無義
- Nature Biotechnology報道北京大學藥學院夏青教授團隊開創性應用tRNA-酶治療無義突變罕見病的進展
tRNA-酶治療無義突變罕見病的進展[Restoration of dystrophin expression in mice by suppressing a nonsense mutation through the incorporation of unnatural amino acids. Nat Biomed Eng， 2022, 6(2)： 195-206]。tRNA是一類小的非編碼 RNA，在蛋白質合成過程中充當氨基酸運輸載體的角色，負責將
北京大學學報（醫學版） 2022年2期2022-11-21
- 長鏈非編碼RNA POIR對多次傳代后牙周膜干細胞成骨分化功能的影響
不經任何處理)、無義序列轉染對照組(轉染sh-NC質粒)和lncRNA POIR下調組(轉染sh-lncRNA POIR質粒)。將sh-NC質粒、sh-lncRNA POIR質粒分別和Lipofectamine 2000轉染試劑(Invitrogen)混勻，室溫靜置20 min分別加入無義序列轉染對照組細胞和lncRNA POIR下調組細胞中，在37 ℃、5% CO2培養箱中培養48 h用于后續成骨分化相關研究，包括ALP染色、ALP活性、茜素紅染色和RT
山西醫科大學學報 2022年6期2022-08-04
- 凝血因子XI基因變異致下消化道出血病因分析
一個由FXI基因無義變異導致的遺傳性凝血因子XI缺陷癥患者行內鏡下直腸息肉摘除術后出現下消化道異常出血進行臨床資料和基因變異分析，探討FXI基因變異與治療后下消化道異常出血的關系。1 對象和方法1.1 研究對象 選擇2021年8月于溫州醫科大學附屬第一醫院消化內科收治的1例內鏡下直腸息肉摘除術后出現下消化道異常出血患者作為研究對象。調查患者及家系其他成員共3代5人，均無自發性出血傾向，家系遺傳圖譜見圖1。選取100名20～58歲的體檢健康者建立實驗室凝血指
溫州醫科大學學報 2022年4期2022-04-30
- AA野生種花生Ty1-copia類反轉座子RT基因的克隆與序列分析
中的19條發生了無義突變，A. duranensis（PI219823）要比A. duranensis（PI262133）的無義突變率高。（4）氨基酸序列間相似性為4.7%～100%，呈現高度異質性。（5）各家族中代表序列的蛋白質三級結構在整體構型上一致，但在螺旋結構數、折疊結構數、轉角數和氫鍵數上存在較大差別。（6）序列間保守基序總體一致，但也存在一定變異，呈現一定異質性;系統進化樹將68條序列分為10類，大部分序列都聚在A和B兩大類中。（7）另有部分A
廣西植物 2022年1期2022-03-17
- 干預HSF1影響MDR1的表達逆轉結直腸癌HCT-8細胞株耐藥的實驗分析
異性慢病毒序列、無義序列組慢病毒及轉染增強試劑，均由上海吉凱公司設計提供；HSF1、MDR1、Cyclin D1、MMP-2與BCL-2抗體，均購自美國Abcam公司；辣根過氧化物酶標記的羊抗兔多克隆IgG抗體II抗購自福州邁新公司；CCK-8購自日本同仁研究所；吉姆薩染液購自北京索萊寶公司；Transwell雙層細胞培養板購自美國Corning公司；Western blot實驗中凝膠試劑盒、RIPA細胞裂解液等試劑盒，均購自江蘇碧云天公司；RT-PCR實
臨床與實驗病理學雜志 2021年8期2021-09-22
- 精源性卵母細胞激活因子的相關機制研究進展
C2結構域的3個無義突變(p.I489F，p.S500L，p.R553P)和位于C端蛋白結構域外的一個無義突變（p.M578T）。所有突變都通過silico分析進行評估，大多數突變也進行了功能分析[38-48]，見表1。表1 PLCZ1突變文獻 cDNA改變 外顯子位點 蛋白質改變 結構域位置 突變類型 純合性PLCζ表達水平及位置Silico分析 功能性分析[31] c.736C>T 7 p.L246F X 無義突變 純合 表達降低位置改變 損傷 /[2
中國男科學雜志 2021年3期2021-08-05
- 基于網絡公開測序數據的K326煙草線粒體基因組RNA編輯位點的鑒定與分析
新的終止密碼子（無義突變）或導致終止密碼子丟失的位點共計62 個（表2）；40 個位點（占所有位點的1.0%）位于8 個RNA 基因（tRNA）（表1）；2 898 個位點位于基因間區，占所有位點的68.8%。在線粒體編碼的153 個蛋白編碼基因中，99 個基因（占所有蛋白編碼基因的64.7%）存在RNA 編輯位點；線粒體編碼的27 個RNA 基因中在8 個基因（占所有RNA 基因的29.6%）上發現了RNA 編輯位點。蛋白編碼基因ccmFN、mat-R、
