IL-7和IL-15在前列腺癌患者血清以及組織中的表達水平及其臨床意義

雪合熱提·薩塔爾，迪力夏提·馬木提，阿卜杜日斯·阿卜力克木

(1.新疆醫科大學第六附屬醫院 泌尿外科，烏魯木齊 830054；2.新疆醫科大學第一附屬醫院 泌尿外科，烏魯木齊 830054)

前列腺癌是男性惡性腫瘤相關死亡的重要原因，慢性炎癥是引起前列腺癌的重要因素。有研究發現，細胞因子是炎癥的關鍵介質，在免疫系統與腫瘤的相互作用中起著關鍵作用[1]。包括IL-7和IL-15在內的一組細胞因子共用一個受體鏈γ，細胞因子共用受體γ鏈具有調節淋巴細胞發育的功能，有助于支持CD4+和CD8+T細胞的穩態增殖和功能。IL-7在臨床腫瘤學的Ⅰ/Ⅱ期試驗中有著很好的應用效果。雖然IL-15尚未用于臨床試驗，但有研究發現，IL-15可能在臨床相關性的惡性腫瘤治療中具有較高潛力[2-3]。鑒于前列腺癌患者血清及組織中IL-7和IL-15蛋白表達的相關研究甚少，本研究通過分析IL-7和IL-15在前列腺癌患者血清及組織中表達的差異，及其與前列腺癌侵襲性的相關性，探究IL-7和IL-15在前列腺癌發生及發展中的潛在作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料研究對象為2019年2月—11月期間就診于新疆醫科大學第六附屬醫院泌尿外科的患者，其中54例前列腺癌患者為研究組，年齡(67.2±3.4)歲；68例前列腺增生患者為正常對照組，年齡(69.7±4.6)歲。所有患者都經過病理科確診。以上納入研究的患者均無術前放療、化療史，本研究經醫院倫理委員會批準，所有患者及其家屬均已簽署知情同意書。

1.2 主要試劑和儀器兔單克隆抗體IL-7(美國Abcam公司，克隆號：BVD10-40F6)，兔單克隆抗體IL-15(美國Abcam公司，克隆號：MA5-23561)，IL-7酶聯免疫試劑盒、IL-15酶聯免疫試劑盒(伊萊瑞特生物科技有限公司)，Thermo MultiskanTMGO全波長酶標儀(賽默飛世爾科技公司)，徠卡DM3000數碼顯微鏡(徠卡微系統有限公司)。

1.3 ELISA檢測患者血清中IL-7和IL-15水平嚴格按照ELISA 試劑盒說明書要求測定2組患者血清中IL-7和IL-15水平，在酶標儀上依序測量各孔光密度[D(450 nm)]值。

1.4 免疫組織化學法染色切片脫蠟，抗原修復，加稀釋好的IL-7和IL-15抗體(IL-7為1∶100，IL-15為1∶100)，加適量生物素標記的二抗工作液，顯色劑顯色，自來水充分沖洗，復染，脫水，透明，封片，顯微鏡下觀察染色結果。前列腺組織標本中細胞質出現淡黃色或黃色顆粒狀著色為陽性表達，采用IPP 6.0 軟件在同等條件下檢測每張組織切片中的IL-7和IL-15表達的積分D值。

2 結果

2.1 2組患者血清IL-7和IL-15水平的比較與前列腺增生組比較，前列腺癌組患者血清IL-7和IL-15水平顯著升高(P<0.05，表1)。

表1 2組患者血清IL-7和IL-15水平的比較

2.2 2組患者組織中IL-7和IL-15蛋白陽性表達率的比較在前列腺癌和前列腺增生患者組織中，IL-7蛋白陽性表達率分別為72.16%、38.23%，IL-15蛋白陽性表達率分別為62.96%、35.29%，二者2個指標差異均有統計學意義(P<0.05，圖1、表2)。

