輸血檢驗中卡式微柱凝膠試驗的應用探討

劉颯爽 陳宇鋒 王小偉

【摘要】 目的 探討卡式微柱凝膠試驗應用于輸血檢驗中的臨床效果。方法 244例輸血患者， 隨機分為對照組和觀察組， 每組122例。對照組開展鹽水試管法， 觀察組進行卡式微柱凝膠試驗， 以測定患者血型并開展正向、反向定型試驗， 比較兩組檢測符合率。結果 兩組正定型與反定型符合率比較差異無統計學意義（χ2=3.037、2.734， P>0.05）， 共9例不符合者， 再用生理鹽水清洗后鑒定， 發現紅細胞數量異常者2例， 血清蛋白中有纖維蛋白者3例， 血液樣本保存時間過久無法使用者1例;進一步檢查剩余

3例血液標本后發現1例存在自身凝集， 1例自行凝集障礙， 1例存在腫瘤因子。結論 卡式微柱凝膠試驗在輸血檢驗中使用可確保輸血安全， 且其能快速的完成血液配對， 已達到檢驗的目的， 值得推廣。

【關鍵詞】 輸血檢驗;卡式微柱凝膠試驗;應用

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.07.117

輸血為臨床搶救與治療患者的重要措施， 因此一定要確保用血及時且安全， 正確配血才能確保用血安全。血型鑒定為輸血必要過程， 其正確性直接影響患者生命安全輸血。以往臨床主要采用手工鹽水試管法開展血型鑒定， 且一般情況下僅開展正向或反向定型法， 難以標準化， 有較多干擾因素， 時常發生血型錯檢現象[1]。因此， 傳統的血液配對方法已不能滿足目前的醫學治療要求。眾多醫學學者在臨床輸血的檢驗中不斷展開實驗探索， 最終發現了卡式微柱凝膠試驗在臨床輸血的檢驗中完全滿足了現代醫學的臨床輸血檢驗的需求。近年來， 臨床廣泛應用卡式微柱凝膠試驗開展血型鑒定也證明了其基于抗人球蛋白， 可對不規則抗體予以有效篩查， 與臨床輸血要求完全相符。同時， 卡式微柱凝膠還是一種免疫的血型血清檢測方法， 其可快速、精確地完成血液配對， 且其產生的醫藥污染率小， 檢測所需的樣品劑量也小。如此一來， 臨床輸血檢驗中的檢驗環節里， 卡式微柱膠試驗就逐漸取代了傳統的血型血清檢測方法?，F選取患者244例， 探討卡式微柱凝膠試驗的應用效果?，F報告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2016年8月～2017年8月收治的輸血患者244例， 隨機分為對照組和觀察組， 每組122例。

對照組中男59例， 女63例;年齡1～89歲， 平均年齡（46.2± 11.8）歲。觀察組中男54例， 女68例;年齡2～87歲， 平均年齡（47.5±12.4）歲。兩組性別、年齡等一般資料比較， 差異無統計學意義（P>0.05）， 具有均衡性。

1. 2 方法 對照組使用鹽水試管法：根據規范的要求， 使用傳統的鹽水檢測方法在試管內對正向定型與反向定型進行檢驗。觀察組開展卡式微柱凝膠試驗：取出卡式凝膠管做好標記， 將微柱凝膠試劑卡的六支凝膠微管標號， 將待檢者0.5%～0.8%紅細胞懸液分別加入第1～4支微管中， 每管50 μl， 將待檢查血清分別加入第5支和第6支微管中， 每管50 μl。將已知A型和B型紅細胞0.5%～0.8%濃度懸液分別加入第5支和第6支微管中， 每管50 μl， 即可使用專用離心機離心5 min， 900 r/min 2 min， 1500 r/min 3 min， 取出肉眼判定結果。觀察兩組檢驗符合情況。

1. 3 檢驗標準 陽性標準：紅細胞抗原與相應抗體在微柱凝膠中形成的特異性抗原抗體復合物浮在凝膠表面或膠中， 為陽性反應。反應強度：特異性紅細胞抗原抗體復合物位于膠表面為強陽性反應：復合物在膠中為弱陽性反應：愈靠近膠底部顆粒愈小， 反應愈弱。陰性標準：被檢紅細胞抗原無相應的抗體結合， 不出現特異性抗原抗體復合物， 紅細胞沉于微柱凝膠的底部。