煙草科技 2021年6期2021-06-24
- 針對《GLDC基因復合雜合突變致非經典型非酮性高甘氨酸血癥家系的臨床和遺傳學分析》一文讀者提出問題的反饋
突變體，突變一為無義突變（表達提前終止），突變二為錯義突變，在Western blot結果中不應該是大小相同的條帶。（2） 原文中多處有“c.1296C＞G（p.Ser419 STer）”寫法，其中STer是什么意思？是否正確？2 作者回答感謝讀者對我們文章的關注，并指出文章存在的不足之處。針對讀者提出的問題，我們已核實并做出如下回復?；卮穑?）：經讀者問題提醒，我們翻看了預實驗的凝膠電泳圖（圖1），發現考馬斯亮藍染色后，突變一泳道在紅色箭頭處有一蛋白表達
中國當代兒科雜志 2021年6期2021-06-16
- Duchenne 型肌營養不良癥治療研究進展
素、外顯子跳躍、無義突變通讀治療、Myostatin 抑制劑、上調Utrophin、CRISPR/Cas9 等，本文將對上述治療方法進行綜述。1 糖皮質激素糖皮質激素是目前唯一被循證醫學證實有效的藥物。它可以刺激成肌細胞增殖，抑制肌肉蛋白分解，進而改善肌肉的功能和力量[3]。與未經治療的患者比較，糖皮質激素的使用可使患者行走能力平均延長2～5 年[4]。目前指南[5]推薦的最佳劑量為潑尼松0.75 mg/（kg·d）或地夫可特0.9 mg/（kg·d）。但
中國醫藥導報 2021年30期2021-01-04
- Wiskott-Aldrich綜合征兒童WAS基因突變分析研究
類包括錯義突變、無義突變、拼接位點突變、缺失突變、插入突變和復合突變等[10]。國外資料報道的 WAS 基因突變中最多見錯義突變，其次是拼接位點突變、小的缺失突變及無義突變，而插入突變、大的缺失突變及復合突變較少見。而國內最常見的突變類型為缺失突變，其次為無義突變、錯義突變、剪接突變和插入突變。EVHl區突變占已報道WASP基因突變一半以上[11]?，F已明確WASP基因的6個突變熱點290C>N/29 l G>N(R86C/H/L)、168C>T(T45M
遼寧醫學雜志 2020年4期2020-10-27
- miR-133a介導Bcl-xl表達調節內皮細胞的凋亡
mimics)、無義序列(NC)、沉默無義序列(inhibitor NC, in NC)由上海吉瑪基因生物有限公司合成，脂質體Lipofectamine RNAiMAX Reagent購買于賽默飛世爾科技公司，RIPA蛋白裂解液購于上海雅酶生物科技有限公司，兔抗Bcl-xl及兔抗caspase3購于美國Cell Signaling Technology公司，鼠抗β-actin購于美國Proteintech生物公司。1.2 細胞培養首先纖連蛋白包被培養瓶(板
醫學研究生學報 2020年8期2020-08-14
- miR-152靶向IRS-1對結腸癌細胞增殖、遷徙及侵襲的影響
胞中,分別命名為無義轉染組和miR-152 siRNA組,不轉入任何載體的SW480細胞為對照組。轉染24 h將各組SW480細胞正常培養,待后續實驗使用。1.3 qRT-PCR法檢測SW480細胞中miR-152和IRS-1 mRNA表達將對照組、無義轉染組和miR-152 siRNA組SW480細胞培養24 h,收集細胞,使用TRIzol試劑提取總RNA,逆轉錄合成cDNA,采用qRT-PCR法檢測miR-152和IRS-1 mRNA表達水平,內參基因
山西醫科大學學報 2020年6期2020-07-14
- 1例復合雜合突變導致遺傳性凝血因子Ⅺ缺陷癥家系的基因分析
738G＞A雜合無義突變導致p.Trp228stop，第12號外顯子存在c.1325delT缺失突變導致p.L424CfsX8。其母親和外祖母存在p.Trp228stop突變雜合子，其父親和祖父存在p.L424CfsX8突變雜合子。詳見圖2、表2。圖2 （F11）基因第7和第12外顯子測序結果。2A：c.738G＞A 雜合無義突變；2B：c.738G 野生型；2C：c.1325delT缺失突變；2D：c.1325野生型。表2 先證者及家系成員基因分析結果3
浙江實用醫學 2020年1期2020-06-05
- NMD逃逸機制及其在疾病治療中的應用
京 100020無義介導的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay, NMD)是指在病理或正常生理情況下mRNA上出現了提前終止密碼子(premature termination codon, PTC)，從而導致mRNA降解。它是一種廣泛存在的mRNA質量監控機制。近年來，在多種疾病中發現某些PTC并未觸發NMD，這種現象被稱為NMD逃逸(NMD escape)，然而其確切機制尚不十分清楚。目前公認的兩個學說為：(1) PTC
