發酵構樹飼料對肉兔生產性能、肉品質、血液生化指標及腸道形態的影響

張 邦，王瑞華，朱龍龍，顏 顏，王 軍，王占彬*

（1.河南科技大學動物科技學院，河南洛陽 471003；2.禾佳農業科技有限公司，河南宜陽 471600）

我國蛋白飼料原料以豆粕、菜粕、苜蓿等草本飼料為主，且對進口原料依存度很高。2016 年全國大豆進口量約為8 400 萬t，2020 年超過1 億t[1-2]。國務院頒布的《關于促進畜牧業高質量發展的意見》中指出要健全飼草供應體系，開發利用雜交構樹、飼料桑等新飼草資源。雜交構樹在營養期適時收割，營養價值豐富，能值和粗蛋白質含量等均可與傳統飼料相媲美[3]。構樹也是一種傳統中草藥，含有多種黃酮類化合物、生物堿和多糖等活性成分，具有抗菌、增強免疫力、延緩衰老等藥理活性[4-5]。我國大面積的丘陵山地具有充足的開發構樹資源的潛力[6-8]。宋博等[9]研究發現，在育肥豬飼糧中添加10%全株發酵構樹飼料對育肥豬生產性能無顯著影響，可以提高肌肉中游離氨基酸和肌內脂肪含量，改善肉品質。鄧銘等[10]研究表明，將發酵構樹飼料用于斷奶仔豬可顯著降低仔豬腹瀉率，且無不利影響。向凌云等[11]使用30%雜交構樹飼料替代肉兔飼糧中的花生秧與花生殼，顯著提高了肉兔平均日增重，也顯著降低了肉兔發病率與死亡率。構樹葉經發酵后所含的營養物質較發酵前有不同程度提高，但對肉兔的研究鮮有報道。因此，本試驗旨在研究發酵構樹飼料對肉兔生長發育的影響，為發酵構樹飼料在肉兔養殖中的應用提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 試驗設計 選取體重接近的30 日齡斷奶伊普呂幼兔144 只，隨機分為4 組，每組6 個重，每重復只，每籠3 只兔。試驗于夏季在義馬市金地牧業科技有限公司開展。對照組飼喂玉米-豆粕型基礎飼糧，參照NRC（1994）營養需要配制顆粒飼糧。試驗組分別添加3%、6%、9%發酵構樹飼料。在第2 茬雜交構樹生長至1.2 m，離地30 cm 收割枝葉。添加適量發酵益生菌（乳酸菌2×1010CFU/g）和酶制劑（纖維素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶11 000 U/g）按比例混合加工，打包裝袋密封發酵20 d。益生菌與酶制劑均為洛陽市洛丹生物科技有限公司產品。發酵構樹飼料（洛陽禾佳農牧有限公司）營養成分見表1（重復測定3 次取其均值），飼糧組成及營養成分見表2。預試期7 d，正試期28 d。

表1 發酵構樹飼料化學成分（風干基礎）

表2 飼糧組成及營養成分（風干基礎）

1.2 飼養管理 幼兔飼養于同一兔舍，采用歐式籠同層飼養，按照每個籠幼兔平均體重的8%定量飼喂，每只兔每隔3 d 增加10 g。自由飲水，免疫程序按常規進行。每天清掃兔舍，定期清洗飲水管道和糞盤。

1.3 生產性能 在試驗第1、28 天按重復進行空腹稱重，并統計死淘情況，計算平均日增重、平均日采食量、耗料增重比、死亡率和腹瀉率。

1.4 屠宰性能 在試驗結束前12 h 對肉兔停料不停水。每個重復隨機選擇1 只兔共24 只屠宰，耳緣靜脈注射空氣致死。記錄活體重、全凈膛重、半凈膛重、心臟、肝臟、腎臟、肺臟、脾臟等重量，并計算全凈膛率、半凈膛率和器官指數。

