大理地區女性人乳頭瘤病毒感染亞型分析

李正金，楊錫彤，畢磊，王光明

(大理大學附屬醫院病理科，云南 大理 671000)

大理地區女性人乳頭瘤病毒感染亞型分析

李正金，楊錫彤，畢磊，王光明

(大理大學附屬醫院病理科，云南 大理 671000)

目的 了解云南省大理地區女性人乳頭瘤病毒(HPV)的感染率、感染亞型、感染年齡等特點。方法應用分子導流雜交技術對2012年4月1日至2015年8月31在我院體檢中心和婦產科門診就診的女性患者3 292例行HPV 21種亞型檢測，并對各個年齡段的感染情況進行分析。結果3 292例樣本中，檢測到HPV陽性445例，陽性率為13.52%，共檢出除低危型HPV43型外的20種亞型；感染高危型411例，占92.36%；低危型53例，占11.91%；高危型和低危型混合感染19例，占4.27%；感染高危型病例中，有兩型或者兩型以上感染者70例，占高危型感染的17.03%；感染低危型病例中，有兩型或者兩型以上感染者4例，占低危型感染的7.55%；在20種HPV亞型感染中，HPV16型陽性率最高(26.29%)，其次為HPV52亞型(23.15%)。各個年齡段中以＞60歲以上感染率最高(22.95%)，其次為≤20歲以下的感染(18.18%)，不同年齡段樣本陽性率差異有統計學意義(P=0.030)。結論云南省大理地區人乳頭瘤病毒的感染分布具有異質性，年齡段感染率60歲以上最高，20歲以下次之，因此應加強年輕女性人群HPV感染的宣傳和篩查力度。

大理地區；人乳頭瘤病毒；高危型；低危型；分子導流雜交

宮頸癌是婦女第二大常見惡性腫瘤，在一些發展中國家和地區的發病率在女性惡性腫瘤中占第一位[1]。中國每年有約10萬新發病例，占世界新發病例總數的大約1/5，每年約有3萬婦女死于宮頸癌[2]。目前，對適齡女性進行婦科相關篩查是預防和減少子宮頸癌發生的主要手段。流行病學和基礎研究發現在幾乎所有宮頸癌的標本中均可找到人乳頭瘤病毒(Human papillomavirus，HPV)的足跡。進一步研究顯示30歲以上的婦女持續感染HPV 8～24個月就有可能發生宮頸癌前病變-宮頸上皮內瘤變，8～12年后可發展為浸潤癌[3-4]。目前西方發達國家已經在進行疫苗的開發及其臨床應用的研究，但是有研究表明HPV的亞型分布具有明顯的年齡和地區特點，因此疫苗的臨床應用需要考慮年齡和地區分布的異質性。本研究回顧分析云南省大理地區到大理大學附屬醫院體檢中心和婦產科門診就診的3 292例女性患者的HPV感染情況，從而進一步了解大理地區HPV的感染特點，包括各種亞型的分布、年齡分布，以便對相關感染及病變的防治提供依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選取2012年4月1日至2015年8月31日到大理大學附屬醫院體檢中心和婦產科門診就診的女性患者標本共3 292例，年齡17～81歲?；颊呔橥?。

1.2 標本采集與處理 月經第10～18天均由婦產科醫生以專用宮頸脫落細胞采集器采集細胞。

1.3 試劑儀器 PCR儀和雜交儀(熒光定量基因擴增PCR檢測系統TL988型和PCR基因擴增熱循環儀DTC型)均來自西安天隆科技有限公司(西安，中國)，導流雜交技術及其配套試劑均購自凱普生物科技有限公司(廣州市，中國)，對21中常見的HPV基因型進行分型檢測，包括15種高危型別：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和6種低危型別：HPV6、11、42、43、44，CP8304(81)，其中中國人常見的基因型HPV53，16和CP8304(81)也在檢測范圍內。

1.4 檢測流程 嚴格按照凱普生物科技有限公司“人乳頭瘤病毒核酸擴增分型檢測試劑盒(雜交試劑)”的說明書進行操作，簡單描述如下：樣本DNA提取，PCR擴增(每次擴增分別設置一個陽性和陰性對照)，導流雜交，酶標顯色，結果判讀，根據芯片是HPV基因型分布相應位點判斷檢測樣本的基因型。

1.5 統計學方法 應用SPSS10.0統計學軟件進行數據分析，不同年齡段間的發生率比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 一般情況 共檢測3 292例患者，其中HPV感染陽性患者445例，陽性率為13.52%。共檢測出20種HPV亞型，包括15種高危型HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68和5種低危型HPV 6、11、42、44，CP8304(81)，只有HPV43型亞型未檢出，感染高危型占92.36%；低危型占11.91%。

2.2 各個年齡段感染情況 在3 292例患者中，除9例患者年齡不清楚除外，以≥60歲感染率最高(22.95%)，其次為≤20歲的感染(18.18%)，最低陽性率為30～40歲年齡段(12.18%)，各個年齡段陽性率比較差異有統計學意義(P=0.030)，見表1。