遺傳 2020年4期2020-04-21
- Dubin-Johnson綜合征分子遺傳學研究進展
包括：錯義突變、無義突變、剪接突變、調節突變、刪除/缺失突變、插入突變、小插入-缺失突變、復雜重排突變，其中絕大多數是堿基置換突變導致的錯義突變和無義突變，見表1。表1 Dubin-Johnson綜合征編碼基因ABCC2突變類型續上表突變類型核苷酸改變突變位點蛋白質改變參考文獻錯義/無義c.298C>TExon.2p.R100*Shoda(2003)HepatolRes27:322Xiong(2015)Science347:1254806c.3732T>G
中國婦幼健康研究 2019年11期2019-12-06
- miR-145通過調控解聚素-金屬蛋白酶17對MCF-7乳腺癌細胞的影響
組（未行轉染）、無義序列組（轉染無意義miRNA）。細胞達到80%融合時，轉染過程嚴格按照脂質體Lipofectamine 2000 說明書進行，對照組（加入等體積PBS 緩沖液）、轉染組（空白培養基+Lipofectamine 2000+miR-145 mimics）、無義序列組（空白培養基+Lipofectamine 2000+NC-miRNA），轉染終濃度為50 nmol/L，轉染6 h，繼續培養。1.3 qPCR 檢測各組miR-145，ADAM1
醫學研究生學報 2019年11期2019-11-29
- 沉默miR-345聯合5-FU對胃癌MGC803細胞增殖能力及凋亡的影響
白對照組；B組：無義序列組；C組：反義miR-345組；D組：5-FU處理組；E組：反義miR-345+5-FU聯合組。未經處理的MGC803細胞為空白對照組；合成錯配寡核苷酸序列，利用Lipofectamine 2000脂質體將其轉染入MGC803細胞為轉染無義序列組；合成miR-345反義寡核苷酸序列，利用Lipofectamine 2000脂質體將其轉染入MGC803細胞，為反義miR-345組；40 μg/ml 5-FU單獨處理細胞為5-FU處理組
胃腸病學和肝病學雜志 2019年6期2019-06-21
- 無義突變與“遺傳補償效應”
馬志鵬，陳軍?無義突變與“遺傳補償效應”馬志鵬，陳軍浙江大學生命科學學院，生命系統穩態與保護教育部重點實驗室，杭州 310058“遺傳補償效應”(genetic compensation response, GCR)是近年來在斑馬魚()中最先描述的一個遺傳現象，是指當敲低某一個基因時有明顯的表型，但此基因的敲除遺傳突變體由于其他基因的上調反而沒有表型。這種基因敲低和敲除表型上的差異并非斑馬魚所獨有，在擬南芥()、小鼠()等模式生物中都觀察到此種現象。這種奇
遺傳 2019年5期2019-05-21
- miR-182靶向調控FOXO3a表達對膠質瘤細胞增殖和侵襲能力的影響
分別加入對照組、無義序列miR-182、miR-182 micmics已整合成功的脂質體，完成細胞轉染，繼續培養約48 h直至轉染成功后的細胞進入對數期。1.3 構建FOXO3a質粒使用pc DNA3作為空載體質粒，報告強化綠色熒光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)質粒載體，分別將野生型(亦稱無干擾型)FOXO3a 3′-非翻譯區(untranslated region, UTR)與突變型(亦稱過表達型
安徽醫科大學學報 2019年4期2019-05-10
- 更正：堿基編輯系統研究進展
中，對基因進行了無義突變，建立了杜氏肌營養不良的小鼠疾病模型”現更正為“Jin-Soo Kim實驗室率先利用ABE7.10對小鼠基因引入了錯義突變，并將ABE7.10包裹到雙反式剪接的AAV病毒系統中，遞送到小鼠模型中進行無義突變的較正，成功治療了杜氏肌營養不良的小鼠疾病表型?！庇纱私o讀者帶來的不便，作者深表歉意！DOI: 10.16288/j.yczz.19-316
遺傳 2019年10期2019-03-02
- CPEB4對腦膠質瘤細胞增殖、遷移的影響
分3組，對照組、無義siRNA組及CPEB4 siRNA組。以5×105mL-1將U87細胞接種于6孔板，待細胞融合度達到75%時，無義siRNA組及CPEB4 siRNA組參照Lipofectamine2000轉染試劑盒(美國 Invitrogen公司)說明操作，分別轉染無義siRNA和CPEB4 siRNA；對照組不轉染。每組設置6個復孔。CPEB4 siRNA及無義siRNA均由上海吉瑪公司設計并合成，正義鏈序列分別為5’-GCAAAGCAATACT
