北京東北部山區人群嗜吞噬細胞無形體血清流行病學調查

呂燕寧，竇相峰，陳麗娟，孫玉蘭，張秀春，關增智，黎新宇，王全意

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北京東北部山區人群嗜吞噬細胞無形體血清流行病學調查

呂燕寧1，2，竇相峰1，陳麗娟1，孫玉蘭1，張秀春1，關增智1，黎新宇1，王全意1

目的 了解北京東北部山區人群嗜吞噬細胞無形體的感染狀況，為制定相應的防控策略提供依據。方法 在北京密云與懷柔區采集人群血清，采用間接免疫熒光法檢測嗜吞噬細胞無形體IgG抗體，進行血清流行病學調查。結果 801份血清中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者106份，陽性率13.23%，其中密云區為13.48%，懷柔區為12.70%，差異無統計學意義(P>0.05)。結論 北京密云與懷柔區正常人群中均有嗜吞噬細胞無形體感染的存在，應加強人粒細胞無形體病的監測和防控工作。

嗜吞噬細胞無形體；血清流行病學；間接免疫熒光法

人粒細胞無形體病(Human granulocytic anaplasmosis,HGA)是由嗜吞噬細胞無形體(Anaplasma phagocytophilum)侵染人末梢血中性粒細胞而引起的一種新發蜱傳人獸共患病，臨床表現無明顯特異性，主要有發熱、頭痛、肌痛、疲勞，嗜睡、關節痛、并常伴有白細胞、血小板減少，轉氨酶升高和多臟器功能損害等[1]。無形體病分布廣泛，地處熱帶和亞熱帶地區的南北美洲、非洲、南歐、澳大利亞、中東等地均有流行。傳統認為無形體只感染動物，20世紀90年代后，無形體病流行區擴大，并有人類發病的報道[2]。1994年首例確診病人在美國被發現[3]，之后發病呈上升趨勢，引起了人們的廣泛關注和研究興趣。2006年，我國安徽省首次發現了人感染嗜吞噬細胞無形體病例[4]，為了解北京市人感染嗜吞噬細胞無形體的現狀，我們初步在東北部山區中開展了人群的血清流行病學調查。

1 材料與方法

1.1 調查對象與資料收集 于2012年4月至2013年4月在北京市的密云與懷柔區分別進行人群調查。調查對象主要為務農、野外工作較多的人群。同時收集調查人群的性別、年齡以及職業等基本情況。

1.2 樣本采集與嗜吞噬細胞無形體抗體檢測 采集被調查者非抗凝靜脈血3 mL，取其血清置-20 ℃保存待測。

嗜吞噬細胞無形體IgG抗體采用間接免疫熒光法(IFA)進行檢測，試劑使用美國FOCUS Diagnostic公司產品(Cypress CA USA。貨號為IF1403)，血清樣本以磷酸鹽緩沖液(PBS)1∶64稀釋，陽性對照品以PBS從1∶2系列倍比稀釋至1∶32，具體操作過程按照試劑盒說明書進行。陰性、陽性對照均設復孔，置于熒光顯微鏡(Nikon E800)下觀察。參照試劑盒說明進行結果判斷，陽性對照品的滴度應在1∶8倍稀釋以上。如果不能滿足上述標準，檢測實驗需要重復。樣本抗體滴度≥1∶64為陽性，<1∶64為陰性。

1.3 統計學分析 資料采用EXCEL2003記錄，導入到SPSS 20.0進行數據整理和統計分析。

2 結 果

2.1 調查人群的一般情況及總體感染狀況 累計調查共801人，男女比例為1∶1.42，平均年齡為43.5歲，職業中以農民為主，占74.28%。嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者共106人，總陽性率為13.23%。

2.2 嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的性別分布情況 累計調查的801人中，男性共331人，其中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者33人，陽性率9.97%。女性470人，其中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者73人，陽性率15.53%?？ǚ綑z驗顯示χ2值為5.233，P=0.026，有統計學差異。但兩個地區男性與女性的嗜吞噬細胞無形體抗體陽性率各自比較則無顯著差異(密云區χ2=3.759，P=0.058；懷柔區χ2=1.545，P=0.247)結果詳見表1。

表1 調查人群中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的性別分布
Tab.1 Gender distribution of the Anaplasma phagocytophilum IgG positive cases

DistrictMaleFemaleTestnumberPositivenumberPositiverateTestnumberPositivenumberPositiverate密云區2352410.21%3145015.92%懷柔區9699.38%1562314.74%Total331339.97%4707315.53%*

Note：* Comparison of the total positive rate between male and femaleP<0.05.