全凈膛率=全凈膛重/活體重×100%

半凈膛率=（全凈膛重+心臟+肝臟+腎臟+肺臟）/活體重×100%

器官指數=（器官重量/體重）×100%

1.5 肉品質 屠宰完成后采集背腰最長肌取2 cm×1 cm×1 cm 肉樣背腰最長肌樣品，去除結締組織，測定質量m1（g）置于自封袋內，密封懸掛于在4℃冰箱內，24 h后將肉樣取出，濾紙吸干樣品表面水分后稱重m2（g），計算24 h 滴水損失。48 h 滴水損失測定方法相同。滴水損失的計算公式：

滴水損失=100%×（m1-m2）)/ m1

采用便攜式手持專用pH 計（pH-STAR，德國）測背腰最長肌第5 肋骨處的pH，將探頭插入肌肉3 mm 讀數，讀數穩定5 s 后記錄pH，每個肉樣測定3次不同位置。分別記錄pH45min與pH24h的數值。

用日本產CR-10 型號便攜式色差儀，利用CIELab 輸出模式，在兔宰后45 min 時在背最長肌第5 腰椎處橫斷面表面切開3 個切面記錄數值，分別求平均值，得出亮度值（L*）、紅色度值（a*）和黃色度值（b*）。

1.6 血液生化指標 在屠宰試驗當天，進行心臟采血，3 500 r/min 離心取得血清于-20℃冰箱保存備用。用全自動生化分析儀（庫貝爾 IMagic-V7，中國）測定血清中的葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、膽固醇（CHO）、葡萄糖（GLU）、血鈣（Ca）與血磷（IP）含量及丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、堿性磷酸酶（ALP）、天冬氨酸氨基轉移酶（AST）活性。

1.7 腸道形態 飼養試驗結束，每個重復選1 只試驗兔，剖開腹腔后，分離小腸，于空腸中段采集3 cm 左右，用生理鹽水洗滌內容物后，放置于多聚甲醛中固定48 h，經過修整、脫水、透明、浸蠟和包埋，采用旋轉切片機進行連續切片，然后使用蘇木素-伊紅（H-E）染液染色并封片。在各個切片中選取5 個較為完整的絨毛，在電子顯微鏡下測量絨毛高度和隱窩深度，并計算其絨隱比。

1.8 統計分析 試驗數據采用SPSS 22 統計軟件的ANOVA 程序進行單因素方差分析，組間差異用Duncan's 法進行多重比較。數據以平均值±標準誤表示。設定P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著。

2 結果

2.1 發酵構樹飼料對肉兔生產性能的影響 如表3 所示，試驗肉兔初始體重差異不顯著，構樹組生產性能與對照組無顯著差異。

表3 發酵構樹飼料對肉兔生產性能的影響

2.2 發酵構樹飼料對肉兔屠宰性能和器官指數的影響由表4 可見，構樹組全凈膛重、半凈膛重、全凈膛率、半凈膛率與對照組均無顯著差異；且肉兔各項器官指數與對照組無顯著差異。

表4 發酵構樹飼料對肉兔屠宰性能和器官指數的影響

2.3 發酵構樹飼料對肉兔背腰最長肌肉品質的影響 如表5 所示，6%、9%構樹組兔肉亮度均高于對照組、3%構樹組（P＜0.05）；3%、6% 構樹組滴水損失24 h 均低于對照組（P＜0.05），9%構樹組低于對照組和3%、6%構樹組（P＜0.01）；構樹組兔肉的pH、紅度與黃度與對照組無顯著差異。

表5 發酵構樹飼料對肉兔背腰最長肌肉品質的影響

2.4 發酵構樹飼料對肉兔血液生化指標的影響 由表6所示，構樹組TP 和ALB 含量高于對照組（P＜0.01）；9%構樹組GLO 含量、6% 和9% 構樹組GLU 含量均高于對照組（P＜0.05）；6%和9%構樹組IP 含量高于對照組、3%構樹組（P＜0.01）；各組其他指標無顯著差異。

