丹參及復方制劑多指標成分質量控制方法研究

柳　意

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丹參及復方制劑多指標成分質量控制方法研究

柳意

（錦州師范高等?？茖W校，遼寧錦州 121000）

在中藥材中丹參屬于常用藥，水溶性酚酸類成分以及脂溶性二萜醌類成分是丹參的主要化學成分。數據顯示，丹參復方制劑在臨床應用上已經多達上百個種類。由此可見，控制丹參及其復方制劑的質量十分必要?，F有報道過的丹參復方制劑質量控制的方法難以全面評價其內在質量，某些方法還有待改進。本文選擇丹參滴注液和丹參飲片這兩種丹參復方制劑，以丹參和其它主味藥的多指標成分為質量指標，應用反相高效液相二極管陣列檢測法，建立了測定丹參滴注液、丹參飲片這兩種丹參復方制劑中有效成分的方法，以此來全面評價其質量。

丹參復方制劑；多指標成分；質量控制

中藥成分十分復雜，對其作用機理也沒有明確的認識，但是其治療效果比較明顯，因此受到國內外醫學界的廣泛關注，形成了一種研究熱潮。

1 丹參滴注液中四種水溶性成分含量測定

丹參滴注液可以治療心絞痛、冠心病等疾病，達到活血消腫、活血化瘀等效果。其中的有效成分包括迷迭香酸、丹參素、原兒茶醛及丹酚酸A、B、C等水溶性酚酸類成分[1]。下面應用高效液相色譜二極管陣列檢測法測定迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B及原兒茶醛的含量，從而全面評價丹參滴注液的質量。

1.1 試劑、儀器準備

采購市場上某藥業有限公司生產的不同批次的丹參滴注液，分別為06060401、06042201、07030202。購進純度大于98%的迷迭香酸，丹參素、丹酚酸B以及原兒茶醛則來自中國藥品生物制品檢定所。檢測儀器采用Agilent 1100全自動高效液相色譜儀。

1.2 檢驗方法、過程

（1）色譜標準。色譜柱應該以 Diamonsil TMC18（250×4.6 mm，5μm）為準，將5%冰乙酸和甲醇作為流動相并進行梯度洗脫，維持1.0 mL/min的流動速度和30 ℃的柱溫，檢測波長為 286 nm，以20μL的進樣量為宜。

（2）溶液準備。供試品溶液的制作，在25mL的容量瓶中量入3mL的丹參滴注液，然后加入20%甲醇將其稀釋達到刻度值，搖勻后采用0.45μm的微孔濾膜過濾溶液，濾液就是供試品溶液。

對照品溶液的制作，在25mL的容量瓶中加入適量迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B以及原兒茶醛，然后加入20%甲醇將其稀釋達到刻度值，搖勻后配置成不同濃度的混合對照品溶液，即3.508、21.92、25.92和38.64μg/mL。

（3）檢驗指標。檢驗指標包括系統適用性試驗、精密度試驗、回收率試驗、重現性試驗、穩定性試驗、檢測限、線性關系檢測以及樣品檢測。其中，線性關系檢測是指采用0.45μm微孔濾膜過濾混合對照品溶液，根據色譜標準進行不同量的進樣，即10μL、20μL、30μL、40μL、50μL、60μL、70μL。記錄每個組分的色譜峰面積，將其與進樣量應用線性回歸加以分析。

1.3 檢測結果

按照色譜標準，通過以上試驗計算出迷迭香酸的平均回收率是 99.8%，相對標準偏差是0.68%，線性范圍在0.2592~1.814 μg（r=1.0000）；丹參素的平均回收率是102.6%，相對標準偏差是0.55%，線性范圍在0.2192~1.934 μg（r=0.9999）；丹酚酸 B 的平均回收率是102.8%，相對標準偏差是0.49%，線性范圍在0.3864~2.705 μg（r=0.9999）；原兒茶醛的平均回收率是103.5%，相對標準偏差是0.42%，線性范圍在0.0351~0.2456 μg（r=1.0000）。試驗結果顯示，迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B以及原兒茶醛這四種水溶性成分完全分離，因此這種方法可以全面分析丹參滴注液的質量控制。

2 丹參飲片中五種水溶性成分含量的測定

2.1 試劑、儀器準備

從市場上采購丹參藥材，購進純度大于98%的迷迭香酸，丹參素、丹酚酸B、原兒茶酸以及原兒茶醛來自中國藥品生物制品檢定所。檢測儀器采用Agilent 1200全自動高效液相色譜儀。

