血清趨化因子對老年非小細胞肺癌患者一線化療效果的影響

丁潔 張勝

(蘇州大學附屬第一醫院檢驗科,江蘇 蘇州 215026)

近年來,受到環境污染、人口老齡化、吸煙、飲食作息不規律等多種因素影響,導致肺癌的發病率及死亡率呈逐年上升趨勢。相關數據顯示,有超過1/2的肺癌患者確診時年齡超過60歲,有1/3的患者年齡超過70歲〔1〕。非小細胞肺癌(NSCLC)是最為常見的肺癌類型,占全部肺癌的85%～90%,其中老年NSCLC患者約占其中的47%,NSCLC也成為典型的老年疾病之一〔2〕。針對老年NSCLC患者,化療是目前綜合治療的主要方法,但受到毒副反應、耐藥等因素影響,患者在接受化療治療的整體預后效果仍較差〔3〕。因此,尋找可以有效預測化療效果及預后情況的血清分子標志物,對提高老年NSCLC患者的治療效果有重要意義。趨化因子是由細胞分泌的信號蛋白或小細胞因子,具有誘導細胞定向遷移的作用,而有研究發現,血清趨化因子在腫瘤的發生、發展、轉移中發揮重要作用〔4〕。本研究通過分析老年NSCLC患者行一線化療前及化療后的趨化因子水平,探討其對患者化療效果的影響。

1 資料和方法

1.1一般資料 回顧性收集蘇州大學附屬第一醫院2020年5月至2022年8月收治的320例接受一線化療治療的老年NSCLC患者臨床資料,將無法手術治療的Ⅲ～Ⅳ期老年NSCLC患者接受一線化療后出現進展的患者納入進展組(n=184),未出現進展的患者納入非進展組(n=136),本研究經醫院醫學倫理委員會批準,并通過患者及其家屬知情同意且簽署知情同意書。320例NSCLC患者中,男249例,女71例,年齡60～86歲,平均(74.22±4.25)歲;病理類型：腺癌142例,鱗狀細胞癌92例,腺鱗癌69例,大細胞癌17例;臨床分期：Ⅲ期218例,Ⅳ期102例。納入標準：(1)經活檢、病理學檢查、臨床影像符合《中華醫學會肺癌臨床診療指南(2018版)》〔5〕原發性NSCLC診斷標準;(2)根據美國癌癥聯合會第8版〔6〕肺癌TNM分期標準診斷為Ⅲ～Ⅳ期;(3)年齡≥60歲;(4)入院前未接受放化療及靶向治療;(5)預期生存時間超過6個月。排除標準：(1)有手術禁忌或麻醉禁忌;(2)合并患有肝腎功能異常;(3)合并患有嚴重的感染性疾病;(4)合并患有精神疾病,無法溝通;(5)合并嚴重并發癥需要?？浦委?。非進展組年齡、性別、病理類型與進展組差異無統計學意義(P>0.05);非進展組臨床分期Ⅳ期占比明顯低于進展組(P<0.05)。見表1。

表1 兩組一般資料比較〔n(%)〕

1.2治療方法 一線化療方案：AP：培美曲塞〔國藥準字H20213204,吉斯美(武漢)制藥有限公司,規格：按C20H21N5O6計500 mg〕聯合順鉑(國藥準字H53021740,云南植物藥業有限公司,規格：2 ml∶10 mg)方案的一線化療。注射用培美曲塞二鈉劑量為500 mg/m2體表面積,靜脈輸注10 min以上,每21 d為1個周期,每個周期第1天給藥。順鉑劑量為75 mg/m2體表面積,靜脈輸注時間超過2 h,在每個周期的第1天培美曲塞用藥結束約30 min后再給予順鉑;GP：吉西他濱(國藥準字H20213298,山東睿鷹制藥集團有限公司,規格：0.2 g按C9H11F2N3O4計)聯合順鉑,吉西他濱1 000 mg/m2體表面積靜脈滴注30 min,在第1、8天用藥,休息1 w,每3 w重復1次,吉西他濱用藥的同時使用順鉑化療,劑量為75 mg/m2體表面積,靜脈輸注時間超過2 h;化療3個周期后進行全身評估。

1.3療效評估 根據實體瘤療效評價標準(RECIST)〔7〕進行療效評估：將全部病灶消失,無新發病灶,腫瘤標志物降至正常,并維持4 w定義完全緩解(CR);將腫瘤直徑縮小≥30%,并維持4 w定義為部分緩解(PR);將腫瘤直徑未縮小且為增大定義為穩定(SD);將腫瘤直徑增大≥20%或者出現新發病灶定義為疾病進展(PD)。CR、PR、SD患者為非進展組,PD患者為進展組。

1.4血清趨化因子采集 抽取老年晚期NSCLC患者化療前空腹外周血2 ml,室溫下以2 500 r/min離心7 min,離心后取上層血清存于-80 ℃保存備用。使用美國Millipore公司生產的Human High Sensitivity T Cell MAP試劑盒及液相芯片檢測儀,檢測患者巨噬細胞炎性蛋白(MIP)-3α、白細胞介素(IL)-8及γ干擾素誘導趨化因子配體(CXCL)9水平。

