當歸藤的化學成分研究

闕祖亮+劉鼎+陳勇+張昕+魏江存+龐丹清

【摘要】目的： 研究廣西壯族和瑤族民間常用藥材當歸藤的化學成分，為開發利用當歸藤藥材資源提供實驗支持。方法：乙醇回流提取當歸藤藥材，濃縮成浸膏，用系統溶劑分離法萃取得到不同極性的當歸藤提取部位，然后用硅膠柱層析法對石油醚部位進行分離純化，得到的單體成分通過波譜方法進行鑒定。結果：從石油醚部位分離得到4個化合物，經結構鑒定其中的兩個分別是豆甾醇（II）、維生素E（III）。結論：這兩個化合物均為首次從當歸藤中分離得到。

【關鍵詞】當歸藤；化學成分；壯藥；瑤藥

【中圖分類號】R284【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2017）05-0005-05

當歸藤為紫金?？扑崽僮訉僦参锂敋w藤Embelia parviflora Wall ex A DC的根與老藤[1]，又名小花酸藤子、土當歸、篩箕蔃等。藥性溫和，具有補血活血、益精壯陽、強腰膝的功效。民間常用于治療血虛諸癥、月經不調、產后虛弱、腰腿酸痛、跌打骨折等癥[1-3]。壯醫認為，其具有補血益精、通谷道水道、祛濕毒的功效，可用于治發旺（風濕骨痛）、勒內（血虛）、京瑟（閉經）、心頭痛（胃痛）等癥狀[4]。當歸藤是是廣西壯族和瑤族民間常用藥材，也是廣西特色中成藥（桂龍藥膏和桂龍藥酒）的主要藥材[1]?，幾遽t藥是我國傳統醫藥的重要組成部分，歷史悠久，明清時代就有“入山采藥、沿寨行醫”、“負藥入城、醫治頗效”的瑤醫隊伍；長期以來，瑤族的民間醫藥資源十分豐富，根據八十年代初對廣西大瑤山自然資源的綜合考察報告，發現區域植物約有2335種，且還有不少稀有科類[5-6]。

隨著國內對當歸藤的應用越來越廣泛，為了更安全有效地利用該藥材，對當歸藤藥材進行化學成分研究顯得非常重要。但目前國內在化學成分方面僅對該藥材乙醇提取物的石油醚部位進行了少量研究，盧文杰等[7]從該藥材根的乙醇提取物中分離到了四個單體化合物，其中三個化合物鑒定成功，分別為正三十烷酸乙酯、α-菠甾醇及正三十烷酸。當歸藤藥材資源豐富，民間使用廣泛，為了更好地開發利用當歸藤藥材資源做好前期準備，本實驗采用現代分離分析技術，對當歸藤的化學成分進行系統研究。

1儀器與材料

11藥材當歸藤藥材于2012年6月購自廣西靖西縣，經廣西中醫藥大學郭敏副教授鑒定為紫金?？扑崽僮訉佼敋w藤Embelia parviflora Wallex A DC干燥全株。標本存于廣西中醫藥大學藥物分析教研室。

12儀器6890-5973N 氣質聯用儀（美國安捷倫公司）；HP-5MS UI彈性石英毛細管色譜柱（025um×025mm×30m），G1701DA MSD化學工作站，NIST8譜庫；Agilent8453紫外-可見分光光度儀（美國Agilent科技公司）；WDF型多功能提取濃縮機組（溫州中祥輕工機械廠）；OSB-2100型旋轉蒸發儀（東京理化儀器株式會社）；BP-211D型電子天平（德國賽多利斯公司）；SQP電子天平（德國賽多利斯公司）；各種不同規格口徑的普通玻璃層析柱。

13材料柱層析硅膠（200～300目、100～200目，西隴化工化學試劑有限公司）；薄層層析硅膠G、薄層層析硅膠H（青島海洋化工有限公司）； 提取用乙醇為食用酒精（95%乙醇），南寧軍正酒廠；石油醚（60～90℃）、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇和95%乙醇均為西隴化工化學試劑有限公司提供，均為分析純。

