PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的臨床研究

陳亥　許夢潔　陳楊芳　許鍇

【摘? 要】目的：探究PCR檢驗法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的臨床價值。方法：選取溫州市人民醫院收治的48例細菌性陰道炎患者，均通過PCR檢驗法（PCR組）、細菌培養法（細菌培養組）進行檢驗， 對比兩組陽性檢出率和細菌檢出率。結果：陽性檢出率比較，PCR組高于細菌培養組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR組加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的細菌檢出率，均高于細菌培養組，無顯著差異（P>0.05）。結論：在進行陰道細菌檢驗時，PCR檢驗法的陽性檢出率和細菌檢出率比細菌培養法高，值得在臨床應用。

【關鍵詞】細菌性陰道炎;陰道細菌檢驗;PCR檢驗法;細菌培養法

【中圖分類號】R446;R711????? 【文獻標識碼】A?????? 【文章編號】1672-3783（2020）01-0038-02

陰道炎屬女性常見炎性疾病，由陰道細菌感染所致，發病率較高，病情嚴重時可造成嚴重后果，如不孕、異位妊娠、慢性盆腔炎等，危害患者身體健康，影響其正常的生活和工作^[1]。因此，必須予以患者有效的診斷方法，為下一步治療奠定好基礎?；诖?，本次研究將以溫州市人民影院收治的48例患者為例，均進行PCR檢驗法和細菌培養法進行陰道細菌檢驗，報道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

本次研究由溫州市人民醫院倫理委員會批準，選取在2017年1月～2019年2月期間，我院收治的細菌性陰道炎患者48例，符合臨床診斷標準?；颊呔橥鈪⑴c本次研究，并簽署研究知情書其基線資料：（1）年齡：最小年齡28歲，最大年齡46歲，平均年齡（35.68±2.25）歲;（2）病程：最短病程4個月，最長病程20個月，平均病程（12.65±3.67）個月;（3）細菌類型：加特納菌7例，棒狀桿菌16例，腸球菌25例。

1.2方法

在患者陰道后穹窿部，用無菌棉簽，采集陰道分泌物，并用生理鹽水貯存。

1.2.1PCR組

行PCR檢驗，首先將貯存陰道分泌物的生理鹽水，取出1000μL，放于離心機中，采用12000r/min，時間為15min進行離心分離。取出上清液制成DNA模板，再放入PCR儀進行循環處理，并分析所具有細菌類型。

1.2.2細菌培養組

行細菌培養法，首先將貯存陰道分泌物的生理鹽水，均勻涂抹在瓊脂培養基上，并放在二氧化碳恒溫培養箱內，進行培養，培養時間3d，當菌落長成后，選擇光滑、灰色、半透明、“露滴”型的細菌，進行生化檢驗。采用全自動微生物鑒定儀，鑒別細菌的種類。

1.3觀察指標

觀察并記錄兩組陽性檢出率，以及細菌檢出率。PCR陽性檢驗標準：1mm以內的條帶寬度，整齊條帶邊緣，無藥斑和引物二聚體的背景。細菌培養法陽性診斷標準：長出典型菌落，經生化儀鑒定。

1.4統計學方法

利用SPSS21.0統計學軟件，對計數資料進行數據處理，X²檢驗，率表示，P<0.05，表顯著差異。

2 結果

PCR組檢出情況：加特納菌7（14.58%）例，棒狀桿菌14（29.17%）例，腸球菌23（47.92%）例。細菌培養組檢出情況：加特納菌5（10.42%）例，棒狀桿菌12（25.00%）例，腸球菌20（41.67%）例。PCR組陽性檢出率為91.67%（44/48），細菌培養組陽性檢出率為77.08%（37/48）。陽性檢出率比較，PCR組高于細菌培養組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR組加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的細菌檢出率，均高于細菌培養組，無顯著差異（P>0.05）。

3 討論

在健康女性的陰道內，寄生菌群處于相對平衡狀態，以維持內環境穩態，若出現失衡狀況，大量死亡維持細菌平衡的重要細菌，使病菌迅速繁殖，并消耗大量營養物質，導致酸堿平衡紊亂，最終引起細菌性陰道炎的發生^[2]。

細菌培養法是一種檢測細菌性陰道炎的方法，操作簡單，普遍使用率較高，但應用中細菌培養法卻暴露出較多的弊端。如：（1）在操作過程中，對實驗室的器皿、無菌環境等要求較高，且檢驗過程較為復雜，易受到外來因素的影響，造成培養失敗;（2）細菌培養時間較長，大都為3d左右，易延誤患者病情;（3）在進行檢驗時，易受到認為因素的影響，使培養失敗，延長檢驗時間^[3]。

而PCR檢驗法，一種新型的細菌性陰道炎檢驗方法，不僅具備PCR敏感性，還具有DNA雜交的特異性^[4]。且對環境要求低、樣本需求量少，還可當天得出檢測結果，為醫師提供診斷幫助。PCR具體操作流程為：（1）標準雙鏈DNA在高溫條件下，氫鍵斷裂變為單鏈DNA;（2）單鏈DNA降溫并與引物結合，形成局部雙鏈DNA;（3）在活動最佳狀態下，延伸并形成模板互補的DNA鏈，使引物DNA鏈增長，突顯DNA雜交特異性，提高PCR敏感性。雖PCR檢驗法具有陽性檢出率高，操作簡單，檢測時間短等特點，但也會存在一定的漏診率^[5]。因此，在檢測期間更應注意：（1）在取樣期間，盡量多選取位置，避免對診斷結果帶來影響。（2）即使操作簡單，也要注意操作手法，以降低人為因素造成的影響。因此，醫生需提高自我業務能力和專業素質，提升陽性檢出率。

在本次研究的結果顯示，PCR組陽性檢出率，顯著高于細菌培養組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。表明在檢驗陰道細菌檢驗時應用PCR檢驗法比細菌培養檢驗，陽性檢出率高，提供臨床診斷幫助，使患者盡早獲得對癥治療。另外，PCR組細菌檢出率明顯高于細菌培養組，進一步說明PCR檢驗法能夠為患者爭取更多的治療時間，有利于患者恢復健康。

綜上所述，在陰道細菌檢驗時，選擇PCR檢驗的陽性檢出率高，細菌檢出高，能夠為臨床診斷提供幫助，值得推薦應用。

參考文獻

[1]????? 張婷，徐小婕，李靜.陰道細菌檢驗應用PCR檢驗法和細菌培養法的臨床價值體會[J].臨床檢驗雜志（電子版），2019（4）：60-61.

[2]????? 劉秀卿，王革非，李卓成，等.PCR-反向點雜交法在外陰陰道念珠菌病診斷及白念珠菌耐藥基因突變檢測中的應用[J].臨床檢驗雜志，2017，35（7）：495-498.

[3]????? 劉曉琦，杜瓊，劉祥琴.陰道分泌物念珠菌感染檢測方法對比分析[J].重慶醫學，2017， 46（35）：4927-4929.

[4]????? 李曉青.分析在陰道細菌檢驗中PCR檢驗法與細菌培養法的應用價值[J].齊齊哈爾醫學院學報，2018（12）：1383-1384.

[5]????? 李美珠，李煒煊.PCR法和細菌培養法用于陰道細菌檢驗的效果對比[J].臨床檢驗雜志（電子版），2019，8（1）：162-163.