高效液相色譜法快速檢測在乳品檢測中的應用

秦思文

摘 要：隨著社會市場經濟的大力發展，人們對更高品質的生活有著更強烈的追求，在日常生活中，對營養的補充也是非常重要的。不少人會選擇通過乳制品來補充蛋白質等營養物質，在乳制品中有一款產品就是酸奶，酸奶在牛奶的基礎上增加了風味，其本質就是多了一種有機酸，而有機酸的存在就能有效抑制有害菌種的產生，同時還提高了酸奶的口號，因此，為保證乳制品的食品安全，必須進行有機酸的相關檢測工作。

關鍵詞：高效液相色譜法;乳制品檢測;有機酸

為提高乳制品的食品安全品質，會采用當前科學權威的檢查方法，對乳制品中有機酸的成分進行檢測?，F目前常用的檢測方法有以下三種，即離子色譜法、氣相色譜法和高效液相色譜法。本文主要針對高效液相色譜法檢測乳制品進行詳細分析，得出該方法是當前檢測方法中操作最為簡單，同時兼具極高的準確度。因此，該方法是乳制品行業應用最廣泛的檢測途徑，并且可以同時完成9種有機酸的檢測，在市面上具有超高的實用價值。

一、通過高效液相色譜法檢測所需要的材料及檢測方法

1、檢測中所需要用到的相關儀器

在進行高效液相色譜法檢測乳制品的過程中，通常會使用到以下幾種儀器，其中包括高效液相色譜儀（ PE -200型）超聲、波振蕩儀（ KQ -250型）可見分光光度計（ UV -260）離心機。

2、檢測中所需要用到的相關試劑

所需運用的實驗試劑來檢測乳制品中存在有機酸的成分，其中包括乳酸，乙酸、檸檬酸，草酸、酒石酸、丁二酸、丙酸等，將這些試劑日常用于冰箱保存，作為后期檢測中所需的貯備液。

3、檢測時具體的實驗方法及步驟

首先是需要滿足色譜條件，將色譜柱設置為C18桂（5u m .250×4.6mm），其中所需的桂溫：25C;流動相：甲醇：0.01mol/ L （ NH ） HO 緩沖溶液pH2.8;流速：0.7m1/mnin：可見光一紫外檢測器，檢測波長215rm。

另外還需通過對檢測樣品進行處理和測定，選擇實驗所需的酸奶，將其重量攝取為2g，將其存放于10ml的比色管中，再通過超純水將其稀釋至10ml，將比色管搖勻后進行超聲脫氣，在已備好的樣品中取出400 u L .稀釋酸奶于 Eppendof 管中，再在其中加入100 u L 超純水和3.5mol/ L 高氯酸25uL，將其混勻，再對其進行離心（12000r/ m ，6min），通過以上幾個步驟，使得乳制品中的蛋白成分被充分的沉淀，之后再取上清液過0.45u m 濾膜作為樣液。樣液及自制的混合標準應用液均取10uL，在相同特定的時間內，觀察其數量的變化并制定標準的曲線圖來判斷其量變的效果。

二、對已檢測到的實驗結果進行深入的研究

當前市面上采用的高效液相色譜法進行乳制品檢測，該方法憑借著操作簡單，結果準確優點得到乳制品相關行業的廣泛應用，高效液相色譜法檢測主要是從1970年開始得到全面快速的發展。具體實驗操作中，根據不同的分離機制，可以將高效液相色譜法分為以下幾種，不同的類型液周色譜法、液相色譜法、離子交換色譜、離子色譜。色譜法應該得到更多更廣泛的應用。

具體高效液色譜法所具備的優點和特點如下：

1、高效液相色譜法需要超高的電壓

在高效液相色譜法具體的實驗中，需要將液體作為流動相的載體，讓液體流通色譜柱，需要更大的高電壓來輔助完成，促使液體流過的壓力較大且速度較快，一般會給予液體的壓力為150-350x105pa。

2、高效液相色譜法需要超高的速度及效率

在被檢測的樣品中，每一個液體都受著高壓的影響，導致其流速非常的快，并迅速抵達色譜柱，由于速度過快，因此給與分析所需的時間，就與其他經典液相不足相比要短暫很多。由于速度較快，所以就給后期判斷分析的時間較短，因此，需要高效液相色譜柱的效率非常的高。最高可達超過30000板/ m 。

3、高效液相色譜法具有較高的靈敏度和分辨率且適用范圍較廣

在進行高效液相色譜法快速檢測乳制品的應用時，由于本身所需要的相關檢測設備具有較高的靈敏度，設備通過設置后可進行自動操作，且具有較高的分析精度，在進行檢測的過程中，需要采樣的樣本量較少。在檢測的具體過程中，由于其具有較高的分辨率，所以可以直接將機器設置為固定象，這樣在流動性經過時可以達到最佳的分離效果。高效液相色譜法還具有一個非常理想的使用特點，就是其具有較廣的適用范圍，基本市面上70%以上的有機化合物均可以使用高效液相色譜法來完成物質含量的分析，尤其是分析物質具有高沸點、大分子、極性強、熱穩定性差的特點，仍然可以通過高效液相色譜法完成分離和分析，展現出高效液相色譜法在乳制品行業中檢測的優點。

但高效液相色譜法在檢測中也具有一定的缺點。例如，前文所提到的高效液相色譜法的液體在流向色譜柱時，需要借助較高的電壓來輔助完成，另外就是在色譜柱與檢測器之間，如果流動相的流行發生任何的變化，那么，分離物質就會進行相應的擴散，這樣會造成色譜數據采集的變化顯著，從而影響結果的準確率。

高效液相色譜法會根據分離機制的不同，而分為不同的類型，首先，因為分配色譜固定相是液體，不同的液體對于樣品的溶解能力有所不同，因此，在進行分配系數時存在著差異。在固定相和流動相的選擇中，當固定項選擇確定后，通過使用不同極性溶劑作為其流動性來判斷每一次樣本實現分離的現象。

三、結束語

在完成乳制品檢測的過程中，需要通過相關試劑來將乳制品中的蛋白質含量進行沉淀，如果在試劑的選擇上不夠專業，將會使得檢測的操作步驟較多，使得檢測較為繁瑣，因此，更多的是采用3.5mol/ L 高氣酸來沉淀乳制品中的蛋白質成分，這樣可以在一定程度上簡化了操作步驟，并且不影響后期的檢測數據。綜上所述，采用高效液相色譜法在乳制品中的檢測已得到市面上的廣泛應用，通過此方法，可以很好的避免食品衛生安全問題的發生，具有較高的市場使用價值。

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