自體牙移植到人工牙槽窩的動物實驗

姚東升　高黎　裴海娟　盧泰青　張彥喜

在臨床工作中，自體牙移植[1]固有牙槽窩常見，而自體牙移植人工牙槽窩很少，究其原因：①對技術要求較高；②要有必要的設備；③還不能作為常規手術在臨床應用。自體移植牙與種植牙比較，自體移植牙具有牙周膜愈合，有生理性動度，能誘導成骨[2]，能誘導形成牙齦乳頭，牙根未發育完成的年輕恒牙有萌出可能性，可通過正畸矯正移動[3]，無年齡要求等優點。本研究進行了犬自體牙移植到人工牙槽窩的實驗，評價自體牙移植到人工牙槽窩的可行性，為口腔臨床實踐提供動物實驗參考。

1　材料與方法

1.1　實驗材料

實驗動物：普通成年雜交犬(12 個月齡)(由鄭州大學動物實驗中心提供), 平均每只重12 kg。實驗器械：ITI種植機及配套工具盒，口腔外科手術器械。設備 ：顯微CT、硬組織切片設備、顯微鏡。

1.2　實驗方法

1.2.1實驗動物分組選取體重12 kg的健康雜交犬6 只，年齡12 個月齡左右，所有的實驗犬牙列完整，牙體無齲壞、 無缺損， 無牙周??； 隨機分組為：A組(對照組)， 2 只鼠4 顆牙。 B組(實驗組)4 只4 顆牙。

1.2.2實驗設計A組犬自體牙移植到固有牙槽窩，實驗犬編號為：A1、A2將2 只對照組犬4 顆上頜牙13、 23牙位切牙拔除后對換移植到13、 23牙位固有牙槽窩內，彈性固定。B組，犬自體牙移植到人工牙槽窩，實驗犬編號為： 4 只(B1、B2、B3、B4)先拔出實驗組4 只實驗犬的4 顆13牙位切牙，牙槽骨愈合3 個月后拔除23牙位牙齒植入13牙位人工牙槽窩內。拔除牙標識后用復方氯化鈉液紗布包裹后低溫冷藏，替代供牙模型。

1.3　手術過程

消毒麻醉后拔出實驗組4 顆13牙位切牙，牙槽窩愈合3 個月后用于實驗組制備人工牙槽窩；拔出13牙位切牙，標識后用復方氯化鈉液紗布包裹后低溫冷藏，替代供牙模型?？p合拔牙創牙齦組織。將對照組犬4 顆自體牙移植于固有牙槽窩，實驗犬上頜13、 23牙位切牙拔除后對換移植到23、 13牙位固有牙槽窩。 將實驗組犬4 顆牙自體牙移植到人工牙槽窩，實驗犬牙上頜23牙位切牙拔除后移植到13牙位人工牙槽窩。

1.4　術后處理

術后1 周復查各個移植牙的牙齦愈合良好，拆除縫線。4 周后檢查移植牙無松動、無脫落，牙齦無炎癥，拆除固位結扎絲及樹脂材料。移植術16 周后處死對照組和實驗組實驗犬，取實驗牙及牙周組織， 4%甲醛液行組織固定，用顯微CT、硬組織切片形態學觀察所有實驗犬移植牙術后牙周愈合及牙槽窩改建情況。

2　結　果

2.1　顯微CT的骨形態計量觀察

采用德國Siemens Inveon CT，分析處理軟件為Micview三維重建處理軟件及ABA專用骨骼分析軟件，掃描分辨率選擇20～40 μm。

圖 1和表 1的顯微CT圖片及數據對比，固有牙槽窩和人工牙槽窩內的移植牙牙周膜間隙存在；牙周圍無骨粘連，牙根無吸收等現象。各移植牙周圍的骨小梁數目、骨小梁的間距、密度等均無明顯差異。 本實驗樣本為獨立樣本，用SPSS 18.0軟件通過獨立樣本t檢驗對本實驗樣本進行分析，對不同的移植部位對自體牙移植術的影響因素進行分析，對移植牙周不同部位骨質情況進行測量(P>0.05)表示2 組之間差異無顯著性。分析2 組實驗結果無統計學意義。

2.2　硬組織切片形態學觀察

犬帶有移植牙的小型骨樣本(標本長、寬度均不超過1.5 cm)采用不脫鈣塑料包埋及染色，將樣本制成的包埋塊固定于切片機上(Leica 1600)。厚度100 μm。染色封片后用熒光生物顯微鏡(尼康)觀察切片，隨機選取實驗標本，選擇圖像中靠近移植牙牙周圍為定點，攝片觀察。

形態測定指數表面測定值對照組實驗組P值BV/TV(材料體積/總體積)0．167±0．0120．190±0．0230．0550BS/BV(材料/總體積)1/mm10．499±1．139．375±0．8700．0824TbTh(平均小梁厚度)mm0．174±0．0130．193±0．0190．0708TbN(平均小梁數量)mm0．960±0．0851．087±0．1270．0692TbSp(平均小梁間距)mm0．868±0．0740．798±0．0330．0604

