase inhibitor(NNRTI)drug candidates［J］.J Med Chem，2012，55:7219 -7229.