表1 各個年齡段HPV陽性情況

2.3 單一感染與多重感染情況 單一感染占88.54%，兩型或者兩型以上混合感染占21.57%，其中僅僅高危兩型或者兩型以上混合感染占總感染數的16.40%，低危兩型或者兩型以上混合感染占總感染數的0.90%，高危和低危兩型或者兩型以上混合感染占總感染數的4.27%，見表2。

表2 單一和多重感染情況(n=445)

2.4 HPV亞型感染分布 高危亞型感染最多的是HPV16亞型，陽性率為(26.29%)，其次為HPV52亞型(23.15%)；低危亞型感染中以HPV81亞型最高(5.84%)，各種亞型的感染情況，見表3。

表3 HPV亞型感染分布(n=445)

2.5 各個年齡段感染亞型情況 在3 292例患者中，有9例患者年齡不清楚除外，其余3 283例患者中，受檢患者的年齡以30～50歲居多，占所有檢測對象的73.80%。在各個年齡段各種感染亞型的分布具有異質性，見表4。

表4 各個年齡段HPV亞型感染分布(例)

3 討 論

宮頸癌一般由HPV，尤其是高危亞型持續感染而形成，由宮頸上皮內瘤變發展為浸潤癌可長達8～12年[4]。要預防宮頸癌的發生，及早發現、診斷和治療就顯得尤其重要。因此，了解本地區HPV感染情況、亞型分布及其年齡特點對于有效地開展宮頸癌的篩查和以后相關疫苗的使用具有重要的意義[5]。

有研究報道子宮頸癌在兩個年齡段(35～39歲和60～64歲)為發病高峰[6-7]，而在我們的研究中顯示以≥60歲年齡段感染率最高(22.95%)，其次為≤20歲年齡段的感染率(18.18%)，但是該研究中對女性HPV感染的檢測主要集中在30～50歲的人群(73.80%)，而20歲以下病例數較少，無法真實地反應該年齡段的HPV實際感染率。因此需要加強針對所有女性，尤其是年齡在20歲以下的女性的宣傳、篩查和防治力度。HPV感染以單一型為主(79.10%)，但是多重感染是否更容易促發宮頸癌仍存在爭議，需要加大對HPV感染陽性的隨訪和研究。

在我們針對大理地區人群的研究中，高危亞型感染最多的是HPV16亞型(26.29%)，其次為HPV52亞型(23.15%)；低危亞型感染中以HPV81亞型最高(5.84%)，其感染亞型與中國人常見的基因型HPV 53、16和CP8304不完全相符，也與國內的有報道的地區，以及與日本、泰國、南非等地的優勢感染亞型均不相同[4，6-9]。因此可以說明HPV感染率的高低、不同種族和地區HPV感染的亞型具有一定的異質性，主要取決于病毒因素、宿主因素和環境因素[10-12]。在臨床治療和疫苗開發上，需要考慮不同地區感染亞型的分布。

綜上所述，云南省大理地區HPV的感染亞型以及年齡段的感染率和感染亞型均具有異質性，感染人群以年輕育齡階段的女性居多，但是也呈現了年輕化的特點，因此應該加大對年輕女性群體HPV感染的宣傳和篩查力度。

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Research on the genotype distribution of human papillomavirus infection among female in Dali area.

LI Zheng-jin, YANG Xi-tong,BI Lei,WANG Guang-ming.Department of Pathology,the Affiliated Hospital of Dali University,Dali 671000,Yunnan,CHINA

ObjectiveTo investigate the genotype distribution,infection rate and age characters of human papillomavirus(HPV)infection among females in Dali area of Yunnan Province.MethodsThe genotype analysis was carried out by molecular hybridization in 3 292 female patients with HPV infection,who admitted to Medical Examination Center and Department of Gynecology&Obstetrics in our hospital from 1 April 2012 to 31 August 2015,and the infection situation of different age groups were also analyzed.ResultsOf 3 292 cases,445 cases were infected by HPV, with the positive rate of 13.25%.All the subtypes of HPV except HPV43 were detected.411(92.36%)positive cases belonged to high-risk type HPV infection and 53(11.91%)positive cases belonged to low-risk type HPV.Multi-HPV-genotype infection including high-risk type and low-risk type was observed in 19(4.27%)cases.Of 411 cases of high-risk type,70(17.03%)cases had two or more than two types.In 53 cases of low-risk type,4(7.55%)cases had two or more than two types.In 445 cases infected with HPV,the most common HPV genotypes were HPV-16(26.29%)and HPV-52 (23.15%).The highest positive rate was＞60 years old category(22.95%),followed by＜20 years old category(18.18%). There were significant differences in the positive rate among the various age groups(P=0.03).ConclusionInfection distribution of HPV in Dali region of Yunnan Province has heterogeneity.The highest positive rate was＞60 years old category,followed by＜20 years old category.We should enhance the publicity and the screening of HPV in young women.

Dali area;Human papillomavirus(HPV);High-risk type;Low-risk type;Molecular hybridization

R730.261

A

1003—6350（2016）11—1815—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.11.030

2015-12-11)

王光明。E-mail：gmwang1991@hotmail.com