2.3 嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的年齡分布情況 累計調查的801人中，0～20歲者嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽率12.16%。21～40歲者陽性率23.49%。41～60歲者陽性率10.03%。61～80歲者陽性率11.72%。χ2檢驗顯示χ2值為17.299，P=0.001，有極顯著的統計學差異。兩兩比較顯示21～40歲年齡段與其他年齡段人群相比有統計學差異(與0～20歲年齡段人群比較χ2=6.499，P=0.015；與41～60歲年齡段人群比較χ2=15.872，P=0.000；與61～80歲年齡段人群比較χ2=6.988，P=0.009)。而0～20歲年齡段人群與41～60歲以及61～80歲年齡段人群比較均無統計學差異(與41～60歲人群相比χ2=0.502，P=0.527；與61～80歲人群相比χ2=0.013，P=1.000)。41～60歲年齡段與61～80歲年齡段相比差異無統計學意義(χ2=0.316，P=0.631)。結果詳見表2。

表2 調查人群中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的年齡分布
Tab.2 Age distribution of the Anaplasma phagocytophilum IgG positive cases

Note： * Comparison between 21-40 years old and 0-20 years old populationP<0.05，△△ Comparison 21-40 years old population with 41-60 years old and 61-80 years old populationP<0.01.

2.4 嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的職業分布情況 累計調查的801人中，學生人群嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽率10.71%。農民人群陽性率12.94%。其他職業者陽性率21.21%?？ǚ綑z驗顯示χ2值為4.477，P=0.107，無統計學差異。其中農民與學生的嗜吞噬細胞無形體抗體陽性率比較χ2=0.513，P=0.570；農民與其他職業人群比較χ2=3.423，P=0.087；學生與其他職業人群比較χ2=4.087，P=0.054。結果詳見表3。

表3 調查人群中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的職業分布
Tab.3 Occupation distribution of the Anaplasma phagocytophilum IgG positive cases

地區District學生Student農民Farmer其他OthersTestnumberPositivenumberPositiverate(%)TestnumberPositivenumberPositiverate(%)TestnumberPositivenumberPositiverate(%)密云區9177.694085713.97501020懷柔區49816.331872010.7016425Total1401510.715957712.94661421.21

2.5 嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的地域分布情況 累計調查的801人中，密云區與懷柔區人群嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽率相近，分別為13.48%和12.70%，懷柔區略低?？ǚ綑z驗顯示χ2值為0.092，P=0.823，無統計學差異。結果詳見表4。

表4 調查人群中嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽性者的地域分布
Tab.4 Geographical distribution of the Anaplasma phagocytophilum IgG positive cases

地區District檢測數Testnumber陽性數Positivenumber陽性率(%)Positiverate密云區5497413.48懷柔區2523212.70Total80110613.23

3 討 論

人粒細胞無形體病是由嗜吞噬細胞無形體引起的一種經蜱傳播的人獸共患病，主要引起發熱和血小板減少，嚴重者可引起多臟器損害，甚至死亡。其宿主動物廣泛，流行環節復雜，傳播媒介主要為蜱。我國2006年在安徽省首次發現人感染嗜吞噬細胞無形體病例，并出現了因密切接觸患者血液及分泌物，導致HGA聚集性暴發感染的事例[4]。此后，國家衛生部印發《人粒細胞無形體病預防控制技術指南(試行)》，以指導該類疾病的發現、診療及防控。

作為一種新發蜱傳自然疫源性傳染病，目前對人粒細胞無形體病的病原學、流行病學等方面已有一定的了解，對其宿主動物、媒介也有了較為系統的調查研究[5]。在我國，該病疫源地廣泛存在，研究顯示吉林、青海、湖南、甘肅、貴州、河南等8省均有嗜吞噬細胞無形體感染人的情況[6]。因其臨床癥狀與某些病毒性疾病相似，尤其是很容易與2011年國內新發現的蜱傳新型布尼亞病毒感染相混淆[7]，本病易被誤診或漏診，導致不能及時正確診斷和有效治療，從而對人群健康構成了相當的威脅。2009年張秀春等[8]的調查發現北京地區農村人群和家畜中普遍存在嗜吞噬細胞無形體感染，人群血清抗體陽性率14.0%，主要分布在延慶和通州地區，密云區人群血清陽性率較低僅為1.6%，而在山羊中無形體16S rRNA基因的檢出率高達21.5%。為了進一步了解北京東北部山區人群中嗜吞噬細胞無形體的感染狀況，2012年開展了此項調查。

調查結果顯示，801名被調查者中，男女比例為1∶1.42，其中男性嗜吞噬細胞無形體抗體總體陽性率為9.97%，女性為15.53%，χ2檢驗顯示有統計學差異，但兩區調查人群中各自的男性與女性陽性率比較無統計學差異。這與新疆[9]、福建[10-11]、山西[11]等地的調查結果略有不同，但與楊占清等人[12]的統計結果相近。這可能與這兩個地區女性參加農業勞作和家務勞動較多，與其傳播媒介蜱的接觸機會較多有關。