鄭州大學學報（醫學版） 2018年5期2018-10-10
- 沉默miR-345表達聯合氟尿嘧啶對胃癌細胞MGC803增殖的影響
GUCC-3’，無義序列5’-UCUACUCUUAGGAGGUUGUUGATGCA-3’。將細胞接種于培養板，LipofectamineTM2000轉染試劑轉染，在5 min內同稀釋的寡核苷酸序列混合，將復合物加入到細胞培養板中繼續培養48 h。3.miR-345表達水平的實時定量PCR檢測miR-345反向引物5’-TATGCTGCTCGGGACCTGATCCTCA-3’，正向引物5’-GTCGTATCCAGTGCA-GGGTCCGAGG-3’，內參U6
新醫學 2018年7期2018-07-23
- 一例散發遺傳性對稱性色素異常癥ADAR1基因新突變
成編碼氨基酸發生無義突變，最終導致第388位氨基酸形成終止密碼子，即P.E388X，由此產生的蛋白質將缺失839位氨基酸。而臨床表型正常的患者的父母未發現突變，表明該突變是一個新生突變(de novo mutation)，并且本研究檢測了100名健康對照均未出現上述突變。以上研究結果證明筆者發現的無義突變(c.1162G>T)是該患者的致病突變而不是單核苷酸多態性。圖2 a:正常人ADAR1基因部分序列圖；b:患者雜合無義突變，c．1162G>T，箭頭所示
中國麻風皮膚病雜志 2018年6期2018-07-02
- FOXQ1-siRNA對甲狀腺乳頭癌TPC-1細胞侵襲遷移的影響及其機制
1-siRNA、無義序列RNA購于蘇州吉瑪基因有限公司，RNA提取試劑盒購于日本TaKaRa公司、反轉錄試劑盒購于北京GenStar公司，SYBR Green qPCR Master Mix、FOXQ1引物及LipofectamineTM2000均購于美國 Invitrogen公司，兔抗人FOXQ1多克隆抗體購于英國Abcam公司，兔抗人MMP7、MMP9、AKT及p-AKT(Ser473)均購于美國CST公司，HR標記的山羊抗兔二抗、GAPDH抗體、We
山東醫藥 2018年13期2018-05-25
- 轉染反義微小RNA?155對人皮膚鱗狀細胞癌細胞株A431生長的影響
UAA?3′）、無義對照序列miRNA?155（5′?CAGUACUUUUGUGUAGUACA A?3′）、Hairpin?itTMmiRNA熒光定量PCR試劑盒、U6核內小RNA（snRNA）熒光定量校正試劑盒（上海吉瑪制藥技術有限公司）。酶聯免疫檢測儀、FACScalibur流式細胞儀（美國BD公司），插入式細胞培養皿（Transwell）（美國康寧公司）。二、細胞培養與轉染用含10%胎牛血清的DMEM培養基于37℃、5%CO2細胞培養箱中培養A431
中華皮膚科雜志 2018年3期2018-04-09
- 沉默ANK2基因表達對胃癌細胞增殖、周期以及轉移能力的影響
為3組：對照組、無義組、siRNA-ANK2組。轉染前2 h，更換為無胎牛血清的培養基，將4 μg siRNA ANK2或siRNA 無義序列與250 μl OPTI-MEM培養基混合均勻，10 μl Lipofectamine 2000與250 μl OPTI-MEM培養基混勻，將稀釋的DNA混合液加入到Lipofectamine 2000混合液中，室溫靜置20 min，然后將混合液轉移至6孔板中，混勻，轉染4～6 h，將培養基更換為完全培養基，繼續培養
胃腸病學和肝病學雜志 2018年3期2018-03-20
- microRNA-34a對人腦膠質瘤細胞生物學特性的影響
分為空白對照組、無義序列轉染組及microRNA-34a轉染組，檢測microRNA-34a對人腦膠質瘤細胞系U87增殖、凋亡、遷移、侵襲能力的影響。結果膠質瘤組織microRNA-34a相對表達量為(0.53±0.48)，顯著低于正常腦組織的(1.38±0.25)，差異有統計學意義(P＜0.05)。不同惡化程度膠質瘤組織microRNA-34a相對表達量差異有統計學意義(P＜0.05)。microRNA-34a轉染組轉染后48 h細胞生長抑制率、轉染后細
海南醫學 2017年23期2018-01-03
- 反義缺氧誘導因子-1α對人膀胱癌細胞生長的影響①