表6 發酵構樹飼料對肉兔血液生化指標的影響

2.5 發酵構樹飼料對肉兔腸道形態的影響 由表7 和圖1 可知，9%構樹組腸道絨毛高度高于對照組（P＜0.05）；構樹組腸道隱窩深度和絨隱比與對照組無顯著差異。

圖1 發酵構樹飼料對肉兔腸道形態的影響（9×）

表7 發酵構樹飼料對肉兔腸道形態的影響

3 討 論

3.1 發酵構樹飼料對斷奶幼兔生長性能的影響 幼兔因其機體生長發育過快，消化系統發育不能及時完善，導致胃酸和消化酶分泌不足，進而引起腹瀉最終面臨死亡，是肉兔生產中常見的難題[12]。構樹飼料經發酵過后，產生多種芳香類的物質[13]，可降解構樹中所含的一些抗營養因子，還會產生乳酸菌等有益菌，刺激幼兔采食促進營養物質的消化吸收[14]。一定量的構樹飼料可以提升兔的胃容積，促進腸道發育，并在消化過程中增強消化器官蠕動，增加消化液的分泌[15]。而本試驗中構樹組肉兔平均末重和平均日增重較對照組均有所增加，但其生產性能無顯著變化，這可能與限飼有關，肉兔的腹瀉率和死亡率在飼喂發酵構樹后有所改善，但并未達到統計學上的顯著性差異。鄧銘等[10]和Chen 等[16]均報道，構樹飼料可以顯著降低斷奶仔豬腹瀉率，因此肉兔在自由采食模式下可能產生顯著效果。在育肥豬飼糧中添加10%發酵構樹飼料不產生負面影響[7,17]，而生長豬飼糧中發酵構樹飼料比例達到20% 時就會產生負面影響[18]。本試驗中，發酵構樹添加量最高比例為9%，并未對肉兔的生長性能造成負面影響。此外，發酵構樹來源、飼喂方式以及添加量不同都會產生不同影響。相對豆粕或魚粉而言，木本植物飼料提供的粗蛋白質成本比較低廉。因此，在小型草食動物的飼料原料選擇上，構樹飼料具有很好的發展潛力，在飼喂發酵構樹飼料時，根據實際條件確定適宜飼喂方式與飼用量，才能更好地發揮發酵構樹飼料的優勢。

3.2 發酵構樹飼料對肉兔屠宰性能、器官指數與肉品質的影響 屠宰性能是衡量肉兔生產性能的重要指標，可反映畜禽產肉率。本試驗結果表明，發酵構樹飼料對肉兔屠宰性能無顯著影響。張興等[19]研究也發現，使用30%發酵構樹飼料飼喂湘沙豬對其屠宰性能未見顯著差異。內臟器官是機體生理功能的物質基礎，其發育狀況可反映機體的器官能力。王小平等[20]研究發現，添加不同比例青貯構樹飼料的各試驗組間肉羊的心、肝、脾、肺、腎的器官指數無顯著變化。本試驗中，發酵構樹飼料對肉兔的心、肝、脾、肺和腎的器官指數也均無顯著影響。目前，有關發酵構樹飼料對肉兔的屠宰性能和器官指數影響的研究不多，其可能存在的機制尚待進一步研究。

肉品質是畜禽生產中的重要經濟性狀，其評價指標包括肉色、系水力、pH 等[21]。熊羅英等[22]發現，在AA 肉仔雞飼糧中添加6.75%發酵構樹飼料對肉仔雞的屠宰率無顯著影響，但可以顯著降低胸肌和腿肌的滴水損失，這表明發酵構樹飼料可以提高雞肉系水力和多汁性。本試驗中，發酵構樹飼料顯著降低了肉兔背腰最長肌的滴水損失。肌肉水分流失會帶走其中的營養物質、風味物質和血紅素等，對肉的營養價值、風味和肉色造成損害[23]。相關研究表明，發酵構樹飼料可以提高育肥豬瘦肉率、降低背膘厚度、增加肉色和系水力，進而改善豬肉質量及風味[17,24]。在反芻動物中使用發酵構樹飼料也可顯著提高其屠宰率和肉品質[25]。這可能是因為構樹中含有較多黃酮類、葡萄糖苷類、生物堿類等活性成分，可減少自由基對肌肉蛋白的損傷，從而改善肉品質[26]。因此，在肉兔飼養中使用發酵構樹具有一定優勢，但本次試驗僅探索發酵構樹飼料使用的可行性，并未針對其肉品質做詳細探究，后續可以深入研究。

