靶細胞
- NK細胞聯合PD-1單抗殺傷結直腸癌細胞的研究
抗為效應細胞,靶細胞分別為五種結直腸癌細胞系。靶細胞接種培養12 h后,加入效應細胞。NK+PD-1單抗為效應細胞的處理方式是106個NK細胞加入6 μg PD-1單抗在培養箱中培育2 h。兩組均按效靶比0.1∶1、0.5∶1、1∶1、2∶1、5∶1、10∶1、15∶1、20∶1的比例分別加入效應細胞為實驗組,同時設置單獨靶細胞孔和每種比例的單獨效應細胞孔,3個復孔。共同培養24 h后,加入CCK-8試劑孵育3.5 h后用酶標儀測定450 nm波長的OD值
實用腫瘤學雜志 2023年2期2023-05-30
- 感冒了多睡覺，真的有用嗎？
毒感染的細胞（靶細胞）上，才能做出有效的免疫反應。而T細胞與靶細胞之間的附著，就取決于T細胞表面的整合素（β2- integrin）。只有在整合素的幫助下，T細胞才能做出有效的免疫反應。整合素是一種存在于介導細胞和細胞之間以及其外環境的跨膜受體，能幫助細胞進行從外到內，或者從內到外的溝通。正常狀態下，T細胞隨血液循環，其表面的整合素處于休息狀態。在發生病毒感染后，T細胞會被激活，于是發出信號通知細胞表面的整合素，整合素接收到信號后會改變結構，拽住靶細胞表面
飛碟探索 2023年1期2023-05-30
- 感冒了多睡覺，真的有用嗎
感染細胞，即“靶細胞”，從而引起一系列感冒癥狀。在人體免疫系統中，有一種T 細胞，平時監視人體異常反應，一旦發現有感染細胞，就將感染細胞連同病毒一同“吃”掉，從而消除病毒，限制病毒傳播。在戰斗中，T 細胞只有緊緊貼著“靶細胞”才能徹底“吃”掉，這中間需要通知“戰友”整合素的幫忙。整合素是一種T細胞表面的跨膜蛋白，整合素被激活后，拽住“靶細胞”表面的配對蛋白，這樣就能幫助T細胞附著在“靶細胞”上，然后T 細胞才能展開攻擊。但整合素在被激活的時候，很多因素會對
新傳奇 2022年51期2023-01-04
- 傳染性法氏囊病病毒細胞受體的鑒定
步是吸附及進入靶細胞，其主要衣殼蛋白VP2決定了病毒的細胞嗜性，而IBDV 進入靶細胞的具體機制仍未完全明確。近期有研究團隊發表在《Journal of virology》雜志的一項研究“Identification of chicken CD44 as a novel B lymphocyte receptor for infectious bursal disease virus”對IBDV 的細胞受體進行了一系列的篩選與鑒定。該團隊發現CD44 分子
中國預防獸醫學報 2022年3期2022-12-30
- 雙色法和三色法檢測NK細胞殺傷功能的實用性比較
。1.3.2 靶細胞（K562 細胞）的準備K562 細胞培養于含10%FBS 的RPMI1640 培養液中，置于37℃，5%CO2培養箱中培養，每隔3 d換液。收集生長狀況良好的K562 細胞，用PBS 緩沖液洗滌兩次，用含0.1%FBS 的PBS 重懸細胞，并將細胞分為A 組和B 組，每組準備4 管細胞，每管細胞的細胞濃度均為1×106/mL。在A 組和B 組的每管細胞中分別加入熒光染料CFSE 對靶細胞進行標記，37℃避光，水浴20 min；加入5
分子診斷與治療雜志 2022年11期2022-12-23
- 一類具有時滯的HIV 感染模型的動力學性態
數λ表示未感染靶細胞的產生率，a表示感染細胞的死亡率，d表示未感染細胞的死亡率，k表示感染細胞產生游離病毒的速率，u表示游離病毒的清除率，β為感染率系數?？紤]到由于在HIV RNA 逆轉錄為DNA 的過程中，當HIV 進入靶細胞時，HIV RNA 不能完全逆轉錄為DNA。因此，在病毒基因組整合到淋巴細胞基因組之前，會有一定比例的感染細胞恢復到未感染的狀態，通常稱為細胞因子誘導的被感染細胞的自愈。另外，文獻[1]采用雙線性發生率來描述游離病毒感染易感靶細胞的
工程數學學報 2022年5期2022-12-03
- 不同免疫細胞及PD-1單抗殺傷前列腺癌細胞的初步研究*
胞為效應細胞，靶細胞分別為前列腺癌細胞株LNCaP、DU145、PC3。將3種靶細胞以5×103個/孔 的數量分別接種于96孔板中，于37℃，5% CO2培養箱中培養12 h后棄液。PD-1單抗+NK細胞為效應細胞的處理方式是每106個NK細胞加入PD-1單抗6 μg在培養箱中培育2 h。然后按效靶比0.1∶1、0.5∶1、1∶1、5∶1、10∶1、15∶1、20∶1的比例分別加入效應細胞，同時設置單獨靶細胞孔和每種比例的單獨效應細胞孔，每個比例3個復孔。
腫瘤預防與治療 2022年9期2022-11-15
- PI3K/Akt信號通路在HIV感染中的研究進展
染 HIV進入靶細胞依賴于主要受體CD4與協同受體趨化性細胞因子受體5（chemotactic cytokine receptor 5, CCR5）/CXC趨化因子受體4（CXC chemokine receptor-4, CXCR4）的表達，HIV包膜糖蛋白與靶細胞表面CD4的相互作用能夠使CD4磷酸化，通過與非共價相互作用的酪氨酸激酶解離而使受體內吞，HIV包膜糖蛋白120（glycoprotein 120, gp120）與CCR5/CXCR4的相互作
