尾側同源盒轉錄因子2在胃粘膜腸上皮化生及腸型胃癌中的表達研究

張赟 陳祎 馬亮 文建力 王劍 曹穎△

(1.貴州省人民醫院病理科，貴州 貴陽 550002； 2.四川大學華西醫院消化內科,四川 成都 610041)

胃癌(GC)是消化系統常見惡性腫瘤之一。臨床采用Lauren分型方法將GC分為腸型、彌漫型、混合型和不確定型四種病理組織學類型，我國以腸型GC為主[1]。目前認為，腸型GC可能是通過慢性萎縮性胃炎、胃粘膜腸上皮化生(IM)、胃粘膜上皮異型增生等一系列前期病變構成的Correa氏級聯反應發展而來[2]。異型增生是GC重要且明確的癌前病變，當胃粘膜上皮細胞發生異型增生后，表現出與GC相似細胞形態學及功能代謝學特征[3]；胃粘膜上皮細胞可通過異型增生進展為腸型GC[4]。尾側同源盒轉錄因子2(CDX2)是維持腸道表型的重要轉錄因子[5]。有研究顯示，CDX2 可能參與了 IM 的發生及腸型GC的發生發展[6]。本研究通過檢測CDX2在IM及腸型GC組織中的表達，探索其在Correa氏級聯進展中的可能作用，為腸型GC的發病機制提供有用的實驗依據。

1 資料與方法

1.1臨床患者及相關臨床病理特征 選擇我院2014年至2017年胃鏡活檢標本和手術切除的腸型GC根治術標本共67例。所有腸型GC患者術前均未接受放療和化療。復查HE切片后分為胃粘膜組、IM組、上皮異型增生組和腸型GC組。粘蛋白組織化學染色后將IM分為I、II和III型[7]；采用悉尼評分系統對IM及異型增生進行分級[8]。本研究經本醫院倫理委員會批準。

1.2CDX2免疫組織化學染色及半定量分析 免疫組織化學染色采用Envision二步法，CDX2陽性定位于細胞核，結果判定方法如下：(1)陽性細胞數百分比評分，百分比≤5%計為0分，6%～25%計為1分，26%～50%計為2分，51%～75%計為3分，>75%計為4分；(2)染色強度評分，無色計為0分，淡黃色計為1分，棕黃色計為2分，棕褐色計為3分；(3)將陽性細胞數百分比評分×染色強度評分=總得分，總得分0～1定為陰性，2～3分定為弱陽性，4～8分定為中等陽性，9～12分定為強陽性；本研究將陰性和弱陽性表達定為低表達病例，中等陽性和強陽性定為高表達病例。

1.3統計學方法 采用SPSS 20.0軟件分析數據，組間比較采用 Fisher精確檢驗，相關性分析采用Spearman相關性分析，P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結 果

2.1CDX2在胃粘膜、IM、上皮異型增生和腸型GC組織中的表達 與胃粘膜組相比，IM組CDX2高表達病例百分率顯著增高(P<0.01)；異型增生組CDX2高表達病例百分率低于IM組，但差異無統計學意義(P>0.05)；與IM組和異型增生組相比，腸型GC組CDX2高表達病例百分率均降低(P<0.01,P<0.05)。見表1。

表1 CDX2在胃粘膜組、IM組、異型增生組及腸型GC組中的表達[n(%)]

2.2CDX2表達與IM分型及分級、異型增生分級、腸型GC分化的相關性 相關性分析結果顯示，CDX2表達與腸型GC癌細胞分化相關(Rho= 0.3491，P<0.01)，癌細胞的分化越低，CDX2表達也越低， CDX2的表達與IM分型及分級、異型增生分級均不相關。見表2。

表2 CDX2表達與IM分型及分級、異型增生分級以及腸型GC分化相關性研究[n(%)]

3 討 論

CDX是一類在腸道細胞增殖、分化和發育等生理過程中發揮重要作用的轉錄因子，含有CDX1、CDX2 、CDX4 三種同源體。其中，CDX1 和CDX2在腸道上皮細胞的發育、分化以及腸道表型的維持中有重要意義，而CDX2更為重要。目前認為，IM主要由幽門螺桿菌(H.pylori)感染和CDX表達誘導。CDX2 被認為是胃 IM 發生發展的觸發因子，過表達 CDX2 的轉基因小鼠可引起了胃部廣泛的 IM 的發生[9]。本文結果顯示，絕大多數胃粘膜上皮細胞未見CDX2表達，67例中有4例胃粘膜上皮細胞呈現CDX1弱陽性表達；然而所有IM組均觀察到CDX2陽性表達，且大多數呈中等陽性或強陽性表達，提示 IM 的發展中存在CDX2 基因的異位表達，CDX2在IM的形成中起到一定的作用。本文結果還顯示，CDX2在IM組、異型增生組到腸型GC組中高表達病例百分率呈逐漸下降趨勢；與IM組和異型增生組相比，腸型GC組CDX2表達顯著降低。說明Correa氏級聯反應中由IM向異型增生及腸型GC的發展過程中，CDX2可能作為腫瘤抑制基因參與了IM向腸型GC發生及發展。相關性研究結果顯示，CDX2表達與腸型GC癌細胞分化相關，癌細胞分化越低，CDX2表達則越低，提示CDX2可能在腸型GC的發展過程中起到負向調節作用，CDX2可作為判斷腸型GC惡性程度及預后判斷的分子標志物。然而，本組研究數據顯示CDX2表達與IM的分型分級、異型增生分級均不相關性。劉貴生等[10]通過免疫組化染色檢測不同亞型 IM 中 CDX2 的表達結果卻顯示CDX2 在Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IM 中表達率逐漸減低，其中Ⅲ型 IM 中 CDX2 的表達率明顯低于Ⅰ型。他人流行病學研究[11]也顯示，不完全性IM 進展為 GC 的速度快于完全性 IM，Ⅱ型和Ⅲ型 IM 發生腸型GC風險明顯高于Ⅰ型 IM。因本研究病例數量偏少，在今后的研究中需要增加病例數量后進一步明確CDX2與IM分型分級及異型增生分級之間的關系。

綜上，本研究結果提示CDX2蛋白可能參與了IM向腸型GC的惡性轉化，在腸型GC發生發展中可能發揮了抑制作用，但確切機制尚需要進一步深入研究。