急性缺血性腦卒中血清指標與預后的關系

姚曉雷,井亞萍,胡月麗

(商丘市第三人民醫院,河南 商丘 476000)

急性缺血性腦卒中(AIS)是一種以腦組織缺血缺氧損害和顱內血栓形成為主要臨床特征的腦血管疾病,老年人高發,對患者家庭和社會均造成沉重的經濟負擔[1-2]。若能盡早診斷病情并及時給予對癥治療,可顯著改善此類患者的臨床預后。血清標志物檢查具有檢測方便、結果及時等優勢,已廣泛應用于臨床工作中。研究證實[3-4],血清同型半胱氨酸(Hcy)與腦梗死具有明確的因果關系。研究發現[5],AIS的發生與血腦屏障受損、動脈粥樣硬化、炎癥反應及長鏈非編碼RNA等相關。有報道指出[6],在蛛網膜下腔出血患者中,血清LnRNA母系表達基因3(LncRNA MEG3)含量明顯增加,可通過促進神經元細胞損害起到加速疾病進展的作用?，F已證實[7-8],動脈粥樣硬化是導致腦卒中發生的主要病理機制,而抗髓過氧化物酶(MPO)抗體與動脈粥樣硬化存在密切聯系。目前關于血清Hcy和LncRNA MEG3及抗-MPO抗體水平與AIS患者神經功能缺損和腦梗死面積的相關性研究較少。本研究探討了急性缺血性腦卒中血清指標與預后的關系,報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2021年3月—2023年3月收治的AIS患者100 例為觀察組,選擇同期體檢健康者100 例作為對照組。兩組患者一般資料比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。根據腦梗死體積將觀察組分為小面積組(d<2 cm,n=42)、中面積組(d≥2～<5 cm,n=30)和大面積組(d≥5 cm,n=28)。根據美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評分將其分為輕型組(NIHSS評分<5 分,n=40)、中型組(NIHSS評分≥5～≤20 分,n=28)和重型組(NIHSS評分>20 分,n=32)。本研究經醫院醫學倫理委員會批準。

1.2 納入和排除標準

觀察組納入標準:經影像學檢查明確診斷為AIS,診斷標準參照《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[9];均為首次發病,發病至就診時間不超過24 h;臨床資料完整,均自愿簽署知情同意書。

對照組納入標準:無心腦血管疾病的健康人群,未發生急性缺血性腦卒中;臨床資料完整,且均自愿參與本研究;均為我院體檢的健康人群。

兩組排除標準:無癥狀腦梗死;合并風濕性心臟病、腦外傷、心力衰竭及瓣膜性心臟病者;伴有嚴重臟器功能障礙者;妊娠、哺乳期婦女;合并精神疾病和惡性腫瘤者;依從性不佳者。

1.3 方法

所有受試者均于收治入院時完成顱腦MRI檢測。觀察組患者入院次日和對照組健康體檢者體檢當日清晨采集空腹肘靜脈血8 mL,經離心處理后,保留上層血清于-80 ℃環境中保存,待統一檢測。

1.3.1 血清抗-MPO抗體及Hcy水平

使用貝克曼AU5800檢測儀器檢測血清Hcy和抗-MPO抗體水平,采用酶聯免疫法(ELISA),試劑盒購自長光華醫生物醫學工程有限公司,所有檢測操作均嚴格遵照說明書標準執行。

1.3.2 血清LncRNA MEG3水平

采用qRT-PCR法檢測LncRNA MEG3含量,具體如下:解凍凍存的血液樣本,采用Trizol法提取樣本中的總DNA,并逆轉錄為cDNA。根據擴增反應試劑盒說明書配置反應體系,并進行擴增和檢測。以GAPDH為內參,LncRNA MEG3的上游引物序列為5＇-ATCATCCGTCCACCTCCTTGTCTTC-3＇,下游引物序列為5＇-GTATGAGGATAGCAAAGGTGAGGGC-3＇,引物由北京義翹神州科技有限公司合成,根據2-ΔΔCt法計算LncRNA MEG3相對表達量。

1.4 統計學方法

2 結 果

2.1 兩組一般資料比較

兩組患者的體質量指數(BMI)、性別、年齡和吸煙、糖尿病患者比例比較,差異無統計學意義(P>0.05)。觀察組高血壓患者比例高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05)(見表1)。

表1 兩組臨床資料對比

2.2 兩組血清指標水平及抗-MPO抗體陽性率比較

觀察組患者血清LncRNA MEG3,Hcy水平和抗-MPO抗體陽性率高于對照組,差異有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 兩組患者血清指標水平及抗-MPO抗體陽性率比較