傳染病信息 2022年5期2022-11-07
- COVID-19急癥與重癥宿主內動力學建模研究
出了一個改進的靶細胞限制模型(target cell limited model),以研究不同藥物方案和治療時機對SARS-CoV-2 病毒的影響;Blanco-Rodríguez等[10]使用免疫應答模型(immune response model)來定量研究COVID-19患者體內T細胞和病毒載量的變化,指出細胞的病毒清除率過低會導致疾病的惡化;Ghosh[11]根據兩名COVID-19患者的病毒載量數據擬合數學模型,研究了抗病毒藥物和疫苗接種對SAR
生命科學研究 2022年4期2022-11-05
- 不同信號肽對嵌合抗原受體T細胞殺傷作用的影響研究
效應細胞，陽性靶細胞為表達CD19的NALM-6細胞系和K562-CD19細胞系，陰性靶細胞為不表達CD19的K562細胞系。將靶細胞用calcein-AM 標記后，將其接種于U底96孔培養板（100 μL/孔），接種密度為1 × 105個/mL。將體積為100 μL/孔，不同效靶比（25∶1、5∶1、1∶1）的效應細胞加入對應孔中，共培養體系用含5%胎牛血清的PBS。設置：陽性對照組（加入裂解液）和陰性對照組（加入 PBS），各組均設 4個復孔，37 ℃
中國癌癥雜志 2022年2期2022-03-08
- shRNA靶向抑制CD38的抗CD38 CAR-T細胞構建及其功能的初步鑒定
R-T 細胞與靶細胞共培養時的增殖能力將Raji-luc 和RPMI-8226-luc 細胞用CD38-APC抗體通過FCM 檢測其細胞表面CD38 陽性率。將兩種靶細胞用AIM-Ⅴ完全培養基（含IL-2）分別稀釋至密度4×104個/100 μL，取100 μL 接種于96 孔板實驗孔。取CAR-T 細胞，采用CFSE（用AIM-Ⅴ培養基稀釋成10 μmol/mL）37 ℃避光染色30 min 后，調整細胞密度為1×104個/100μL；取100 μL加在
中國腫瘤生物治療雜志 2022年1期2022-02-27
- 熒光染料雙染流式法和螢火蟲熒光素酶法檢測CAR-T 細胞殺傷的方法學研究
AR-T細胞與靶細胞以一定比例共培養，特定時長之后用特定的方法檢測靶細胞的死亡比例，即可以用靶細胞的死亡率來表示CAR-T 細胞的殺傷能力。靶細胞死亡率的檢測方法中，傳統的51Cr（鉻51）釋放實驗需要專門的放射性檢測儀器［5］，而銪元素（Europium）標記、乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）代謝產物等檢測方法具有較高的檢測背景，導致信噪比較低［6-7］，因此我們建立并比較了熒光染料雙染流式法和螢火蟲熒光素酶法兩種方法，希
南京醫科大學學報（自然科學版） 2021年9期2021-10-12
- 乳腺癌細胞系MCF-7中阿霉素的代謝物分析
用，一些藥物在靶細胞中無法積蓄導致藥物治療效果差[4]。藥物的細胞內處置過程和結合靶點的濃度是觀察靶器官治療反應的決定因素[5]?；谘獫{藥物濃度的經典藥代動力學研究可能不足以預測體內反應，無法從腫瘤靶細胞角度解釋藥物分子作用的行為特征，現有研究缺乏靶細胞對于藥物處置的認識，需要擴大藥代動力學范圍，對其進行進一步研究[6]。人乳腺癌細胞系MCF-7是阿霉素適應癥乳腺癌公認的成熟的細胞模型，在MCF-7的耐藥研究中發現其耐阿霉素耐藥株MCF-7/DOX相比野
中國藥理學通報 2021年9期2021-09-08
- 流式細胞術和LDH釋放法檢測NK細胞殺傷效能的實用性比較
胞的自然凋亡和靶細胞的死亡，是近幾年發展的一種方法[5～7]。本研究選取流式細胞術和LDH的方法檢測體外培養的NK細胞對K562細胞的殺傷活性，對檢測結果進行分析，優化了細胞濃度和效靶細胞比，為NK細胞功能評估提供穩定可靠的檢測方案。材料與方法1 樣本來源白血病細胞株K562為本實驗室保存。14例腫瘤患者外周血均來自中山大學附屬第三醫院嶺南醫院，其中男7例，女7例，年齡40～85歲，平均年齡（59.57 ± 3.38）歲，所有患者均簽署知情同意書。2 主要
中國組織化學與細胞化學雜志 2021年1期2021-07-08
- 體外誘導擴增γδT細胞對甲狀腺癌細胞殺傷作用的研究
癌腫瘤細胞作為靶細胞，研究γδT細胞的殺傷作用，為γδT細胞作為過繼細胞免疫治療應用于臨床提供前期研究基礎。1 資料與方法1.1 試劑與儀器PE標記CD8、CD56、CD25、TCR-γδ的鼠抗人McAb及FITC標記的CD4、HLA-DR、TCR-αβ的鼠抗人McAb均購自BD PharMingen公司；MTT檢測試劑盒購自南京凱基生物科技發展有限公司；人外周血淋巴細胞分離液購自GE公司；注射用重組人白介素-2(IL-2)購自北京雙鷺藥業股份有限公司；唑