1α轉染組，轉染無義序列組和空白對照組。②RNA提取及Western blot檢測:按照Trizol試劑盒說明書提取轉染細胞總RNA，采用Western blot檢測HIF-1α表達量。③檢測T24細胞增殖能力，細胞周期和凋亡變化 在細胞被轉染72 h后，用MTT比色法測定細胞增殖率，FCM鑒定細胞凋亡率和細胞周期。2 結果2.1HIF-1α在3組細胞中的表達 Western blot法檢測結果(見圖1)顯示，AS-HIF-1α轉染組的HIF-1α表達明顯
中國免疫學雜志 2017年10期2017-10-24
- 無義mRNA降解途徑的機制與進化
030006)無義mRNA降解途徑的機制與進化柴寶峰，王美，石文鑫，柴楊麗，呂佳(山西大學 黃土高原研究所，山西 太原 030006)含有無義突變的mRNA在細胞中被無義介導的mRNA降解(nonsense-mediated mRNA decay,NMD)途徑選擇性降解,同時該途徑還能調控細胞中一些生理性RNA的豐度。NMD途徑的核心是含有無義突變的mRNA的識別和降解機制,其中關鍵因子上游移碼蛋白(up-frameshift,UPF)和生殖器形態效應抑
山西大學學報（自然科學版） 2017年3期2017-09-07
- 沉默缺氧誘導因子-2α對乳腺癌細胞化療敏感性的影響
組、MCF-7/無義siRNA組，細胞轉染9 h后，更換新鮮完全培養基。1.2.2 RT-PCR法檢測轉染后各組細胞中HIF-2α mRNA的表達 RNA提取按照Trizol RNA提取試劑盒說明書進行，cDNA第一條鏈體外逆轉錄合成，以cDNA為模板，擴增HIF-2α mRNA。引物序列HIF-2α上游：5′-TGAAAACGAGTCCGAAGCC-3′，下游：5′-GTGGCTGACTTGAGGTTGA-3′；GAPDH上游：5′-ATTCATCTCT
臨床與實驗病理學雜志 2017年5期2017-06-24
- 長鏈非編碼RNA SPRY4-IT1 對結直腸癌細胞HT-29 增殖凋亡的影響及機制
轉細胞株，并設立無義轉染組和空白對照組；qRT-PCR檢測各組HT-29細胞中SPRY4-IT1 mRNA的表達量；CCK-8法檢測細胞增殖活力；克隆試驗檢測細胞的克隆形成率；流式細胞術檢測細胞凋亡率和細胞周期。Western blotting法檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達量。結果 LncRNA SPRY4-IT1在結直腸細胞株(HT-29、HCT-116、SW-480、SW-620、Caco-2)相對FHC的表達增高，以HT-29細胞株中的表達最
山東醫藥 2017年13期2017-05-04
- 選擇性剪接與無義介導的mRNA降解機制研究進展＊
3］。AS 還與無義介導的 mRNA 降解（nonsense mediated mRNA decay，NMD）機制相偶聯，當某種基因表達異常升高時，通過AS產生能被NMD降解的mRNA剪接異構體而下調該基因表達，使其維持在正常范圍。已知AS和NMD與人類多種遺傳病和癌癥發生密切相關［4，5］。 現就 AS和 NMD 作用機制做一簡要綜述。1 選擇性剪接（AS）人類基因由編碼蛋白質的外顯子（exon）和不編碼的內含子（intron）共同構成?；虺跏嫁D錄產物
實用醫藥雜志 2017年11期2017-04-04
- 多烯紫杉醇聯合反義miR-21對人胰腺癌細胞增殖和凋亡的影響
分為空白對照組、無義序列組、DTX組、AS-miR-21組、DTX+AS-miR-21組。AS-miR-21組、DTX+AS-miR-21組轉染AS-miR-21，無義序列組轉染Lipofectamine2000，均轉染24 h；DTX+AS-miR-21組轉染后予15 μmol/L的DTX作用48 h；空白對照組未行任何處理，DTX組加入15 μmol/L的DTX作用48 h。收集各組細胞，RT-PCR法檢測miR-21的相對表達量，克隆形成實驗檢測細胞
山東醫藥 2017年8期2017-03-13
- ADAM17-shRNA對人乳腺癌MCF-7細胞增殖的影響及機制
CF-7細胞分為無義序列組、對照組、轉染組。針對ADAM17基因設計合成4個特異性ADAM17-shRNA(ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-shRNA-1134、ADAM17-shRNA-297)，采用電穿孔法轉染MCF-7細胞：無義序列組轉染無義序列ADAM17-shNC，轉染組分別轉染ADAM17-shRNA序列ADAM17-shRNA-1219、ADAM17-shRNA-1508、ADAM17-s
山東醫藥 2017年4期2017-02-23
- ADAM17-shRNA在缺氧條件下對人乳腺癌細胞MCF-7增殖的影響*
