銀丹心泰滴丸標準提高研究

張炯怡 張志勇 宋琪雯

1貴州省食品檢驗檢測所 貴州省貴陽市 550004 2貴州省食品藥品檢驗所 貴州省貴陽市 550004 3貴州省醫科大學附屬醫院 貴州省貴陽市 550025

銀丹心泰滴丸標準提高研究

張炯怡1張志勇2宋琪雯3

1貴州省食品檢驗檢測所 貴州省貴陽市 550004 2貴州省食品藥品檢驗所 貴州省貴陽市 550004 3貴州省醫科大學附屬醫院 貴州省貴陽市 550025

目的：探究與分析如何提高銀丹心泰滴丸的質量標準。方法：采用薄層色譜法對處方中的滇丹參、絞股藍、艾片進行薄層色譜鑒別；對檢查項進行分析；采用高效液相色譜法測定銀丹心泰滴丸中總黃酮醇苷含量。結果：薄層色譜斑點清晰，陰性無干擾；含量測定刪除原標準中三氯甲烷超聲提取后揮干步驟，與原方法比計較結果無明顯差異，修訂后的方法更簡便。結論：所建立的方法簡便、準確，對其進行質量標準提高的研究，可以有效控制銀丹心泰滴丸的質量。

銀丹心泰滴丸；薄層色譜鑒別；高效液相色譜法銀丹心泰滴丸為中藥制劑，由銀杏葉、滇丹參、絞股藍、艾片四味藥材制成滴丸，具有活血化瘀，通脈止痛的功效。臨床上適用于淤血閉阻引起的胸痹，癥見胸悶，胸痛，心悸，冠心病，心絞痛患者。原質量標準中天然冰片、銀杏葉黃酮類為理化鑒別，為進一步提高銀丹心泰滴丸的質量，增加艾片及絞股藍薄層色譜鑒別方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1260高效液相色譜儀。

1.2 試藥

槲皮素（中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測定用，批號：100081-200406）、山奈素（中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測定用，批號：110861-200304）、異鼠李素對照品（中國藥品生物制品檢定所提供，供含量測定用，批號：110860-200406）。樣品由貴州君芝堂制藥股份有限公司提供。陰性樣品按處方組成制得。

2 性狀

本品為淺棕色或深棕色的圓珠形滴丸或薄膜衣滴丸，氣香，味微苦。

3 鑒別

3.1 滇丹參薄層色譜鑒別研究

取銀丹心泰滴丸10丸，研細，加甲醇10mL，超聲處理15分鐘，過濾，濾液低溫下揮干至1mL，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的對照品溶液。陰性樣品按處方組成制得，同法制成陰性空白對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗，吸取上述供試品溶液8μL、對照品溶液5μL，陰性空白對照溶液8μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，乙酸乙酯-甲苯-甲酸（7:8:0.8）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以二硝基苯肼試液。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。結果表明，分離度好，斑點顯色清晰，陰性無干擾，Rf值適中。

3.2 絞股藍薄層色譜鑒別研究

取銀丹心泰滴丸樣品100粒，加熱水30mL溶解，冷卻，加乙酸乙酯提取兩次，每次20mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加無水乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液；取絞股藍2g，加75%乙醇回流提取2次，過濾，濾液蒸干，同法制得對照溶液；陰性樣品按處方組成制得，同法制備絞股藍空白對照溶液；吸取上述三種溶液各10μL，分別點于同一硅膠G板上，以三氯甲烷-甲醇（20∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的藍色熒光斑點。結果表明，分離度好，斑點顯色清晰，陰性無干擾，Rf適中。

3.3 艾片薄層色譜鑒別研究

取本品10粒，研細，加甲醇10mL，超聲處理15分鐘，過濾，濾液低溫揮干至1mL，作為供試品溶液。另取龍腦對照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對照品溶液。陰性樣品按處方組成制得，同法制成陰性空白對照溶液。照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VI B）試驗，吸取上述三種溶液各2μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90℃）-乙酸乙酯（4:1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%香草醛硫酸溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰。日光下檢視。斑點清晰，分離度好，陰性無干擾。