注：A. 前列腺增生組織中IL-7的表達；B.前列腺增生組織中IL-15的表達；C. 前列腺癌組織中IL-7的表達；D. 前列腺癌組織中IL-15的表達。圖1 免疫組織化學染色分析前列腺癌和前列腺增生患者組織中IL-7和IL-15的表達 (×200)

表2 2組患者組織中IL-7和IL-15表達水平的比較

2.3 前列腺癌組織標本中IL-7和IL-15表達水平與臨床病理特征的關系對54例前列腺癌組織標本中IL-7和IL-15表達水平與臨床病理特征之間的關系進行分析。結果顯示，IL-7和IL-15表達水平與Gleason評分、臨床分期、前列腺特異性抗原(prostate specific antigen，PSA)水平密切相關，與淋巴結轉移相關(表3)。

表3 前列腺癌組織標本中IL-7和IL-15表達水平與臨床病理特征的關系

2.4 前列腺癌組織中IL-7與IL-15的相關性經Spearman 相關分析，在前列腺癌組織中，IL-7和IL-15表達水平呈正相關(r=0.415，P<0.01)。

3 討論

近年來，大量組織病理學、流行病學和分子病理學的研究發現，慢性炎癥可能在前列腺癌的發生中起重要作用[1]。IL是炎癥的重要介質，在前列腺癌患者中，許多炎癥介質表達上調。IL-2、IL-15和IL-7是調節淋巴穩態的關鍵細胞因子[2]，它們獨特的生理功能可歸因于專有細胞因子受體鏈、細胞因子或其受體鏈的差異表達模式在不同生理環境中產生的信號所啟動的不同信號通路[3-4]。然而，這些研究對象大多數是晚期前列腺癌患者，在這樣的情況下，無法很好地解釋腫瘤發展、轉移及擴散的內在機制，如骨溶解，可能與誘導IL產生有關[5-8]。此外，腫瘤內缺血和相關壞死引發的無菌炎癥也可以促進IL的釋放。因此，晚期腫瘤患者提供的數據可信度不高。為探究免疫炎癥在前列腺癌早期所起的作用，本研究分別從局部(前列腺組織)和全身(血清)水平評估前列腺癌患者中IL的表達，并與前列腺增生組織進行了比較。研究結果顯示，與前列腺增生組織相比，前列腺癌組織中促炎癥因子IL-7和IL-15的表達頻率及程度較高。

已知IL-15可由多種細胞產生，包括活化的巨噬細胞、平滑肌細胞和前列腺癌細胞。IL-7是由多種基質細胞和不同的上皮細胞(包括胸腺和腸道)產生的。最近，在正常前列腺上皮細胞中檢測到了IL-7的產生，但在轉移的前列腺上皮細胞中沒有發現[9]。IL-15通常由髓系活化抗原提呈細胞產生，包括單核細胞、巨噬細胞和DC[10]。然而，IL-15也被發現在多種其他類型細胞中表達，包括基質細胞和上皮細胞[4]。炎性因子(IL-6、IL-7和IL-15等)促進前列腺癌患者中蛋白質生成的機制尚不清楚。不同的微生物，包括病毒和細菌也與前列腺癌的發生有關[11]。事實上，它們的存在可能導致慢性炎癥。細胞死亡可能反過來激活先天免疫系統，由此引發的固有免疫細胞產生的可溶性因子，包括IL-6、IL-7和IL-15被認為可以促進前列腺癌的發生[12]。

有研究發現，IL-7通過腫瘤細胞促進促血管生成因子的產生和內皮細胞的增殖，IL-15也被證明能刺激“體內”血管生成[13]。本研究結果顯示，IL-7和IL-15在前列腺癌組織中的表達水平明顯高于前列腺增生組織(P<0.05)，IL-7和IL-15的表達與臨床病理特征顯著相關(P<0.05)，且IL-7和IL-15的表達呈正相關。由此推測，IL-7和IL-15在前列腺癌的發生和發展過程中可能有一定程度的協同作用。因此，單獨或聯合檢測前列腺癌患者血清IL-7和IL-15水平，可能有助于前列腺癌患者的療效判斷和預后觀察，這尚待進一步研究。