2.3　顯微鏡下根尖部位觀察

經過HE染色的切片，顯微鏡下觀察移植牙頸部新生骨組織骨小梁與移植牙根愈合的形態學表現(圖 2)。移植牙與周圍骨組織均形成良好的牙周膜愈合?？梢娨浦惭李i部及根周均形成牙周纖維附著。所有移植牙結合處均可見新生的骨細胞呈均勻分布，骨周愈小梁呈網狀排列，結構清晰。成骨細胞、破骨細胞均為紫紅色。

圖 2新生骨組織與移植牙周愈合(HE, A～B： ×100， C： ×200， D： ×400)

Fig 2New-born bone and parodontium around the transplanted teeth(HE, A-B： ×100， C： ×200， D： ×400)

3　討　論

自體牙移植到人工牙槽窩與固有牙槽窩的牙周膜愈合的情況是不同的，愈合的差別在于人工預備的牙槽窩的骨壁沒有牙周纖維[4]。

3.1　供牙、受區的選擇

在選擇的供牙應符合以下標準： ①供牙牙周健康； ②牙體組織無缺損，牙髓組織活力正常； ③供牙的根尖發育正常(對于根尖未發育完成的移植牙也可行移植術，且術后有利于移植牙的存活); ④移植牙應為非功能牙齒，例如埋伏牙、錯位牙、阻生牙等。受區的選擇：①有合適的骨寬度及骨高度[4]； ②有足夠的頜間距離； ③有健康的牙齦組織。

3.2　受區牙槽窩的制備與移植牙的初期穩定性

如果人工制備的牙槽窩與供牙根部相對較吻合，那么供牙植入牙齦組織嚴密縫合后移植牙會有一個較好的初期穩定性，再加上鋼絲的固定，為移植牙牙周愈合與牙槽骨改建[2]提供良好的條件。但是人工牙槽窩壁與供牙模型的牙根周圍要有一定的空間確保牙周膜的再生與重建。有條件可以拍攝CBCT影像聯合CAD/CAM 設計并制作出供牙模型[5]，用于人工牙槽窩的制備及試植，移植牙和人工制備牙槽窩的吻合會更精確，不但能顯著縮短術中試植供牙的時間，而且能減少對供牙牙周膜的損傷，對移植牙的成活率[6]和成功率[7]會有更大的提高。

3.3　供牙牙周膜的保護

供牙的拔出方式有多種多樣，但是國內外學者是達成共識的：在拔牙過程中必須防止斷根，避免損傷牙周組織。其中保護牙周膜最為關鍵，Andreasen 等[8]分析了移植牙手術方式及程序對移植牙術后活髓及牙周膜愈合的影響，得出的結論：移植牙手術方式及程序可以不同，但術中必須保護牙周組織的完整性是移植牙牙周愈合的關鍵[9]，因此無創傷的拔出供牙以降低牙周膜損傷的風險是必須的。Kim 等[10]在對182 顆自體移植牙的分析研究中發現，如果在拔出供牙中損傷牙周膜或是牙骨質，容易引起牙根吸收。因此避免任何形式的牙周創傷對移植牙手術的成功是非常重要的。特別是在移植到人工牙槽窩的手術中更要著重保護供牙牙周膜，因為人工牙槽窩是沒有牙周膜的，完全靠供牙的牙周膜愈合來修復。

3.4　牙移植后的固定

Bauss 等[11]比較了76 顆移植牙分別采用縫線固定和堅強固定后，采用縫線固定7 d拆除的成功率是92%,采用堅強固定(牙弓夾板加復合樹脂)4 周后拆除的成功率為75%?？p線固定由于縫線在口腔內的磨損，一般不到7 d縫線就會脫落，不能達到固定移植牙預期的牙周膜愈合[9]和牙槽骨改建[2]的時間要求。所以也有局限性。我們采用的是彈性固定：使用0.18 mm彈性鎳鈦絲用光固化樹脂粘固固定，獲得了理想的固定效果。因為移植的牙齒在行使功能時的微動既可以緩沖合力帶來的沖擊，又可以促進牙周組織的微循環，促使牙周牙髓血管再生。所以固定應保證移植牙有小幅度的動度，以保證給予相應地功能刺激而防止粘連，促使牙周組織愈合。固定4 周時間，即可達到理想的移植牙穩定效果。

隨著新理論的發展和新技術使用，自體牙移植的效果得到了滿意提升。但是移植牙適應癥相對局限，不能作為常規手術推廣臨床應用，如何擴大自體牙移植的適應癥在以后的發展中會成為一個重要課題，我們做的“犬自體牙移植人工牙槽窩的實驗”是對擴大自體牙移植的適應癥做出的初步研究，由于技術和設備的限制，很多的研究細節還值得進一步的去推敲。隨著技術和材料的不斷進步，自體牙移植必將對保持牙列完整、恢復牙列功能[12]，并提供可接受的美學和生理學結果做出更大的貢獻。

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