山西衛生健康職業學院學報 2021年1期2021-07-03
- 大鼠骨髓間充質干細胞特異性核酸適配子的篩選和鑒定*
程，招募、捕獲靶細胞提供新的思路和方法。1 材料與方法1.1 主要材料DMEM低糖培養液(美國Hyclone)，胎牛血清(美國Gibco)，0.25% EDTA-Trypsin(美國Gibco)，青霉素-鏈霉素雙抗(美國Gibco)，BSA(美國Sigma)，抗大鼠CD29、CD31、CD45、CD90抗體(美國Abcam)，DNA文庫、上游引物、下游引物、FAM-上游引物、Biotin-下游引物(美國Invitrogen)，HiFi SuperMix(日
華中科技大學學報（醫學版） 2021年2期2021-05-19
- 溶瘤呼腸孤病毒聯合CD30/CD16A雙特異性抗體對NK細胞介導的ADCC效應的影響*
合，另一端可與靶細胞結合后促進NK細胞對靶細胞的殺傷作用[1-4]。CD30/CD16A作為一種4價的BsAbs，含有2個CD16A結合位點及2個CD30結合位點，使其在特異性連接CD30分子陽性的腫瘤細胞的同時又能特異性連接CD16A陽性的NK細胞，從而通過抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)殺傷CD30分子陽性的腫瘤細胞[5]。正常情況下，CD30分子低表
貴州醫科大學學報 2021年1期2021-02-05
- 具有Beddington-DeAngelis功能反應和分布時滯的病毒動力學模型的穩定性
考慮到病毒感染靶細胞過程中普遍存在的非線性感染率,HUANG等[9]提出了一類具有Beddington-DeAngelis功能反應的病毒動力學模型:(1)其中，x(t)為健康靶細胞在t時刻的細胞密度，y(t)為感染細胞在t時刻的細胞密度,v(t)為游離病毒在t時刻的細胞密度,為健康靶細胞的生成速率,d為健康靶細胞的自然死亡率,β為病毒感染健康靶細胞的感染率,p為感染細胞的自然死亡率,常數k為每個感染細胞在單位時間內生成的游離病毒數量,u為游離病毒的自然死亡
華南師范大學學報（自然科學版） 2020年5期2020-10-30
- 一種無標記且實時檢測CD19 CAR-T細胞殺傷功能的方法
AR-T細胞對靶細胞的殺傷效應是CD19 CAR-T產品質量控制的關鍵環節。目前使用的方法主要包括放射性同位素51Cr 釋放檢測、乳酸脫氫酶釋放檢測等[7]。這些方法均需要對靶細胞進行標記，操作繁瑣這些方法操作繁瑣，可重復性低，穩定性差，且均為終點檢測法，無法實現對殺傷效應的實時監測。實時細胞分析(Real Time Cellular Analysis, RTCA)系統是基于電阻抗傳感器原理的細胞檢測技術。RTCA培養板底部設計有金屬微電子感應器，細胞在培
醫學研究生學報 2020年8期2020-08-14
- 2型糖尿病細胞學機制與非藥物干預探究
泌與胰島素對其靶細胞的信號調節、信號傳遞角度，分析糖尿病發生的可能的細胞原因與機體原因，是胰島細胞受自由基攻擊受損，導致生產、分泌與信息傳遞障礙引起，就此提出營養修復細胞、運動減肥和保肝護肝等非藥物干預策略。關鍵詞：2型糖尿病;細胞學機制 ;非藥物;干預糖尿病是世界三大慢性病之一，發病率逐年增高，在我國的發病率僅次于心血管疾病，成為人民的主要健康殺手，且至今沒有一個有效快速的根治方法和藥物。對2型糖尿病來說，控制生活方式、修復受損的生產胰島素的細胞和其靶細
各界·下半月 2020年6期2020-07-21
- 不同FMDV易感性豚鼠PBLC對模擬FMDV感染細胞的殺傷作用
感染體細胞制作靶細胞也是必要的[5]。然而由于進行FMDV感染細胞試驗受到生物安全的限制，為此本課題組通過構建重組VP1的慢病毒質粒，替代FMDV感染豚鼠腎小管上皮細胞，制備表達VP1蛋白的腎原代細胞，然后通過豚鼠免疫細胞(效應細胞)對FMDV感染靶細胞的殺傷作用的研究，闡明模擬FMDV感染細胞的可行性，在免疫細胞層面上探究機體FMDV天然抗性的免疫機理。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 實驗動物Zmu-1：DHP豚鼠系浙江大學實驗動物中心培育的白色品
中國實驗動物學報 2020年2期2020-05-03
- 微粒誘導中性粒細胞活化導致血管內皮損傷的研究進展
NA，以及針對靶細胞的膜蛋白和胞質蛋白，其中核酸活性分子作為親代細胞的遺傳物質，主要負責細胞間遺傳信號的傳遞和蛋白質合成的調控，蛋白質活性成分可以與靶細胞相互作用，促進其與靶細胞的黏附和內化，這些信息可以轉移到受體細胞中，從而產生功能性后果。因此，MPs被認為是細胞間通訊的真正載體和各種生物信息的中介[9-11]。MPs作為細胞間交換生物材料和信息的媒介，主要有兩種調節機制：①MPs作為復雜信號的循環模塊，通過呈現膜相關生物活性物質的組織簇來激活靶細胞上的
