飼糧中添加甜葉菊渣對寧都黃雞盲腸微生物數量的影響

鐘敏，李建軍，劉瑞平，丁武億，邱光忠，林小翠，胡艷，成笛，郭曉波，鐘如意

（贛州市畜牧水產研究所，江西 贛州 341400）

目前，國內禁止在動物飼料中添加抗生素類促生長劑，對綠色安全的抗生素替代品的研究成為當前畜禽飼料添加劑的研究熱點。植物添加劑無抗藥性、毒副作用小、不易在肉產品產生有害殘留，因而被廣泛應用于家禽生產中，用于健康保障、促生長、肉品改善等。研究表明，甜葉菊提取甜菊糖苷后的廢渣營養豐富，含有大量的粗蛋白、膳食纖維、氨基酸及微量元素，并且含有綠原酸、隱綠原酸、咖啡酸、異綠原酸等具有抗炎、抗菌、抗氧化的活性成分[1]，對動物具有促生長、提高飼料利用率、防病抗應激等作用。已有部分文獻報道甜葉菊渣直接添加或經發酵、提取有效成分后可添加到飼料中用于畜禽生產，對提高動物生長性能、屠宰性能、免疫功能方面都有一定效果，陳小連等在21~70 日齡肉鵝飼糧中添加5%~10%的甜菊渣[2]，可提高其生長性能；劉珍妮等的研究結果表明[3]，經發酵處理的甜葉菊渣可降低增重成本；孔智偉等在15 日齡番鴨飼糧中添加發酵甜葉菊廢渣[4]，發現可明顯改善其肌肉品質；孫艷賓等在肉兔飼料中添加不超過25%比例的甜葉菊渣[5]，不僅不影響其生長速度、屠宰率和飼料利用率，還可提升其免疫功能；孔智偉等將甜葉菊渣發酵以后飼喂巴馬香豬與贛中南花豬雜交肉豬，可顯著降低其料重比[6]；邱光忠等在蛋雞基礎日糧中添加1%甜葉菊提取物預混劑[7]，能提高產蛋率、料蛋比等生產性能；李園園等在青腳麻雞日糧中添加0.2%的甜葉菊提取物與益生素組合，可以改善雞的生長性能[8]。

甜葉菊渣在肉雞生產中的應用，主要集中在生長性能、屠宰性能、血液生化指標、免疫指標等方面，關于甜葉菊渣對雞腸道微生物方面的影響研究則以其有效成分綠原酸的應用研究為主[9]，還未有關于添加甜葉菊渣對肉雞腸道菌群影響的報道。本試驗通過在寧都黃雞飼糧中添加甜葉菊渣，研究其對寧都黃雞盲腸微生物數量的影響，以期為甜葉菊渣在肉雞生產上的應用提供參考。

1 試驗材料

甜葉菊渣為甜葉菊提取甜菊糖苷后的剩余物，經干燥粉碎后制得。其營養成分含量見表1。

表1 甜葉菊渣營養成分含量

2 試驗設計及日糧

選用同批次體重相近的1 日齡健康寧都黃雞200 羽，隨機分為2 組，每組4 個重復，每個重復25羽。對照組飼喂玉米- 豆粕型基礎飼糧，試驗組日糧添加0.3%的甜葉菊渣。預飼7d，試驗期21d?；A飼糧配方參照《中國飼料成分及營養價值表（第31版）》和《黃羽肉雞營養需要量》（NY/T3645-2020）設計，以粉料形式飼喂，不同階段飼料原料組成及營養水平見表2。試驗雞采用地面平養方式飼養于封閉雞舍，全天自由采食和飲水，按常規程序進行飼養和免疫。

表2 基礎日糧組成及營養水平（風干基礎） %、MJ/kg

3 樣品采集及指標測定

試驗雞21 日齡時，各重復選取1 只接近平均體重的雞，剪斷頸靜脈處死后，剖開腹腔，取右側盲腸并結扎，70%酒精消毒結扎口后于無菌超凈臺中取1g 盲腸段食糜，置于滅菌離心管中，用生理鹽水進行10 倍系列稀釋，采用平板培養計數法，分別接種 EMB 培養基、SS 瓊脂培養基、MRS 培養基、TPY培養基，進行大腸桿菌、沙門菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌活菌數量測定，并換算成每克內容物所含菌落數，結果以每克內容物所含菌落數的對數值[lg(CFU/g)]表示。計算公式如下：每克盲腸內容物菌落數=lg（菌落數×稀釋倍數×每次稀釋取樣毫升數）/（接種用樣品毫升數×樣品克數）。

4 數據分析

試驗數據采用SPSS17.0 統計分析軟件中的one-way ANOVA 進行單因素方差分析，在差異顯著的基礎上進行Duncan 氏多重比較檢驗，P<0.05 為差異顯著，所有結果均以“平均值±標準差”表示。

5 結果

由表3 可知，試驗組飼糧中添加0.3%的甜葉菊渣后，21 日齡寧都黃雞盲腸內的大腸桿菌和沙門菌數量低于對照組4.20%和8.87%，差異顯著（P<0.05），乳酸桿菌、雙歧桿菌數量分別高于對照組0.94%和 1.60%，但差異不顯著（P>0.05）。 以上結果表明，在寧都黃雞飼糧中添加0.3%的甜葉菊渣對盲腸中有害菌大腸桿菌和沙門菌有明顯的抑制作用，并能在一定程度上促進有益菌乳酸桿菌、雙歧桿菌的增殖。

表3 甜葉菊渣對寧都黃雞盲腸微生物數量的影響 lg(CFU/g)

6 討論

家禽養殖成功的關鍵是健康和成熟微生態區系的快速發育完善，前21d 的營養和管理是影響腸道發育和家禽生長性能的關鍵期，在這一時期家禽腸道結構生理和腸道內菌群都處于快速變化中，此時獲得更為成熟的腸道環境可使雞群生產周期延長，從而實現效益最大化[10]。因此，本試驗在飼糧中添加0.3%的甜葉菊渣后，選擇在寧都黃雞21 日齡時對其盲腸微生物數量進行測定，以研究甜葉菊渣對其產生的影響。雞盲腸內的微生物一般分為兩大類，即有害菌和有益菌，有害菌主要包括大腸桿菌、沙門菌等，有益菌包括乳酸菌和雙歧桿菌等，能增強動物免疫力。大腸桿菌、沙門菌在腸道內的數量直接反映動物的健康程度。研究表明，植物添加劑因含有一些抗菌消炎的活性物質而對病原微生物有抑殺作用，對動物腸道菌群有積極的調節作用[11~13]。甜葉菊渣中含有多種功能性成分，主要有糖苷類、綠原酸類和黃酮類化合物，綠原酸屬于多酚類活性物質，具有抗炎抑菌功能，研究報道綠原酸可以增強機體免疫功能，改善動物腸道菌群[9、14~16]。本研究結果與前人研究結果基本一致，在飼糧中添加含有綠原酸有效成分的甜葉菊渣，能顯著抑制寧都黃雞盲腸中有害菌大腸桿菌和沙門菌的生長，并在一定程度上促進有益菌乳酸桿菌和雙歧桿菌的增殖，從而達到調節寧都黃雞腸道健康的效果。