磷酸鹽緩沖液)、無義序列組(轉染無義序列ADAM17-shRNA)和shRNA轉染組(轉染ADAM17-shRNA，選擇沉默ADAM17基因效率最高的shRNA用于后續試驗)。分別采用實時熒光定量PCR、iCELLigence、流式細胞儀檢測細胞ADAM17mRNA的表達水平、細胞增殖活性和細胞周期變化。結果 4個shRNA轉染組對MCF-7細胞的ADAM17基因表達均有沉默作用，與對照組及無義序列組相比，差異具有統計學意義(PRNA；聚合酶鏈反應；缺氧；
重慶醫學 2017年1期2017-02-10
- Hailey-Hailey病四個家系的ATP2C1基因突變分析
delC）及1個無義突變（c.2416C＞T），其中2個移碼突變為首次報道。這些突變的發現有助于HHD的診斷，并豐富了HHD相關ATP2C1突變數據庫。Hailey-Hailey??；突變分析；ATP2C1基因；DNA測序梅愛華Hailey-Hailey?。℉ailey-Hailey disease，HHD；OMIM 169600），又稱家族性慢性良性天皰瘡，是一種常染色體顯性遺傳性皮膚病[1,2]。其致病基因ATP2C1編碼人類高爾基體分泌途徑Ca2+/M
實用皮膚病學雜志 2016年5期2016-11-30
- 長鏈非編碼RNA HOTAIR影響人舌鱗癌細胞Tb3.1增殖與凋亡的體內外研究
HOTAIR組、無義序列組和空白對照組。前2組分別用siHOTAIR和無義序列轉染舌鱗癌細胞，空白對照組細胞不做任何處理。實時定量PCR檢測HOTAIR的表達水平；四甲基偶氮唑藍（MTT）法檢測Tb3.1細胞增殖；Western blot檢測B細胞淋巴瘤2（Bcl-2）、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、BAX的表達；流式細胞儀檢測細胞凋亡；平板克隆形成實驗檢測細胞增殖情況；并行細胞衰老檢測。動物實驗建立Tb3.1裸鼠
天津醫藥 2016年10期2016-11-12
- 星火（外一首）
，時間最是無情和無義，滅了心底最暖的星火，丟了魂魄的最重。面朝著大海，我站成了大海，你在我里面浮沉，回憶是一條狂犬，追咬了許多年，卻還沒掌握進退分寸。我想我們該遠去了，遠離這骯臟的生活，遠離這霓虹的閃爍，你我的軀體已經貧窮，你我的靈魂已經空虛，去尋找你的星火燎原，去尋找我的星火燎原。一不小心就失去有時候，有些人不說再見已離開，有時候，有些事不用開口也明白，有時候，有些路不走也會變長，那些人，那些事，那些路，已成過往?？偸峭臻g發呆。轉身，陌路那些說好不分
參花（上） 2016年8期2016-08-23
- Waardenburg綜合征Ⅳ型患兒SOX10基因新突變研究
OX10基因所有無義突變進行文獻回顧和總結。方法收集一個WS4患兒的詳細臨床資料，簽署知情同意書后獲取血樣，對包括SOX10、EDNRB、EDN3在內的172個先天性巨結腸及綜合征相關基因進行二代測序，并用聚合酶鏈反應針對可疑致病突變進行擴增及Sanger測序驗證，應用GeneTool軟件及生物信息學網站的信息分析數據。結果發現患兒SOX10基因第4外顯子存在一雜合無義突變（c.838G＞T，p.E280X），父母均表現正常且未發現有該突變。結論發現一新的
中華耳科學雜志 2016年2期2016-06-30
- 一個遺傳性凝血因子Ⅺ缺陷癥家系的基因分析
16642T雜合無義突變，導致編碼第263位氨基酸谷氨酰胺提前出現終止密碼（Gln263stop）。結論：FⅪ基因第8號外顯子C16642T雜合無義突變是導致該遺傳性FⅪ缺陷癥家系FⅪ水平降低的主要原因。凝血因子Ⅺ；家系；雜合；無義突變遺傳性凝血因子XI（FXI）缺陷癥為常染色體隱性遺傳性疾病，曾被稱為血友病C，患者出血癥狀輕重不定，FXI水平高低與出血程度并不成正比，很少有自發性出血[1]。近年來的報道認為，該缺陷癥的發生主要與FXI基因的突變有關[2-
溫州醫科大學學報 2015年5期2015-12-27
- 微小 RNA-383 對骨肉瘤細胞生物學特性的影響
況：空白對照組、無義序列組和實驗組細胞的凋亡率分別為 ( 8.56±1.45 ) %、( 12.6l±1.37 ) %、( 33.20±2.59 ) %，差異有統計學意義 ( P＜0.05 )；細胞遷移實驗：空白對照組、無義序列組和實驗組分別為( 82±5 ) 個、( 68±3 ) 個和 ( 45±7 ) 個，差異有統計學意義 ( P＜0.05 )；細胞遷移與侵襲實驗：空白對照組、無義序列組和實驗組細胞穿膜數分別為 ( 82±5 ) 個、( 68±3 )
中國骨與關節雜志 2015年9期2015-11-30