國際婦產科學雜志 2020年4期2020-03-06
- 跨膜型抗CD3單鏈抗體介導淋巴細胞體外特異性殺傷AFP陽性肝癌細胞活性觀察
飾的HepG2靶細胞與PBMC結合情況觀察 取對數生長期HepG2細胞，分別感染AdCD3scfv、AdTrack腺病毒(100 MOI)。將感染后的細胞接種至24孔培養板，每種細胞各接種2孔，共4孔。次日，按效靶比10∶1，向上述4孔各加5×105個PBMC(100 μL)；同時各向每種細胞的其中一孔加入可溶性anti-CD3單克隆抗體25 ng/mL，另一孔加等體積PBS。靜置3 h后，移除未結合的游離PBMC。每孔各加入100 μL PBS，于顯微鏡
山東醫藥 2020年2期2020-02-21
- 顆粒酶A 在腫瘤免疫中的功能研究
e 的方式觸發靶細胞死亡[5]。由于GzmA 單克隆抗體不能識別pro-GzmA，因此，活化后的顆粒酶A 可能發生了構象的改變[6]。已有實驗驗證，當把核裂解物與胰蛋白酶一起孵育過夜時，大多數蛋白質會降解。但是，在與相似濃度的GzmA 孵育過夜后，大多數蛋白質條帶保持不變[7]。因此，GzmA 的結構決定了它對底物的高特異性。2 GzmA 合成、加工、傳遞過程的細胞生物學活性在顆粒酶的合成，加工和存儲過程中，有幾種機制可確保它在殺傷細胞內沒有活性，以保護其
科學技術創新 2020年9期2020-01-07
- NK細胞體外培養及對HepG2細胞的殺傷活性研究*
瘤和病毒感染的靶細胞，在機體免疫監視和早期抗感染和免疫過程中起重要作用[1]。NK細胞來源于骨髓造血干細胞，其發育成熟依賴于骨髓及胸腺微環境，占淋巴細胞總數的9%～25%[2]，本研究通過體外培養將單個核細胞培養為NK細胞并觀察對HepG2細胞的殺傷活性。1 材料與方法1.1 主要實驗材料 HepG2細胞株(中國科學院上海細胞庫)；NK細胞培養基(CellGroRGMP SCGM)；IL-2(沈陽三生制藥)，胎牛血清(GIBCO)；異硫氰酸熒光素(FITC
醫學理論與實踐 2019年24期2019-12-27
- 小鼠脾淋巴細胞對人HepG2細胞殺傷活性檢測方法的建立
。在效應細胞與靶細胞混合前，先將靶細胞用CFSE染色, 染色后的靶細胞與效應細胞混合作用后，再用PI染色，采用流式細胞術即可區分被殺傷靶細胞及存活靶細胞，并體現效應細胞的死亡情況，測定效應細胞對靶細胞的殺傷活性, 且檢測速度較快。本實驗擬建立基于流式細胞術的評價小鼠脾淋巴細胞對人HepG2細胞殺傷活性的方法，以準確檢測模型小鼠脾細胞對人腫瘤細胞的殺傷作用。1 材料與方法1.1 實驗動物SPF級KM小鼠，4周齡，體質量18～22 g，購于湖南斯萊克景達實驗動
實驗動物與比較醫學 2019年3期2019-07-15
- 流式細胞術檢測NK細胞的細胞毒作用的兩種方法比較①
；或者無法區分靶細胞和效應細胞死亡，不能很好地反映NK細胞的細胞毒功能水平。本文在已有方法的基礎上，采用流式細胞術比較鈣黃綠素乙酰甲酯(Calcein-AM)釋放法，及羧基熒光素二醋酸鹽琥珀酰亞胺酯/7-氨基-放線菌素 D(CFSE/7-AAD)雙染色法檢測體外培養后的NK細胞對K562細胞及白血病原始細胞的細胞毒活性，并對檢測結果進行分析，為NK細胞毒活性檢測提供一種較為穩定可靠、重復性好、靈敏度高的方法。1 材料與方法1.1材料1.1.1樣本來源 K5
中國免疫學雜志 2019年3期2019-03-13
- 高中生關于腫瘤基因治療前景及方法的學習與思考
腫瘤基因治療;靶細胞;寬泛化;方向性前言：腫瘤基因治療是一種現代化的治療手段，強調將外源正?；驅?span class="hl">靶細胞，以糾正或補償缺陷/異?；蛞鸬陌┌Y，達到治療目的。筆者最初在課外閱讀中發現了這一理論，同時了解到目前我國已經成為各類癌癥的高發國家，針對腫瘤治療的研究刻不容緩。在此基礎上，筆者利用課外時間閱讀了更多的科普文章和學術雜志，嘗試就腫瘤基因治療、高中生對該方式的學習和思考等進行解讀。1.腫瘤基因治療基因治療尚沒有廣泛推廣，該技術一般強調通過基因工程技術進
神州·中旬刊 2019年1期2019-02-12
- 傳染性法氏囊病炎癥反應的誘因：巨噬細胞轉移抑制因子
)可以通過促進靶細胞分泌巨噬細胞轉移抑制因子(MIF)，從而介導炎癥細胞的遷移及核心炎癥因子IL-1β及IL-18在巨噬細胞內的表達上調。該團隊以vvIBDV Gx株為主要研究對象，將Gx株感染SPF雞后發現其可以導致法氏囊中單核巨噬細胞及異嗜性細胞的遷移，同時這兩種細胞中IL-1β和IL-18的轉錄水平上調。為了探究vvIBDV導致上述炎癥反應的原因，該研究利用iTRAQ試驗篩選到Gx株感染靶細胞后相比于人工致弱株感染該細胞后顯著上調的炎癥相關蛋白-MI
中國預防獸醫學報 2019年12期2019-01-10
- 肺癌抗原COX-2長肽疫苗的設計及免疫活性檢測*
