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關于酶標儀計量檢測的探討

2018-12-06 23:40潘琳
商品與質量 2018年52期
關鍵詞:精準度光度波長

潘琳

阿克蘇地區檢驗檢測中心 新疆阿克蘇 843000

酶標儀一般在食品工業、臨床檢驗等方面被廣泛使用,其主要是對樣本進行檢測,對樣本進行定量或者定性的檢測,一般通過吸光度進行確定。但在實際檢測的過程中,其會受到保溫、洗滌等多方面的因素影響,進而使得測量結果發生變化。因此,如果想要提升測量結果的精準性,就必須要對測量過程中的質量嚴格的把控,對酶標儀進行定期的計量。但縱觀國際上還沒有對其性能檢測和評價的相關完善報道,與此同時,國家在計量檢測中相應的規程沒有得到良好的應用和實施,因此導致在諸多的臨床實驗中,針對于酶標儀沒有準確且系統的計量檢測計劃。因此,通過筆者的實踐和探索,擬定了一套計量檢測的方式以供參考。

1 酶標儀的結構和工作原理

酶標儀一般都是通過其產生的顯色反應,并根據不同物質對譜線的吸收原理,遵守朗伯比爾相關的定律,從而進行相關分析的儀器,其主要通過比色法來進行酶含量的確定。酶標儀從某種方面來講就是一臺光電比色計,或者說其為分光光度計,因為其主要的工作原理、結構都與光電比色計相同[1]。其主要由單色器、光源等系統組成。

2 酶標儀計量檢測的必要性

在臨床工作中對血清或其他組織進行測量,測量其中的酶的水平,對諸多疾病的診療都有著非常重要的作用。在測定酶的過程中,可以利用生物化學相關的方式對酶的活性進行測量[2]。另外一種方式為將酶作為一種蛋白,繼而利用免疫方法來對其質量進行測定。相比來說測量酶的活性是最廣泛應用的方式,主要源于其迅速、靈敏等優勢,因此被廣泛的使用,其主要是通過酶標儀來進行相關的測定工作。與此同時,近些年來酶標儀相關的技術也有所提升,進而也有效提升了酶免疫分析法的質量,其精準度、自動化度明顯提高。最明顯的為近些年來進口、國產的酶標儀的質量有所提高,但通過相關探究發現,雖然酶標儀的發展迅速,但是關于其計量測量相關的方法仍不多見。其中由于太過簡單,或者太過具體,又或者過于籠統,從而導致沒有使用、通用的價值,也沒有良好的操作性。近些年來,酶標儀已經成為與臨床實驗、食品工業相關的醫療機構、食品廠家中的必備設備之一。但其在應用中也是頻繁出現問題,因此對酶標儀進行質量方面、性能方面的研究已迫在眉睫[3]。但我國關于酶標儀相關的計量檢測規程沒有在實際中進行嚴格的落實,也沒有足夠的實用性,但在實際工作中又必須對其進行質量控制和計量檢測。因此針對于不同廠家的酶標儀進行論證并建立相對完善的計量、檢測方式十分有必要。

3 酶標儀計量檢測的方式

3.1 檢測濾光片波長的精準度

濾光片的波長準確度是通過檢測值檢取標定值所產生的數值,其應控制偏差在510nm以內。

3.2 檢測酶標儀吸光的穩定度

在酶標儀的吸光度方面,其吸光度值會因為漂移而產生變化,其在十分鐘之內產生的變化數值應該控制在0.005A以內,而對其電壓的變動在百分之十的時候,酶標儀相關的吸光度值應該控制在0.003A以內。

3.3 檢測酶標儀在零點漂移值

在進行該項檢測時,首先應該準備十個小孔杯,然后在小孔杯的通道中,在其相應的位置中加入100ul的蒸餾水,同時將其調零,然后每過三十分鐘450nm時進行一次測定,反復觀察到兩小時,所得出的測定值與原有的零點之間產生的差數值,則被視為零點漂移,其偏差應該控制在0.003A以內。

3.4 檢測酶標儀吸光度的準確值

首先要選取三塊標準干涉濾光片,這三塊濾光片要有不同的波長,然后對隨意選擇的三個通道進行相關的平行測定,該測定每天要進行兩次,總共測定達到六天,分別進行計算每批內、每天的每批之間、隔日間產生的精密度以及總精密度相關的CV百分比,同時要對其偏差進行控制,要控制在0.09A以內。

3.5 檢測酶標儀的線性

當在450nm單波長狀態中時,要使用蒸餾水來進行調零的工作,然后再采用五塊標準干涉濾光片,同樣也要選取不同波長的濾光片,然后隨意選擇對應的五個通道進行平行測定工作,同樣是總共測定六天,且每天要進行兩次測定。然后進行回歸方程的計算,在方程中利用r來表示相關的系數,用sy.x來表示其標準估計誤差。與此同時要控制器偏差在百分之五以內。

4 結語

酶標儀在我國臨床實驗、食品工業等方面有著越來越多的應用,因此在實際對其應用的過程中,需要定期的校準,同時利用較為系統、完善的校準方式進行校準工作,這是從事關于臨床實驗相關工作的人員的首要任務,其可以提升相關檢測結果的精準度和可比性。

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