3.3 發酵構樹飼料對肉兔血液生化指標的影響 動物血清生化各項指標可反映動物機體生理機能代謝狀況[27]。血清中BUN 含量減少，反映了機體對BUN 的沉積量增加，氮的利用率提高。AST 和ALT 活性可反映肝臟對蛋白質和氨基酸的代謝能力。本試驗中，AST 和ALT 有所上升，可能因為發酵構樹飼料中含有黃酮、糖苷類等藥用成分能提高肝臟代謝能力[28-30]。TC 和TG含量能反映機體脂肪代謝情況[31]。本研究中，構樹組TC 含量相較于對照組有一定減少，表明發酵構樹飼料具有有一定降血脂作用。有研究發現發酵桑葉飼喂蛋雞可以降低血脂[32]。而構樹與桑樹中有類似的生物堿等活性成分可以調節脂質代謝。GLU 是細胞的能量來源和新陳代謝中間產物，是單胃動物最直接的能量來源。本試驗中，6% 構樹組與9% 構樹組GLU 含量極顯著高于對照組，表明發酵構樹飼料對斷奶幼兔的能量代謝有顯著影響。TP 含量是衡量機體對蛋白質吸收能力、利用能力以及機體免疫水平的指標。動物的代謝系統可以調控血漿蛋白質、氨基酸和組織蛋白以保證內環境穩態[33-34]。王玉田等[35]發現，飼喂含枯草芽孢桿菌等復合益生菌的發酵飼料能提高斷奶仔豬血清中TP 含量。本試驗中，構樹組血清中TP 含量極顯著高于對照組，這可能因為發酵構樹飼料也含有較多種類的益生菌，改善了幼兔腸道健康，進而影響了蛋白的消化利用。在本試驗中，6%構樹組和9%構樹組IP 含量極顯著高于對照組。血液中磷含量主要由腸道吸收，說明發酵構樹飼料能促進兔腸道上皮細胞的吸收[36]。以上結果表明，發酵構樹飼料具有一定提高幼兔小腸吸收能力的作用，具體機制有待探究。

3.4 發酵構樹飼料對腸道形態的影響 肉兔對飼糧中營養成分吸收量，很大程度上依賴于腸道的發育情況。因此，腸道組織健康狀況是動物機體能否最大程度消化吸收飼糧的關鍵。絨毛和隱窩是腸道重要的生理結構，分別影響營養物質與腸道的接觸面積和腸絨毛上皮細胞的分泌功能[37]。絨毛高度可以直觀反映腸道吸收能力，隱窩深度為腸腺離黏膜表面的最近距離[38]。本試驗中，9%構樹組肉兔的空腸絨毛長度顯著高于對照組，雖然3%構樹組和6%構樹組絨毛長度沒有提高，但隱窩深度有一定降低，進而提高了絨隱比。而飼喂玉米皮飼糧顯著提高了生長肉兔十二指腸絨毛高度，改善了其腸道形態結構，認為可能是由于谷物麩皮類飼料原料纖維組成結構與基礎飼糧不同[39]；相關研究也表明，不同來源纖維，不同纖維成分均可影響兔腸道組織形態[40-41]。在生長兔飼糧中使用不同來源的纖維飼料，對生長肉兔的腸道發育會產生不同效果。相對于傳統草本飼料，發酵構樹飼料屬于木本飼料可能在小腸中停留更長時間，進而改善了腸道消化吸收能力。

4 結 論

本研究結果表明，使用發酵構樹飼料可以提高兔肉背腰最長肌亮度、降低其滴水損失，提高空腸絨隱比，且對血液生化指標有一定提高作用，使用9%發酵構樹飼料未見不良影響，可繼續探究其在實踐生產中的使用。