- C-fos對體外培養仔豬睪丸間質細胞睪酮分泌的影響
胞睪酮的產生，而無義tat ODNs由于與C-fos無同源互補序列，未觀察到類似的作用[4]。Schultz等研究證實，C-fos參與調控生精上皮更新期間生精細胞增殖、分化活動[5]。從文獻中可以看出，國內外的學者對C-fos的早期研究主要集中于體外培養的細胞，近年來轉向體內，并且主要集中在人和鼠睪丸間質細胞睪酮分泌的量和對睪酮合成途徑各關鍵酶的影響上，很少涉及到C-fos對豬及C-fos對睪丸間質細胞睪酮分泌的影響。作者以榮昌仔豬為材料，通過反義核酸技術
中國獸醫雜志 2015年8期2015-08-08
- 荀巨伯①探病友
賊相謂曰：“我輩無義⑩之人，而入有義之國?！彼彀嘬姸€。一郡并獲全。（選自劉義慶《世說新語》）[注解]①荀巨伯：東漢桓帝時人，生平不詳。②值：適逢。③賊：指入侵的軍隊。④郡：這里指城。⑤相視：看望你。⑥?。簱p害，毀壞。⑦一：整個。⑧男子：這里是表示輕蔑的稱呼。⑨獨止：一個人留下。⑩無義：不懂道義。漫讀引思文章采用對話描寫的方法來表現荀巨伯不忍丟下有病的朋友獨自避難，而且愿“以我身代友人命”，這種把情義看得比生命還重的精神實在是難能可貴。做人只有像荀巨伯那樣
作文周刊(中考版) 2014年45期2015-07-27
- 杜預等注《左傳》“無寧，寧也”商榷
“無”為語助詞，無義，“無寧”則等同于“寧”，釋為“寧愿”、“寧可”等。在考察了“無寧”、“毋寧”、“不寧”、“無亦”、“不亦”、“無乃”、“毋乃”等一系列詞語之后，我們認為這種注解似可商榷，將“無”看作語助詞多有不當。本文將從有語氣詞標記的反問句、無語氣詞標記的反問句與陳述句三個維度展開，句法與語義相結合，對“無寧”諸詞在不同句式中的表現分別予以考察。一、與語氣詞“乎”同現構成反問句“無寧”等詞的典型用法之一便是用在反問句中，且常與句末語氣詞“乎”（或其
語文學刊 2015年16期2015-05-27
- MACC1基因沉默對肺癌細胞促血管生成的影響
RNA 1～3及無義siRNA由廣州銳博生物有限公司合成，Platinum?SYBR?Green qPCR試劑盒購自Invitrogen公司。1.2方法1.2.1肺腺癌細胞的培養及傳代 復蘇A549，XWLC-05，GLC，SPC-A-1，YTMLC細胞株，加入含10% FBS的1640培養基，置于37℃、5%CO2培養箱中培養。每2～3 d進行常規換液傳代。1.2.2RT-qPCR 法檢測細胞MACC1 mRNA的表達 采用Trizol 一步法提取各株細
中國老年學雜志 2014年14期2014-09-12
- 《氓》注釋辯正一則
注釋：動詞詞頭，無義。筆者認為此條注釋欠妥。筆者廣泛查閱字典、詞典，對“載”的注釋各異：《簡明古漢語字典》（四川人民出版社，1997年版）注：乃；且。一說是動詞詞頭?！对姟ばl風·氓》：“既見復關，載笑載言?！薄豆沤駶h語詞典》（商務印書館，2000年版）注：又，且?！纠枯d馳載驅，歸唁衛侯。（《詩·鄘風·載馳》）《古代漢語詞典》（商務印書館，2000年版）注：助詞。起加強語氣作用。多見于《詩經》?！对娊洝ば⊙拧ぽ驾颊咻罚骸皻鴼鴹钪?，載沉載浮?！比缛艚鉃椤皠?/div>
中學語文 2014年15期2014-08-15
- 腦膠質瘤中miR-7與EGFR/PI3K信號通路相關基因蛋白表達的關系
僅加入脂質體;②無義序列組，加入無義序列和脂質體;③miR-7轉染組:miR-7序列為5'-UUGUUUUAGUGAUCAAGAAGGU-3'。質粒轉染:細胞生長至60% ～70%匯合時，降低血清濃度至5%，然后將1 μg的質粒與100 μL的LipoVecTM混合20 min后加入培養基中，4 h后換成含20%血清的培養基繼續培養。轉染48 h后，用含200 ng/L G418的培養基進行篩選，每3 d更換選擇培養液1次。14 d后細胞集落形成，未轉染組山東醫藥 2014年27期2014-06-14
- 淺談古漢語偏義復音詞
”指晉國，“家”無義只起陪襯作用。例2：“國家”無偏義，“國”指天子統治的地方，“家”指諸侯統治的地方，作為單音詞連用的“國家”均恢復其固有的詞匯意義。有時“國家”也可分用為“天子建國”、“諸侯立家”。例3：“緩急”聯系下文當偏指“急”就是急難的意思，“緩”無義起陪襯作用，是偏義復詞。例4：“緩急”無偏義，“緩”指“緩和”，“急”指“急迫”，是單音詞連用。例5：“衣裳”聯系下文“采采衣服”偏指“衣”即“衣服”，“裳”無義起陪襯作用，是偏義復詞。特點二：陪襯教育教學論壇 2014年17期2014-05-05
- 不同濃度藥物PTC124和G418對HERG通道無義突變體的作用*