1. 4 統計學方法 采用SPSS20.0統計學軟件對數據進行處理。計量資料以均數±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗;計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

兩組正定型與反定型符合率比較差異無統計學意義（χ2=3.037、2.734， P>0.05）。見表1。共9例不符合者， 再用生理鹽水清洗后鑒定， 發現紅細胞數量異常者2例， 血清蛋白中有纖維蛋白者3例， 血液樣本保存時間過久無法使用者1例;進一步檢查剩余3例血液標本后發現1例存在自身凝集， 1例自行凝集障礙， 1例存在腫瘤因子。

3 討論

臨床輸血地位無法替代， 為確保其安全性。安全輸血是醫療救治系統的一個基本組成部分， 能夠起到拯救生命， 治療生命的作用。安全輸血牽涉到眾多環節， 其中輸血前血型和輸血前相容性檢測的環節， 作為醫院輸血科尤為重要。因此輸血前一定要準確、快速開展血型鑒定?！度珖R床檢驗操作規程》要求血型鑒定時通過正向與反向定型對ABO血型予以準確鑒定， 并對紅細胞懸液濃度、實際用量、加樣順序及離心時間與速度均作出明確要求[2， 3]。然而當前國內諸多基層醫院鑒定血型時僅開展正向定型， 反向定型被忽視， 且隨意操作， 標準化難度高， 易導致血型錯檢事件， 因此臨床近年來使用卡式微柱凝膠試驗， 可快速配對血清血型。

法國學者首次于1986年研發出卡式微柱凝膠試驗， 此為免疫學檢測新技術， 為微柱凝膠技術結合于所有血型鑒定技術的產物， 美國食品藥品監督管理局（FDA）于1994年認可該技術[4]， 經過持續改進與應用后多數發達國家已經該技術作為常規檢測紅細胞血型、血清的技術?？ㄊ轿⒅z試驗主要通過對葡聚糖凝膠濃度予以調節后對分子篩孔徑大小予以控制， 使分子篩只允許游離分子通過后將凝集與游離紅細胞分離;在凝膠上部反應添加紅細胞與血清并行離心處理后凝膠阻礙凝集紅細胞而在凝膠內部或上部停留， 提示凝集反應發生， 可判定為陽性;反之所有紅細胞在凝膠底部停留提示無凝集反應， 判定為陰性[5]。部分老年人、新生兒、部分惡性腫瘤、白血病患者紅細胞（RBC）抗原較弱， 手工操作難以判別血型， 但卡式檢測法只允許未凝集的RBC通過， 已凝集的則在分離柱外， 故而靈敏度較高， 特別是檢測意義重大的抗-E等紅細胞抗體時敏感度更高[6]。此外新生兒溶血性疾病或自身免疫性疾病患者RBC也會自發凝集， RBC膜獲得性或遺傳性異常也會導致凝集， 正定型檢測時假凝集會導致錯檢， 而卡式法中添加抗人球蛋白， 有利于特異性凝集紅細胞， 故而特異性更高。正反定型結合可對單純正定型檢測不足予以彌補。

本組結果表明， 觀察組正定型與反定型符合率分別為100.0%、99.2%， 對照組分別為97.5%、96.9%， 說明卡式微柱凝膠試驗具備推廣價值。該試驗中應用標準化定量操作， 可將人員操作隨意性最大限度減少， 且有較好的重復性， 應用凝膠分子篩技術亦可提高結果的客觀性， 且標本量需求較少， 特別適用于大面積燒傷或新生兒等難以抽取標本的患者[7]。同時操作期間無需洗滌， 抗單球蛋白抗體不會被中和導致假陰性?？ㄊ綑z測法假陽性或假陰性的原因為紅細胞濃度過高或過低致使離心不徹底， 纖維蛋白血清、細胞污染或細胞凝塊等， 因此一定要確保細胞濃度準確， 資料稱2%最佳[8-12]。在實驗前還需離心處理有氣泡新卡， 避免撕膜時微柱內容物發生交叉污染現象。但該檢測法成本較高， 因此使用國產試劑以降低成本， 可進一步推廣該方法。

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[收稿日期：2017-09-28]