2當歸藤化學成分的提取、分離與純化

21提取分離與純化取當歸藤干藥材23kg，適當粉碎，用8倍量乙醇加熱回流提取三次，每次2h，減壓回收溶劑，得乙醇提取物浸膏234kg（得膏率約10%）。取2kg浸膏，依次用石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯和正丁醇溶劑萃取，分別得到石油醚部位浸膏130g，乙酸乙酯部位浸膏330g以及正丁醇部位浸膏685g、水部位浸膏155g和不溶物680g。

在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）第15至20瓶的大柱餾分中得到一個粗結晶，該樣品能溶于甲醇，拌硅膠（硅膠H）上小柱，用石油醚-乙酸乙酯（15∶1～5∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）的餾分中有片狀結晶化合物I析出，約17mg。

在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的大柱餾分中有白色結晶析出，拌硅膠（硅膠H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（10∶1→1∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）的餾分低9～14瓶中得到白色粉末結晶化合物II，約30mg。

在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的大柱餾分第18～27瓶中淡黃色結晶析出，拌硅膠（硅膠H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（10∶1→1∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的餾分中得到淡黃色粉末化合物III，約22mg。

取石油醚部位浸膏60g，經硅膠柱色譜（100～200目）進行分離純化，石油醚-乙酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度洗脫。在石油醚-乙酸乙酯（10∶1）的大柱餾分中有油狀物析出，拌硅膠（硅膠H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（20∶1→5∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的餾分中得到微黃色油狀化合物IV，約20mg。

22提取、分離與純化流程圖

3單體化合物的結構鑒定

31化合物II的結構鑒定

311物理性質無色結晶性粉末，溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醇、丙酮，不溶于水。

312GC-MS鑒定經儀器NIST08譜庫檢索得到該化合物：英文名：Stigmasterol。中文名：豆甾醇，條目號：199250，CAS 編號：000083-48-7，分子式：C29H48O。匹配度：99%。

313綜合解析綜合理化鑒別、氣質聯用圖譜和文獻數據，確定化合物II其為豆甾醇（Stigmasterol）。

化合物II ：為白色針晶 （甲醇 ）， m p 166～ 168℃， Liberman-Burchard 反應呈陽性。IR（cm-1）：3 410，2 950， 2 920， 2 860， 1 640， 1 455， 1 435， 1 374， 1 068， 800 1 H-NM R（CDCl3， TM S）： W 5 35（1H， d， J = 4 8Hz）、 5 14（1H， q， J = 24 0 Hz）、 5 00（1H， q， J = 23 6 Hz）、 350（1H， m ） 13 C-NMR： 37 2（C-1）， 31 5（C-2）， 71 8（C-3）， 42 1（C-4）， 140 6（C-5）， 121 7（C-6）， 31 8（C-7）， 31 8（C-8）， 50 1（C-9）， 37 2（C-10）， 21 0（C-11）， 40 5（C-12）， 42 2（C-13）， 56 8（C-14）， 24 3（C-15）， 29 7（C-16）， 55 9（C-17）， 12 0（C-18）， 19 3（C-19）， 42 1（C-20）， 21 2（C-21）， 138 3（C-22）， 129 2（C-23）， 51 2（C-24）， 31 8（C-25）， 21 1（C-26）， 18 9（C-27）， 25 4（C-28）， 12 2（C-29）。

32化合物III的結構鑒定

321物理性質蠟油狀偏黃，易溶于甲醇等有機溶劑，不溶于水，溶于乙醇，可與丙酮、氯仿、乙醚和植物油混溶。322GC-MS鑒定經儀器NJST08譜庫檢索得到該化合物英文名：Vitamin E。中文名：維生素E。條目號：203745。CAS 編號：000059-02-9。分子式：C29H50O2。匹配度：97%。