8對HERG通道無義突變體的作用*于海云，姚艷，張銀輝，龔菁，黃健，浦介麟目的： 通過對HERG基因無義突變體應用不同劑量PTC124和G418來觀察其通道功能的恢復情況，并探討藥物的作用機制。方法： 制備HERG基因R1014X突變體，將野生型（WT）HERG及R1014X分別瞬時轉染至HEK293細胞，轉染24 h后將其置入含不同濃度的PTC124和G418的培養液中孵育24 h。逆轉錄聚合酶鏈反應法檢測各組細胞HERG信使核糖核酸（mRNA）的表達，中國循環雜志 2014年6期2014-03-03
- 早熟終止密碼子通讀治療遺傳性癌癥綜合征的研究進展
對基因的影響可分無義突變(nonsense mutation)、錯義突變(missense mutation)和同義突變(same sense mutation)。同義突變是指堿基置換后，雖然每個密碼子變成了另一個密碼子，但改變前、后密碼子所編碼的氨基酸不變，故實際上不會發生突變效應。錯義突變是指編碼某種氨基酸的密碼子經堿基替換以后，變成編碼另一種氨基酸的密碼子，從而使多肽鏈的氨基酸種類和序列發生改變，使多肽鏈喪失原有功能。無義突變是指由于某個堿基的改變，腫瘤預防與治療 2014年2期2014-01-21
- miR-155反義寡核苷酸轉染對甲狀腺癌細胞遷移、侵襲和MMP-13表達的影響
TTAA-3';無義寡核苷酸(oligodeoxyribonucleotides，ODN)序列:5'-ATCTCATACTACACTTGAACACT-3'，依據轉染試劑說明書操作，加入等體積PBS以建立空白對照組。1.3 實時熒光定量PCR法檢測miR-155 mRNA的表達抽提細胞總RNA并精制，反轉錄為cDNA。定量 PCR(miR-155)上游引物:5'-CGCGCTTAATGCTAATCGTGA-3';下游引物:5'-GTGCAGGGTCCGAGG江蘇大學學報（醫學版） 2013年6期2013-11-22
- miR-155反義寡核苷酸轉染對人大腸癌Lovo細胞侵襲的影響
R-155)組、無義寡脫氧核苷酸(ODN)組和對照組。測定熒光素酶活性驗證3組細胞中miR-155的表達，采用Matrigel基質生長試驗檢測細胞生長情況，以Transwell方法檢測細胞的侵襲力，結果 與對照組和無義ODN組比較，轉染AS-miR-155組Lovo細胞miR-2l表達水平降低;Matrigel基質生長試驗顯示，轉染AS-miR-155組Lovo細胞體外培養克隆平均直徑較小，Transwell細胞侵襲試驗顯示轉染AS-miR-155組穿膜細中國實用醫藥 2012年34期2012-10-15
- 自然法爾與晚年親鸞的精神救贖——《自然法爾事》文本的重釋
戒的詮釋——“以無義為本義”《自然法爾事》雖只字未提及他力,但文中處處不乏這一理論的體現。而作為自然法爾結論的“以無義為本義”,不僅以他力為理論依據,同時其詮釋破戒的意圖也十分明顯?！笆脑杆轮?不靠行者之力,此法德故謂之使然。人之初勿須自力之行,凡事應循‘以無義為本義’。彌陀佛之誓愿、本與行者之力不符。若依南無阿彌陀佛,則勿須行者之行,無論行者善惡。此所謂自然?！盵4]73據法爾的道理,行者應不靠自力。因而親鸞得出了遵循“以無義為本義”的結論。寺田彌外國問題研究 2010年1期2010-08-15
- 試譯小倉百人一首(42)
。大意:為了無情無義的你，我整夜思慮不能成眠。長夜漫漫，遲遲不見天明。這時連那門間的縫隙都讓人感到無義無情。在這首和歌中，作者站在女性的角度，描寫了她們在長夜中思念薄情男子而輾轉難眠的情境。其中“連那門間的縫隙都讓人感到無義無情”一句的修辭技巧極具新意。女子在想:不光是你無情，看起來連老天爺都在跟我作對，遲遲不肯天明!漢譯:長夜漫漫漸入深，輾轉反側思紛紛。望門徒盼天破曉，負義豈止薄情人!東北亞外語研究 2010年6期2010-04-24
- 關于新教材語文第三冊古文的兩處注解
”字只作為陪襯，無義?！赌印罚骸敖裼幸蝗巳雸@圃，竊其桃李?！币馑际牵含F在有一個人進入了園中?！皥@”是種樹的地方，“圃”是種菜的地方。按句中應為種樹的地方，所以義偏“園”，“圃”作陪襯，無義。第二、聯系下文?！捌シ蛑兄赜谏琊⒁病笔恰耙嘁悦魉郎蟆敝械摹按蟆钡倪M一步解釋。而且課本對這句話的注解是“匹夫一死，關系國家興亡，非常重大”。只說“死”的意義，并未說生的意義。因此，只有把“死生”看作偏義詞，偏在“死”，才能與下文保持一致。第三、《五人墓碑記》所記的現代語文(教學研究) 2006年11期2006-01-30
- 腦膠質瘤中miR-7與EGFR/PI3K信號通路相關基因蛋白表達的關系