1.5腫瘤壞死因子(TNF)-α水平檢測 抽取老年晚期NSCLC患者化療后空腹外周血2 ml,采用酶聯免疫吸附試驗,按照試劑盒說明書測定血清TNF-α。

1.6統計學方法 采用SPSS25.0軟件進行獨立樣本t檢驗、χ2檢驗;兩組間比較采用χ2檢驗或連續校正χ2檢驗或Fisher確切概率法,多組間整體率的比較采用χ2檢驗,存在2個及以上期望計數<5,采用Fisher精確檢驗;采用Logistic回歸分析血清趨化因子對晚期NSCLC患者一線化療效果的影響。

2 結 果

2.1兩組實驗室指標及血清趨化因子表達水平比較 進展組MIP-3α、IL-8、TNF-α水平明顯高于非進展組,CXCL9水平明顯低于非進展組(P<0.001)。見表2。

表2 兩組血清趨化因子與TNF-α表達水平比較

2.2老年晚期NSCLC患者一線化療結果影響因素的Logistic回歸分析 將接受一線化療方案治療的老年NSCLC患者隨訪結局作為因變量(未進展=0,進展=1),將表1、2中差異有統計學意義的指標作為自變量,進行Logistic回歸分析結果顯示,MIP-3α、IL-8均是影響接受一線化療方案治療的老年晚期NSCLC患者疾病進展的危險因素(OR>1,P<0.05),臨床分期、CXCL9是影響接受一線化療方案治療的老年晚期NSCLC患者疾病進展的保護因素(OR<1,P<0.05)。見表3。

表3 老年晚期NSCLC患者一線化療結果多因素的Logistic回歸分析

3 討 論

老年NSCLC患者因生理功能退化、免疫功能下降,且受到糖尿病、高血壓、冠心病等基礎疾病困擾,在接受抗腫瘤治療時,其治療效果及預后存在差異〔8〕。因此尋找合適的生物標志物,判斷患者治療效果及預后情況,根據患者機體情況制定更加優化的治療方案具有重要意義。腫瘤細胞通過分泌趨化因子及細胞因子,對腫瘤細胞周圍的免疫細胞的分泌、代謝與功能產生影響,進而維持自身的生存與發展,導致腫瘤的進一步發生與發展〔9〕。因此,通過研究免疫微環境中的免疫抑制分子,為臨床治療腫瘤提供新途徑。

MIP-3α屬于小細胞因子CC基因的亞家族,主要表達于肺、結腸、肝臟及皮膚之中。主要作用是對免疫及炎癥過程的調節,促使淋巴細胞產生趨化活性,抑制髓系祖細胞的增殖。有研究發現,MIP-3α在卵巢癌、結直腸癌中有高度表達〔10〕。分析本研究結果原因,MIP-3α對T淋巴細胞與未成熟樹突細胞具體趨化作用,而T細胞與未成熟樹突細胞可以促進腫瘤細胞的生長,增強腫瘤細胞的侵襲作用,進而促進腫瘤細胞的增殖,誘導腫瘤細胞對藥物產生抵抗,導致化療效果不佳,引起腫瘤的發生與發展〔11,12〕。

IL-8是一種促學管生成因子,屬于趨化因子CXC家族,主要作用是趨化并刺激血管內皮細胞生長的活性,通過自身分泌與旁支分泌的方式促進腫瘤細胞的增殖,進而參與腫瘤血管的形成與轉移〔13〕。分析本研究結果中IL-8是影響老年晚期NSCLC患者接受一線化療效果的原因是,IL-8與其特異性受體結合,參與并調節機體生殖生理與病理過程,在參與腫瘤細胞的上皮間充質轉化過程中,IL-8水平升高可以刺激腫瘤細胞表面的E-鈣黏蛋白表達下調,增強波形蛋白表達,促進上皮間充質轉化,改變腫瘤細胞形態、骨架,進而增強腫瘤細胞的遷移與侵襲能力,同時預示機體對免疫檢查點抑制劑產生耐藥,進而影響化療效果〔14,15〕。此外,IL-8可以激活Wnt/β-catenin信號通路,促進基質金屬蛋白酶-2與基質金屬蛋白酶-9表達,破壞細胞外基質,降低細胞與細胞之間的連接,進而促進腫瘤細胞的遷移,導致不良預后〔16,17〕。

CXCL9是由單核細胞與巨噬細胞分泌,起到趨化活化T細胞的作用。分析本研究結果原因,CXCL9可以增強細胞毒性T淋巴細胞的反應,進而促進CD4+與CD8+T淋巴細胞浸潤至腫瘤細胞區域,殺死腫瘤細胞,形成有效的抗腫瘤免疫微環境,進而通過促進免疫反應達到抗腫瘤活性的目的;同時CXCL9與其受體CXCR3結合,起到抗血管生成作用,通過與血管內皮細胞的相互作用,招募T細胞或自然殺傷(NK)細胞,增強腫瘤局部淋巴細胞特異性增殖能力,進而破壞腫瘤血管形成,抑制腫瘤的形成與發展〔18,19〕。此外,臨床分期反應患者病情發展程度,分期越高表明患者病情程度越嚴重,機體的免疫力及抵抗力都嚴重下降,對化療藥物無法耐受,因此影響化療效果〔20〕。

綜上,血清趨化因子MIP-3α、IL-8、CXCL9可以作為老年晚期NSCLC一線化療療效及癌癥進展與復發轉移的敏感指標,通過監測其水平變化,對老年晚期NSCLC患者的治療及預后具有重要意義。