通過離心收集靶細胞，并將細胞重懸于含有1%FCS的PBS中，并將細胞濃度調節至1×109/L。致敏靶細胞：每1 mL細胞懸浮液加入0.5 μL 5 mmol/L CFSE(購自Sigma)，室溫、光照孵育4 min。對照靶細胞：每1 mL細胞懸液中加入0.5 μL 100 μmol/L CFSE，室溫、光照孵育4 min。將細胞用5% FCS-PBS洗滌1次，離心并除去上清液，將細胞重懸于無血清IMDM培養基中。將效應細胞(前期誘導的CTL作為效應細胞)
中國病理生理雜志 2018年12期2018-12-27
- 關于“免疫調節”的疑惑與剖析
來源[1]。9靶細胞裂解能等同于靶細胞凋亡嗎在細胞免疫過程中，效應T細胞通過其表面的受體特異性地識別靶細胞表面的抗原肽—MHC分子復合物，使效應T細胞與靶細胞密切接觸，之后效應T細胞以胞吐方式釋放顆粒內容物——穿孔素和顆粒酶。穿孔素在靶細胞膜上聚合，形成跨膜通道，顆粒酶經穿孔素形成的跨膜通道進入細胞內激活半胱天冬蛋白質酶-10，誘導靶細胞凋亡。另外，T細胞還可以通過高表達的FasL(細胞表面蛋白質配體)與靶細胞表面的Fas(誘導細胞凋亡的蛋白質死亡受體)結
生物學教學 2018年9期2018-11-30
- 雙特異性單鏈抗體BiTE的研究進展
腫瘤表面抗原的靶細胞，幫助T細胞重定向到腫瘤病灶區[2]。人體自身大量存在的T細胞被激活可大量擴增，產生強大而持久的細胞毒性反應，且具有免疫記憶的潛力，因此BiTE利用T細胞治療癌癥的顯著優勢可產生較好的治療效果[3]。1 BiTE的結構BiTE本質上是一個多肽鏈，結構上由短的融合柔性接頭與兩個具有抗原特異性的單鏈可變片段(single chain variable fragment，scFv)組成(圖1)，大小約為55～60 ku，長度約為11 nm[4
生物學雜志 2018年4期2018-08-15
- 癌-睪丸抗原MAGEC2 HLA-A3限制性細胞毒性T淋巴細胞表位的鑒定*
2A3細胞作為靶細胞，用無血清IMDM培養基調整細胞密度[11]。2.5干擾素γ(interferon-γ，IFN-γ)分泌水平的檢測 取出酶聯免疫斑點(enzyme-linked immunospot，ELISPOT)實驗板條(購自達科為生物技術有限公司)，加200 μL無血清的IMDM培養基進行封閉，靜置10 min；誘導的CTL作為效應細胞，荷肽的T2A3細胞作為刺激細胞，細胞密度均調整為2×109/L；設立對照孔和實驗孔；37 ℃、5% CO2孵育
中國病理生理雜志 2018年5期2018-05-17
- 基于癌睪抗原CTNNA2長肽疫苗免疫活性檢測?
驗通過離心收集靶細胞，并將細胞重懸于含有1% FCS的PBS中，并將細胞濃度調節至1×106/ml。致敏靶細胞：每1 ml細胞懸浮液加入0.5 μl 15 mmol/L羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxy fluorescein succinimidyl ester, CFSE)購自美國Sigma公司)，室溫，光照孵育4 min。對照靶細胞：每1 ml細胞懸液中加入0.5 μl 100 μmol/L CFSE，室溫，光照孵育4 min。將細胞用5% FC
解剖學雜志 2018年6期2018-04-08
- 本刊副主編王廣基院士榮獲2017年度江蘇省科學技術一等獎
要問題，提出了靶細胞藥動/藥效結合研究新理論模型與新方法，使藥代動力學從“宏觀”深入到“微觀”,實現了藥物的藥效/毒性的科學評價,提高了新藥研發的效率和成功率。項目建立了4個關鍵技術體系：靶細胞/亞細胞器內藥物及其代謝物的定量、可視化檢測技術；基于“單層→多層→球體”多水平多維度細胞模型的ADMTE研究技術；靶細胞代謝及作用靶標發現的關鍵技術；靶細胞PK/PD集成研究技術體系。授權專利3項。發表SCI論文65篇，SCI他引共752次。促進了2個1.1類新藥
中國藥科大學學報 2018年5期2018-01-17
- 俄研究用新方式改善基因療法效果
傳物質順利穿過靶細胞的內外膜，并且躲避細胞器的分解，是基因療法成功與否的關鍵。俄羅斯科研人員發現，用一種蛋白質制作“密封船”運送少量遺傳物質，有望獲得更佳療效。將核糖核酸（RNA）或脫氧核糖核酸（DNA）等外源性遺傳物質植入細胞的過程名為“轉染”。此前研究發現，用特定的“小干擾RNA”轉染靶細胞可抑制其細胞核內的“問題基因”，使這類基因無法指導生成有害物質。為使小干擾RNA順利穿透靶細胞的內外膜并發揮功效，研究人員嘗試制成多種能包裹這種遺傳物質并可生物降解
醫藥前沿 2018年30期2018-01-16
- 遵循藥理學原理的細胞毒檢驗方法探討
應用錯誤，以效靶細胞比為條件檢測的殺傷率是實驗條件應用錯誤，違背藥理學原理，不反映細胞毒活力，沒有實用性。本文通過對TCA錯誤理念和方法條件的探討分析，遵循藥理學原理建立了一個比較實用的細胞毒活力檢驗方法。新方法以極限稀釋分析方法為基礎，以效應細胞密度為自變量，用效應細胞含有的細胞毒活性細胞頻率(CCF)和100%殺傷率限定的效應細胞密度(ID100)做細胞毒活力指標，通過量-效曲線和條件標準化測定CCF和ID100；不標記細胞，用全或無計數方法定量靶細胞