4 檢查

4.1 重量差異

按中國藥典2010年版一部（附錄I K）滴丸劑檢查，三批樣品均符合規定。

4.2 溶散時限

按中國藥典2010年版一部（附錄XII A）崩解時限檢查法檢查，三批樣品均符合規定。

4.3 重金屬檢查

按中國藥典2010年版一部（附錄IX E）重金屬檢查法第二法檢查，三批樣品均符合規定。

4.4 砷鹽檢查

按中國藥典2010年版一部（附錄IX F）砷鹽檢查法第一法檢查，三批樣品均符合規定。

表1：3批樣品中總黃酮醇苷測定結果（n=2）

5 含量測定

5.1 色譜條件

色譜柱：迪馬Dianonsll C18（5μm，5.0mm×200mm），柱號：601339；流動相：甲醇-0.4%磷酸溶液（50∶50）；檢測波長：360nm；流速：1ml/min。

5.2 對照溶液的制備

分別取槲皮素、山奈素、異鼠李素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1mL含30μg的混合溶液，作為對照品溶液，即得。

5.3 供試品溶液的制備

取重量差異項下的本品，研細，混勻，取0.85g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加甲醇-25%鹽酸溶液（4:1）混合溶液25mL，加熱回流30分鐘，放冷，轉移至50mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

5.4 測定方法

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，測定。

5.5 系統適用性試驗

分別取槲皮素、山奈素、異鼠李素對照品溶液、供試品溶液和缺銀杏葉藥材的陰性空白溶液注入液相色譜儀，可得陰性空白在槲皮素、山奈素、異鼠李素位置處無干擾峰，槲皮素、山奈素、異鼠李素和其相近的其它峰分離完全（分離度>1.5），即本試驗條件下槲皮素、山奈素、異鼠李素與其他組分分離完全。槲皮素、山奈素、異鼠李素對照品的色譜圖中槲皮素的理論板數為6540，槲皮素連續進樣五次的RSD=0.2%，符合《中國藥典》2010版一部附錄高效液相色譜項下的規定。

5.6 樣品測定

3批樣品測定結果見表1。

三批樣品均符合規定。

6 功能主治

苗醫：維象烊丟象，賒細擋孟。陡：片尖蒙，蒙修。階：擺沖休，蒙給，來修底；中醫：活血化瘀，通脈止痛。用于瘀血閉阻引起的胸痹，癥見胸悶，胸痛，心悸，冠心病，心絞痛屬上述證候者。

7 用法用量

口服或舌下含服，一次10丸，一日3次，療程4周；或遵醫囑。

8 規格

每10丸重0.35g

9 討論

（1）鑒別項 3.1為滇丹參的薄層鑒別方法，原標準中展開劑為乙酸乙酯-苯-甲酸（7:8:0.8），本研究選用毒性相對較小，極性與苯相近的甲苯替換原展開劑的苯，結果表明，分離度好，斑點顯色清晰，陰性無干擾，故選擇其列入正文。

（2）鑒別項 3.3為方中艾片的薄層鑒別方法。銀丹心泰滴丸原質量標準WS-10492(ZD-0492)-2002（試行）處方中的天然冰片實際上為貴州習用的左旋龍腦（艾片），與中國藥典2010年版收載的天然冰片（右旋龍腦）不一致，在正式標準WS-10492(ZD-0492)-2002-2012Z處方中已被修訂為艾片。因此，本研究參照《中國藥典》2010版一部82頁艾片藥材項下的鑒別方法，增加銀丹心泰滴丸中艾片的TLC薄層鑒別，以龍腦為對照品，供試品色譜中，在對照藥品色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。結果表明，分離度好，斑點顯色清晰，陰性無干擾，故選擇其列入正文。

（3）取三批樣品，按原標準操作，發現用三氯甲烷超聲提取后，形成較濃的混懸液，棄去三氯甲烷一步較難操作，用濾紙濾過方法，僅能除去7～8mL三氯甲烷，藥渣揮干三氯甲烷后，繼續操作，結果三批樣品中有一批不符合規定，經考察，三氯甲烷超聲提取后，水浴直接揮干三氯甲烷。測試結果，三批樣品均符合規定。通過分析，原標準中用三氯甲烷超聲提取后，直接揮干三氯甲烷這一步驟已無任何意義。運用原標準方法和修訂后標準方法進行了比對測試，結果無明顯差異，修訂后的方法，更簡便，故正文中刪除了三氯甲烷超聲提取后揮干的步驟。

貴州省科技支撐項目［黔科合SY字（2015）3032］。