2.3 不同梗死面積患者抗-MPO抗體和血清水平比較

隨著患者梗死面積的增加,其血清Hcy和LncRNA MEG3水平呈升高趨勢,且抗-MPO抗體陽性率也明顯升高,差異有統計學意義(P<0.05)(見表3)。

表3 不同梗死面積患者血清指標和抗-MPO抗體陽性率比較

2.4 不同神經功能缺損程度患者血清指標和抗-MPO抗體陽性率比較

重型組患者的血清Hcy,LncRNA MEG3水平和抗-MPO抗體陽性率高于輕型組和中型組,差異均有統計學意義(P<0.05)(見表4)。

表4 不同神經功能缺損程度患者血清指標和抗-MPO抗體陽性率比較

2.5 AIS患者血清指標和抗-MPO抗體陽性率與腦梗死體積和神經功能缺損的相關性分析

AIS患者的血清LncRNA MEG3和Hcy水平及抗-MPO抗體陽性率與腦梗死體積、NIHSS評分均呈正相關(P<0.05)(見表5)。

表5 AIS患者血清指標和抗-MPO抗體陽性率與腦梗死體積和NIHSS評分的相關性分析結果

3 討 論

臨床證據顯示[10-11],目前臨床針對腦卒中患者的臨床療效并不十分理想,且不少患者治療后伴有程度不一的神經功能缺損,這對患者生活質量造成了嚴重的負面影響,使社會醫療負擔加重,同時還會影響患者情緒,繼而對預后質量產生負面影響。文獻指出[12],動脈粥樣硬化是導致腦卒中發生的主要原因,其次是各種炎性介質和細胞參與的慢性炎癥過程。髓過氧化物酶是一種具有促炎癥作用的特異性標志物。中性粒細胞在被激活狀態下,可通過分泌抗-MPO抗體來介導血管炎性改變和免疫反應[13]。本研究結果顯示,觀察組抗-MPO抗體陽性率高于對照組,提示高水平的MPO與AIS的發生發展過程存在密切聯系,檢測MPO抗體的水平可在一定程度上輔助臨床早期診斷AIS。此外,本研究中,AIS患者的抗-MPO抗體陽性率隨著腦梗死面積和NIHSS評分升高,提示抗-MPO抗體與腦卒中疾病的嚴重程度存在一定相關性。相關性分析結果顯示,AIS患者的血清抗-MPO抗體陽性率與其腦梗死體積呈正相關。分析機制在于[14],在疾病早期,各種細胞因子或代謝產物均可刺激中性粒細胞,促使分泌抗-MPO抗體來參與AIS病理過程;此外,中性粒細胞的大量聚集還會觸發機體的免疫反應,引發神經血管炎癥,進而對患者神經功能造成損傷。

Hcy是甲硫氨酸和半胱氨酸代謝過程中的中間產物,其本質是一種含硫氨基酸。在正常情況下,Hcy在人體血液中的含量較低,但在一些外界因素(原發性或繼發性)的影響下,其代謝會出現異常,致使血Hcy水平明顯升高,誘發腦血管疾病的發生[15]?，F已證實[16],高Hcy是導致腦血管病和動脈粥樣硬化的獨立危險因素,其表達水平與腦梗死呈劑量依賴關系。本研究中觀察組血清Hcy高于對照組,且隨著AIS患者腦梗死面積和神經缺損嚴重程度的增加,其表達水平也呈現明顯上升趨勢。相關性分析結果提示,血清Hcy與AIS患者腦梗死面積和神經功能缺損呈正相關,表明血清Hcy可在一定程度上輔助臨床評估AIS患者病情的嚴重程度。分析其原因在于,高水平的Hcy可通過分泌超氧化物影響凝血因子的功能,血栓形成的風險明顯增加,進而形成動脈粥樣硬化,最終導致腦卒中的發生和病情惡化[17]。

LncRNA MEG3是一種與神經系統發育、突觸可塑性相關的LnRNA,可促進細胞凋亡,并對細胞增殖起到抑制作用。其表達水平在腦缺血再灌注損傷發生時會出現異常改變,主要是通過影響神經元凋亡、血腦屏障通透性及腦梗死體積來參與腦缺血再灌注損傷的病理發展過程。胡雪鐘和童同[18]研究發現,下調LncRNA MEG3水平可起到防止缺血損傷、改善神經功能的作用。腦梗死體積可體現卒中患者的病變體積和范圍[19],NIHSS評分則可反映患者的神經缺損情況[20],兩者可從不同方面來輔助臨床判斷AIS患者的病情。本研究發現,血清LncRNA MEG3水平可隨著AIS患者腦梗死體積和NIHSS評分的增加而呈現升高趨勢,表明LncRNA MEG3與AIS的病理過程存在密切聯系,有望成為臨床評估AIS患者病情的有效參考指標。分析其機制可能在于,LncRNA MEG3作為LncRNA家族成員之一,可通過影響血腦屏障通透性、神經元增殖和凋亡等過程來起到影響AIS的作用[21-22]。

綜上所述,AIS患者的血清Hcy和LncRNA MEG3及抗-MPO抗體水平較高,且均與患者的神經功能缺損程度和腦梗死面積呈正相關,可用于早期診斷AIS和評估病情的嚴重程度。本研究納入患者數量較少,且均為本院區患者,結論的可推廣性不強;此外,本研究中未能明確血清抗-MPO抗體、Hcy及LncRNA MEG33在腦卒中患者不同階段的變化情況和作用機制,仍需進一步多中心的研究以提高結論的準確性。