腫瘤基礎與臨床 2017年5期2017-11-17
- 核酸適配子探針對轉移性大腸癌細胞的多靶點成像及其靶標的定量分析
針可特異性識別靶細胞的不同靶點, 相互之間無識別干擾. 對靶細胞的熒光成像表明, 與單一探針相比, 多個探針聯合使用可明顯提高細胞表面的熒光信號強度, 且陽性細胞檢出率明顯增多, 顯示出更高的檢測靈敏度. 使用流式細胞術及熒光成像定量方法分析了7個探針對不同轉移特性大腸癌細胞系的識別能力, 結果表明, 多個探針聯合使用可有效評價大腸癌細胞的轉移潛能. 本研究證實通過多個核酸適配子探針的聯合使用可有效提高對靶細胞識別的靈敏度和準確性, 為核酸適配子的廣泛應用
高等學?；瘜W學報 2016年7期2016-12-21
- 攜帶不同HBV抗原基因片段的重組腺相關病毒轉染樹突狀細胞誘導CTL的效應研究*
對HBV感染的靶細胞HepG2.2.15特異性的細胞毒作用。結果不同HBV抗原基因rAAV-HBV-S、C、E、X 轉染DC后CD14、CD80、CD83、CD86的表型表達中，CD80、CD83差異有統計學意義(P0.05)。結論rAAV-HBV-S、C、E、X轉染DC均可誘導CTL引起MHC-Ⅰ依賴的特異性細胞毒效應。肝炎病毒，乙型；樹突細胞；T淋巴細胞，細胞毒性；人主要組織相容性復合物；腺相關病毒慢性乙型病毒性肝炎的治療目前仍然是臨床醫師面臨的重大挑
重慶醫學 2016年27期2016-11-01
- 生命系統信息傳遞的三類情況
、效應T細胞與靶細胞的識別等。（3）通過細胞通道傳遞信息，如植物的胞間連絲。3．生態系統的信息傳遞（1）生物與生物之間的信息傳遞，如物理信息、化學信息、行為信息和營養信息。（2）生物與無機環境的信息傳遞，如物理信息。二、針對訓練【例1】細胞間和細胞內信息傳遞過程中，需要受體對信號的識別。甲、乙分別是人體細胞內受體和細胞表面受體的作用機制模式圖。下列有關受體的敘述錯誤的是 （ ）A. 圖中細胞膜上的受體、細胞質受體和核受體的化學本質均為糖蛋白（蛋白質）B.
教學考試(高考生物) 2016年5期2016-09-03
- 全細胞的核酸適配體篩選的研究進展
究進展,介紹了靶細胞的分類、核酸庫的設計、篩選條件和方法以及核酸適配體的親和力表征方法等。并列出全細胞靶標的核酸適配體序列。關鍵詞:核酸適配體;細胞;篩選;指數富集的配基系統進化技術;綜述核酸適配體是從人工合成的隨機單鏈DNA(ssDNA)或RNA文庫中篩選得到的以高親和力、高特異性與靶標結合的ssDNA或RNA。核酸適配體通常由10～100個堿基組成,這些堿基可通過分子內堿基配對形成穩定的二級結構如發夾(hairpin)、假結(pseudoknot)、G
色譜 2016年4期2016-05-12
- 自然殺傷T淋巴細胞對黑色素瘤細胞的免疫調節及殺傷功能實驗研究
-G5細胞作為靶細胞，以總淋巴細胞為效應細胞。(1)調節效應實驗以NKT細胞或CD4+CD25+T淋巴細胞為調節細胞，分為3組：NKT組、CD4+CD25+T組、靶細胞空白對照組；另設有1640空白對照組(RPMI1640溶液)。(2)殺傷效應實驗以NKT或自然殺傷(NK)細胞為效應細胞，分為3組：NKT組、NK組、靶細胞空白對照組?；旌吓囵B24、48、72 h后，通過活體成像系統檢測該培養系統的靶細胞生物發光，以監測NKT細胞的調節及殺傷效應。結果(1)
國際檢驗醫學雜志 2016年5期2016-04-11
- 關于“免疫調節”的幾個疑難問題解析
效應T細胞誘導靶細胞裂解死亡屬于細胞凋亡還是細胞壞死？教材中提到：效應T細胞與靶細胞密切接觸，使這些細胞裂解死亡，釋放抗原，那這應該屬于細胞壞死。而必修1“細胞的衰老和凋亡”一節中又提到：被病原體感染的細胞清除屬于細胞凋亡。到底該過程屬于細胞壞死還是細胞凋亡呢？效應T細胞(殺傷T細胞)殺傷靶細胞的機制有兩個：①誘導靶細胞裂解。當效應T細胞與靶細胞密切接觸時，效應T細胞將胞漿顆粒中的穿孔素和顆粒酶釋放到靶細胞上。穿孔素分子集中到靶細胞膜上，嵌入細胞膜的磷脂雙
生物學教學 2016年5期2016-04-10
- 科研
，可特異性降解靶細胞干擾素信號通路的重要分子STAT1，從而降低靶細胞內磷酸化STAT1的水平，進而抑制靶細胞產生抗病毒免疫分子。當特異性抑制靶細胞內蛋白酶體活性、提高STAT1表達水平時，靶細胞也提高了限制豬流行性腹瀉病毒感染、復制的能力。據研究員王玉娥介紹，該研究闡明了豬流行性腹瀉病毒感染抑制細胞干擾素信號通路的作用機制，明確了對傳統冠狀病毒抵御機體免疫應答的認識，為豬流行性腹瀉病毒等冠狀病毒致病機制和相關藥物的研究提供了新思路、新策略。
獸醫導刊 2016年15期2016-04-06
- 科技