323綜合解析綜合物理性質和氣質聯用圖譜與文獻資料，確定化合物III為維生素E（Vitamin E），化學結構式見圖7。

從氣相色譜圖中可以看出，化合物III并不是單個成分，而是混合物，采用氣質聯用鑒別，得到表1，成分1，2，6，匹配度超過90%，除去維生素E外，其他兩個成分可以確定其為

成分1

英文名：1，2-Benzenedicarboxylic acid

中文名：鄰苯二甲酸

成分2

英文名：9-Octadecenamide， （Z）-

中文名：油酸酰胺；油酰胺； （Z）-9-十八烯酸酰胺

化合物III：黃色油狀，分子式為 C29H50O2；EI-MS m/z： 430 [M]+， 431 [M+H]+， 205。 1H-NMR （400MHz， CDCl3） δ： 427 （1H， s， -OH）， 262 （2H， t， J = 67Hz， H-4）， 218 （3H， s， H-7a）， 213 （6H， s， H-5a， 8a），180 （2H， m， H-3）， 125 （3H， s， H-2a）； 13C-NMR （100MHz， CDCl3） δ： 1457 （C-8a）， 1447 （C-6）， 1227（C-8）， 1212 （C-7）， 1187 （C-5）， 1175 （C-4a）， 746（C-2）， 399 （C-1′）， 395 （C-11′）， 376 （C-3′， 5′， 7′）， 374（C-9′）， 329 （C-4′）， 328 （C-8′）， 317 （C-3）， 281 （C-12′），250 （C-10′）， 246 （C-6′）， 239 （C-2a）， 229 （C-12′a），228 （C-13′）， 212 （C-2′）， 209 （C-4）， 199 （C-4′a）， 198（C-8′a）， 124 （C-7a）， 119 （C-8a）， 114 （C-5a）。

4討論

當歸藤是廣西少數民族民間常用藥，也是生產中成藥的原料藥，具有活血補血、強腰膝、益精壯陽的功效，用于治療血虛諸癥、閉經、月經不調、腰腿酸痛、產后虛弱、跌打骨折等癥[1，3]。本實驗對廣西民族藥當歸藤進行了化學成分的分析研究。從石油醚部位分離純化得到四個單體，通過理化性質和波譜解析等方法確定其中2個化合物結構，分別是豆甾醇和維生素E。維生素E是脂溶性維生素，又稱生育酚，是最主要的抗氧化劑之一。其可促進性激素分泌，使男子精子活力和數量增加；使女子雌性激素濃度增高，提高生育能力，預防流產，燒傷、凍傷、毛細血管出血、更年期綜合癥、美容等[8]。從當歸藤中分離出維生素E印證了當歸藤的藥效。

本研究從當歸藤中分離得到兩個化合物，為闡明當歸藤藥理作用提供資料支撐，但其化學成分及藥理活性作用還有待進一步研究。

參考文獻

[1]廣西壯族自治區衛生廳.廣西中藥材標準（1990版）[M].南寧：廣西科學技術出版社， 1992：44.

[2] 楊菁，張燕.不孕癥研究概況[J]. 國外醫學婦幼保健分冊， 2005，16（4）：232-234.

[3] 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].上海：上?？茖W技術出版社， 1999，6：76-77.

[4] 廣西壯族自治區食品藥品監督管理局. 廣西壯族自治區壯藥質量標準第一卷[M].南寧：廣西科學技術出版社，2008：93.

[5] 戴斌，丘翠嫦. 瑤藥資源及其開發利用研究進展[J]. 中國民族民間醫藥，2003，06：314-318.

[6] 中國科學院中國植物志編委會. 中國植物志[M].北京：科學出版社， 1979， 58： 113.

[7] 陳家源，盧文杰，王雪芬，等.小花酸藤子化學成分的研究[J].華西藥學，1998，13（2）： 95-96.

[8]吳虎平，張芳芳.維生素E的臨床用途[J].中國鄉村醫藥，2003（10）：45-46.