調查人群中嗜吞噬細胞無形體抗體陽性率的年齡分布分析顯示21-40歲年齡段人群嗜吞噬細胞無形體感染率最高，與其他年齡段人群相比有統計學差異，0-20歲年齡段人群次之，61-80歲年齡段再次之，41-60歲年齡段人群感染率最低，但是后3個年齡段比較無統計學差異。這與新疆[9]、福建[10-11]、山西[11]等地的調查結果也略有不同，小年齡組的抗體陽性率較高與天津[13]的調查結果相似但也不完全相同。這說明北京地區的人嗜吞噬細胞無形體感染的風險因素不同于上述幾個地區，可能主要是由于年輕人群日?；顒虞^為活躍，與宿主動物牛羊狗等動物的接觸機會較多，因而與媒介蜱的接觸也較多，感染風險較高。

調查人群中嗜吞噬細胞無形體抗體陽性率的職業分布分析顯示，其他職業人群的感染率最高，農民次之，學生最低，但各組感染率相比無統計學差異，這與我們未將其他職業再進行細致分類有關。這與新疆和福建的調查結果也略有不同，北京地區的嗜吞噬細胞無形體感染與其他地區的感染狀況有所區別，應對其相關危險因素做近一步研究。

調查人群中嗜吞噬細胞無形體抗體陽性率的地域分布分析顯示，密云區與懷柔區人群嗜吞噬細胞無形體IgG抗體陽率相近，懷柔區略低，但二者沒有顯著區別。密云區的抗體陽率高于張秀春等[8]2009年的調查結果。這可能與抽樣地點、抽樣方式、實驗室檢測試劑、方法以及調查時間有關。

綜上所述，北京東北部山區人群中嗜吞噬細胞無形體的感染普遍存在，抗體陽性率的性別、年齡、職業分布與國內報道的其他省市的情況有所不同，可能與當地居民的生活、工作、行為方式以及宿主動物和媒介的感染狀況和分布有關，因此掌握北京市人粒細胞無形體病的流行和分布狀況，并對其危險因素做進一步的細致研究，對于控制疾病流行和疫源地的擴大具有重要意義。本研究提示目前北京市密云、懷柔等地人粒細胞無形體病的感染和傳播風險較高，因此在密云和懷柔區應加強疾病和宿主動物以及媒介的監測工作，并在高危人群中做好疾病防治的宣傳教育工作，對基層醫院的臨床醫生應加強人粒細胞無形體病相關診療知識的培訓，這對有效預防和控制疾病的發生，控制疫源地的進一步擴大將具有重要意義。

(現場樣本采集得到北京市密云區和懷柔區疾病預防控制中心相關人員的大力支持與協助，深表感謝。)

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Seroepidemiological investigation onAnaplasmaphagocytophilumin the population from northeast mountainous area of Beijing

LYU Yan-ning1,2, DOU Xiang-feng1, CHEN Li-juan1, SUN Yu-lan1,ZHANG Xiu-chun1, GUAN Zeng-zhi1, LI Xin-yu1, WANG Quan-yi1

(1.BeijingCenterforDiseasesPreventionandControl,Beijing100013,China;2.SchoolofPublicHealth,CapitalMedicalUniversity,Beijing100069,China)

In order to study the epidemic state ofAnaplasmaphagocytophiluminfection in the population from the northeast districts of Beijing and to provide the basis for the prevention and control strategy of human granulocytic anaplasmosis (HGA), a seroepidemiological investigation was carried out. Human serum samples were collected from the residents in Miyun and Huairou Districts of Beijing.AnaplasmaphagocytophilumIgG antibody was tested by indirect immunofluorescence assay (IFA). Results showed that 106 samples were positive ofAnaplasmaphagocytophilumIgG in total 801 samples, and the positive rate was 13.23%. The positive rate in Miyun district was 13.48%, and 12.70% in Huairou district. The difference was not statistically significant (P>0.05). In conclusion, the infection ofAnaplasmaphagocytophiluminfectionis prevalent in the normal population in Miyun and Huairou districts, and the surveillance, prevention and control of HGA should be strengthened in these areas.

Anaplasmaphagocytophilum; seroepidemiology; indirect immunofluorescence assay

WANG Quan-yi，Email: bjcdcxm@126.com

10.3969/j.issn.1002-2694.2016.010.002

王全意，Email:bjcdcxm@126.com

1.北京市疾病預防控制中心/北京市預防醫學研究中心，北京 100013；

2.首都醫科大學公共衛生學院，北京 100069

R183.5

A

1002-2694(2016)10-0861-04

2016-04-26；

2016-08-29

國家科技重大專項(No.2012ZX10004215-003-001)

Supported by the National Key Science and Technology Projects of China (No. 2012ZX10004215-003-001)