染可特異性降解靶細胞干擾素信號通路的重要分子STAT1（信號轉導與轉錄激活子1），從而降低靶細胞內磷酸化STAT1的水平，進而抑制靶細胞產生抗病毒免疫分子（干擾素）的能力。據了解，該研究闡明了豬流行性腹瀉病毒感染抑制細胞干擾素信號通路的作用機制，明確了對傳統冠狀病毒抵御機體免疫應答的認識，為豬流行性腹瀉病毒等冠狀病毒致病機制研究提供新思路，為針對該病藥物研究提供新靶點，為該病防控提供新策略。
中國飼料 2016年14期2016-02-03
- 復方型雙聯雙重定位式胞內疫苗設計方案
確地瞄準和捕獲靶細胞，特異性地與靶目標發生反應，因而有“生物導彈”之稱。這種將免疫治療和與藥物結合的免疫-化學療法 (也稱“導彈”療法)，利用單克隆抗體與靶細胞特異性結合，將藥物帶至病灶部位，可直接用于人類疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究，為人類疑難疾病的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊前景。白濤先生長期從事生物科技和醫藥實驗研究，緊跟國際研發前沿動態。他發明的“直接導入式生物導彈”的技術優勢在于：它屬于第三代“生物導彈”，主要由抗體制導裝置、PTD分
海峽科技與產業 2015年9期2016-01-04
- 一類病毒動力學模型的全局穩定性
時刻未受感染的靶細胞、感染HIV病毒的靶細胞及HIV-1病毒數;s表示新靶細胞的生成率;d表示未感染的靶細胞的自然死亡率;δ是受感染的靶細胞的死亡率;受感染的靶細胞以比率q生成自由病毒;參數c表示HIV-1病毒被體內免疫系統吞噬的比例.假設HIV-1感染靶細胞服從雙線性發生率,即kT(t)V(t).所有的參數都是正常數.文獻[4]已證明模型的全局動力學性態完全由基本再生數決定.基于系統(1),一些作者研究了具有非線性發生率的病毒動力學模型[5-7].文獻[
信陽師范學院學報（自然科學版） 2015年1期2015-08-08
- “細胞凋亡”與“細胞免疫”的知識聯系及教學建議
出新的問題：“靶細胞的裂解死亡是細胞凋亡嗎？這一過程沒有體現靶細胞‘自動結束生命’??？”面對學生的這一系列提問，老師應該提供怎樣的幫助呢？二、相關知識1.細胞凋亡與細胞壞死細胞凋亡是由基因所決定的細胞自動結束生命的過程。細胞壞死則是極端的物理、化學因素或嚴重的病理性刺激引起的細胞損傷和死亡。細胞凋亡在形態學上有非常典型的特征，即凋亡小體的形成。其大體過程是：核內染色質固縮，沿核膜分布，接著斷裂為大小不等的片段；細胞質也凝縮，核糖體逐漸從內質網上脫離，內質網
新課程(下) 2015年11期2015-02-24
- 細胞毒性T 淋巴細胞活性檢測方法進展
，通過測定死亡靶細胞釋放到上清中的51Cr，即可計算出效應細胞活性。該方法曾被認為是細胞毒性檢測的“金標準”，但因其敏感性差、標記率低，并存在同位素污染問題，目前已經較少使用。1.3 Calcein-AM 熒光法 Calcein-AM 是一種可對活細胞進行熒光標記的染色試劑，本身無熒光，穿透細胞膜進入到細胞質后，酯酶會將其水解為綠色熒光物質Calcein(鈣黃綠素)。當效應細胞作用于靶細胞，死亡的靶細胞細胞膜通透性增加，Calcein 就會釋放到細胞培養液
中國免疫學雜志 2015年3期2015-01-25
- 以核酸適體KMF2-1a為基礎的乳腺癌細胞靶向化療藥物載體研究
具有良好的識別靶細胞能力[1]。本研究以探討化學抗體KMF2-1a能否被靶細胞特異性內吞為最終目標,分析總結其藥物開發潛力。1 材料及方法1.1 細胞核系選取人乳腺癌細胞系MCF-1OAT1和正常上皮細胞MCF1OA1,培養基含有20μg/ml的胰島素、20ng/ml表皮細胞因子、5%的馬血清,癌細胞在37℃下5%的二氧化碳濃度下無菌培養。1.2 試劑及裝置洗滌緩沖液:用于清洗細胞,以便去除細胞雜質以及熒光基團。其調配方法為:以杜氏磷酸鹽緩沖液為基液,在其
生物技術世界 2014年8期2014-12-16
- 特異性TCRαβ基因轉染T細胞促進抗腫瘤免疫的研究①
完全培養基調節靶細胞至終濃度1×105個/ml。倒置熒光顯微鏡觀察染色效果。將靶細胞接種于V底96孔培養板，100 μl/孔。按不同效靶比(3∶1、10∶1、30∶1)加入以下各組效應細胞:a.PBMC對照組;b.空載體轉染組;c.TCR基因轉染組。并設自發釋放組(只加入完全培養基)、最大釋放組(加入2%TritonX-100)?？傮w積均為100 μl/孔。以上各實驗組和對照組均為5個復孔。37℃孵育4 h，離心機離心96孔板，1 000 r/min離心5
中國免疫學雜志 2014年7期2014-11-27
- NK 細胞免疫突觸形成過程研究進展
力，可以通過和靶細胞形成緊密連接，即形成溶酶免疫突觸的形式，殺傷靶細胞。這代表了在此過程中通過一系列的步驟釋放特殊的細胞器-溶酶顆粒的動態的分子排列［3］。成熟和功能性的NK 細胞溶酶突觸的形成可以分為多個階段:識別階段、觸發階段、效應階段、終末階段。每個階段又可分為若干小階段［4］。這些過程使得溶酶顆粒傳遞到突觸上，且進一步加強突觸和靶細胞的緊密連接，從而將溶酶顆粒釋放到靶細胞。NK 細胞免疫突觸的形成對免疫相關性疾病的發生發展起到至關重要的作用，但是國