2.2 檢驗方法、過程

（1）色譜標準。丹參飲片成分測定的色譜標準與丹參滴注液的標準相同，詳情參照上述內容，不再贅述。（2）溶液準備。供試品溶液的制作，在索氏提取器中加入適量的丹參藥材粉末和100mL的重蒸水,提取14個小時，采用0.45μm微孔濾膜過濾提取液，濾液就是供試品溶液。

對照品溶液的制作，在25mL的容量瓶中加入適量的迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B、原兒茶酸以及原兒茶醛，加入20%甲醇稀釋到刻度，將其分為濃度分別在35.08、109.6、129.6、148.4、193.2mg/L的溶液作為儲備。在10mL的容量瓶中分別吸取0.30、5.0、0.35、0.10、0.80mL的儲備液，加入20%的甲醇稀釋到刻度，把這個溶液分成濃度在1.052、54.8、4.536、1.484、15.46mg/L的混合對照品溶液。

（3）檢驗指標。檢驗指標與丹參滴注液成分的檢驗指標相同。根據色譜標準，準確吸取丹參飲片的供試品溶液和混合對照品溶液，檢驗6組分的理論塔板數和分離度，進行系統適用性試驗。線性關系檢測和精密度試驗等指標都與丹參滴注液的內容相同，通過這些試驗計算五種水溶性成分的相關數據。

2.3 檢驗結果

按照色譜標準，通過以上試驗計算出迷迭香酸的平均回收率是100.7 %，相對標準偏差是1.0%，線性范圍在0.0454~0.3175 μg（r=0.9999）；丹參素的平均回收率是100.7%，相對標準偏差是0.96%，線性范圍在0.5480~3.836μg（r=0.9992）；丹酚酸 B 的平均回收率是101.3%，相對標準偏差是0.88%，線性范圍在0.1546~1.082 μg（r=0.9999）；原兒茶酸的平均回收率是100.8%，相對標準偏差是1.0%，線性范圍在0.0148~0.1039 μg（r=0.9999）；原兒茶醛的平均回收率是100.6%，相對標準偏差是0.60%，線性范圍在0.0105~0.07367 μg（r=0.9999）。試驗結果顯示，迷迭香酸、丹參素、丹酚酸B、原兒茶酸以及原兒茶醛這五種水溶性成分完全分離，因此這種方法可以全面分析丹參飲片的質量控制。

3 結束語

目前對于丹參及其復方制劑的研究程度不斷加深，加之色譜法的廣泛應用，因此可以同時測定更多的有效成分含量，以此來分析其質量控制。丹參復方制劑新品不斷進入市場，但是缺乏應有的質量標準，因此需要加強研究，做好新藥的質量控制。

[1] 王歡.丹酚酸B的含量測定方法研究進展[J].江西中醫藥,2010,41(6):79-80.

[2]馬志剛,曹秋娥,丁中濤等.高效液相色譜法測定丹參及其復方制劑中的3個丹參酮[J].云南民族大學學報（自然科學版）,2013,22(6):391-393.

Study on quality control method of multi index components of Salvia miltiorrhiza and compound preparation

(Jinzhou Teacher's Training College, Jinzhou Liaoning 121000)

Salvia Chinese herbal medicines commonly used drugs belonging to the water-soluble phenolic acids and fat-soluble diterpene quinone component is the main chemical ingredient of Salvia. Data show that Salvia compound preparation in clinical applications have been up to hundreds of species. Thus, the control and quality of Salvia compound preparation is necessary. The method of preparation of compound Salvia quality control of existing reports over the difficult overall evaluation of its intrinsic quality, some of the methods could be improved. Salvia infusion fluid and paper chooses two Salvia Salvia Pieces compound, multi-index and other main ingredient of Salvia herb is quality indicators, reversed phase HPLC with diode array detection method for the determination of Salvia infusion fluid, Pieces Salvia Salvia both the active ingredient compound preparation methods, in order to fully evaluate its quality.

Salvia compound preparation; Multi-index component; Quality control

（責任編輯：吳 芳）

TG580.23+5

A

10.3969/j.issn.1672-7304.2016.06.042

1672–7304(2016)06–0095–02

柳意（1975-），女，吉林通化人，副教授，研究方向：中藥成分。