中國免疫學雜志 2014年9期2014-01-28
- GM-CSF分泌型肝癌疫苗對荷瘤鼠脾血細胞毒性T淋巴細胞殺傷活性的影響
H22細胞作為靶細胞進行重復刺激，觀察效應細胞對靶細胞的殺傷比率。采用細胞增殖計數法（cell counting kit-8，CCK-8）法，將對數生長期小鼠肝癌細胞H22，以1×106/ml接種于96孔培養板中，每孔 100μl，按效 /靶比 50:1、25:1和5:1的比例分別加入脾臟細胞懸液100μl，每組設立3個復孔，同時設立靶細胞對照組、效應細胞組和空白對照組。在37℃、5%CO2培養箱培養4h后，每孔分別加入CCK-8試劑10μl，培養箱中孵育
實用肝臟病雜志 2013年4期2013-09-20
- 結腸癌細胞總RNA負載成熟樹突細胞體外誘導抗腫瘤作用
照組效應細胞。靶細胞:轉染CEA mRNA的DC作為靶細胞1;SW480細胞作為靶細胞2;Hela細胞作為靶細胞3。按效靶比 40∶1、20∶1、10∶1、5∶1將各組效應細胞與靶細胞混合并加入96孔板，每組設3個復孔，分別作為實驗孔，37℃、5%CO2孵育5 h，按乳酸脫氫酶(LDH)比色法試劑盒說明書操作，用分光光度計在510 nm處檢測吸光值。只分別加入靶細胞的為自然釋放孔，只分別加入靶細胞后再加入Triton X－100裂解細胞的為最大釋放孔。殺傷
中國老年學雜志 2012年13期2012-08-02
- 基于CD107a標記流式細胞儀檢測NK細胞毒性方法的建立
。NK細胞殺傷靶細胞時,毒性顆粒將到達漿膜面并與細胞膜融合,引起顆粒內容物釋放,最終導致靶細胞的死亡[4]。隨著脫顆粒的發生,CD107a分子被轉運到細胞膜表面,且CD107a分子的表達上調與穿孔素的分泌一致[5]。因此,CD107a分子陽性表達的NK細胞可代表具有殺傷活性的NK細胞。長期以來,51Cr釋放實驗是檢測細胞毒活性的金標準,但51Cr具有半衰期短和放射性等缺點[6]。國內大多采用乳酸脫氫酶(LDH)釋放法,但表現出敏感性低的缺點[7],從而期待
實用臨床醫藥雜志 2010年13期2010-09-14
- 腺病毒介導的熱休克蛋白 70表達對神經元氧化應激損傷的保護作用
文獻 [4]。靶細胞主要為神經元和膠質細胞。1.3 感染靶細胞及氧化應激模型的建立1.3.1 實驗分組 對照組包括正常細胞對照組 (未感染組)和腺病毒對照組 (vAd-GFP感染組);實驗組為重組腺病毒vAd-HSP70感染組。病毒感染組在感染 48 h時經 0.5 mol/L H2O2處理,同時未感染組也給予氧化應激處理。1.3.2 感染靶細胞 體外培養神經元和膠質細胞達 70%～80%融合時,棄去培養液,用 PBS洗細胞單層一次,接種 200 μl低溫
中國全科醫學 2010年5期2010-07-16
- IL-15對人γδT細胞殺傷結核桿菌感染THP-1細胞的影響＊
-1細胞,作為靶細胞。效應細胞和靶細胞以不同比例孵育4 h,用碘化丙啶(PI)染色后在流式細胞儀上檢測,CSFE和PI雙陽性細胞為被殺傷靶細胞。IL-15作用于γδT細胞24 h后,再檢測γδT細胞對 M tb感染 THP-1細胞的細胞毒活性。結果人γδT細胞與 M tb感染 THP-1細胞以1∶1至50∶1的比例作用4 h后,人γδT細胞對結核桿菌感染的 THP-1細胞的細胞毒活性從22.5%增加至80.7%;而γδT細胞與未感染 M tb的 THP-1
中國人獸共患病學報 2010年10期2010-01-24
- 軍團菌毒力因子致病作用的研究進展
病性與其能侵入靶細胞并在細胞內生存繁殖密切有關。當人吸入直徑小于5 μm的顆粒,細菌可直接進入人呼吸系統的細支氣管和肺泡,通過其外膜孔蛋白、菌毛等菌體表面結構成功粘附于靶細胞(巨噬細胞、單核細胞及肺泡上皮細胞等),并誘導靶細胞的吞噬作用。在進入靶細胞后,軍團菌通過各種毒力因子的介導作用,干擾吞噬體的磷脂雙層結構,阻止吞噬體與溶酶體的融合,在靶細胞中存活并繁殖。另一方面,軍團菌在胞內生長繁殖時可產生和釋放各種毒素和酶,逃避吞噬細胞的殺傷,并引起肺組織的損傷。
上海預防醫學 2009年11期2009-12-28
- 幾種淋巴因子簡介
可作用于相應的靶細胞，使靶細胞發生特性或功能的變化。淋巴細胞借助淋巴因子對鄰近或遠離的靶細胞產生作用，這與抗體的作用相平行，是實現免疫效應和免疫調節功能十分重要的途徑。1淋巴因子的命名淋巴因子在正常人和動物體內含量極少，不易檢測或提取。各種淋巴因子最初都是從在體外培養的淋巴細胞培養液的上清液中發現的。這種上清液所含的淋巴因子的濃度很低，只能用體外試驗的方法來檢測其生物學活性。自1966年以來的報道，有近百種不同名稱的淋巴因子，其中大部分缺乏分子結構的研究，
中學生物學 2009年8期2009-02-03