乳腺癌患者血清VEGF和P53的表達及臨床病理意義

韓桂蘭 李偉 尚培中 張華東

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，嚴重的影響了女性的生活質量，同時也造成了一定程度的社會經濟問題。因而，早期診斷、早期治療成為臨床和基礎研究的重點。如今，已有多種腫瘤標志物用于乳腺癌檢測的研究，如 CA-742、CEA、CA153、CA199 等［1，2］，但特異性和敏感性不高。本研究通過檢測乳腺癌患者血清中VEGF、P53抗體表達水平，探討兩者在乳腺癌診療及預后判斷中的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集尚義縣醫院乳腺癌70例，乳腺腺病組織標本45例，乳腺癌患者年齡22～75歲，平均47歲，術前均未接受放化療及激素治療。乳腺癌組織中腫瘤直徑≤2 cm者9例，＞2 cm者61例;局部腋窩淋巴結轉移陰性21例，陽性49例。組織學分級：Ⅰ級15例，Ⅱ級35例，Ⅲ級20例。孕激素受體(PR)陽性35例，陰性35例;雌激素受體(ER)陽性30例，陰性40例;人表皮生長因子受體-2(HER-2)陽性32例，陰性38例。45例乳腺腺病患者年齡18～48歲，平均32歲。所有患者均無妊娠、感染、肝腎功能不全、代謝性疾病和心腦血管疾病等并發癥。

1.2 樣品的制備 取受試對象清晨空腹靜脈血2.0 ml，靜置后分離出清亮血清，置潔凈試管中，在-70℃低溫保存待測。分離時采用3 000 r/min，離心15 min。所有標本采用深圳晶美生物公司提供的VEGF ELISA試劑盒和奧地利Bender公司提供的P53 ELISA試劑盒。操作步驟嚴格按照說明書進行，采用Bio-RAD680酶標儀進行比色定量分析。

1.3 結果判定 血清VEGF和P53抗體濃度的95%醫學參考值范圍分別為 ＜78.7 pg/ml和 ＜0.47 U/ml［3］，據此，本實驗把血清VEGF＞78.7 pg/ml的病例定為陽性，反之為陰性;血清P53＞0.47 U/ml的病例定為陽性，反之為陰性。

1.4 統計學分析應用SPSS17.0統計軟件，計量資料以±s表示，采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組患者血清VEGF和P53含量比較 乳腺腺病組患者血清VEGF、P53含量明顯低于乳腺癌組，差異有統計學意義(P ＜0.01)。見表1。

表1 2組患者血清VEGF、P53含量比較±s

表1 2組患者血清VEGF、P53含量比較±s

P值 ＜0.01 ＜0.01

2.2 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗體與臨床病理因素的關系 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗體的表達與年齡、腫瘤直徑、組織學分級及HER-2的狀態差異無統計學意義(P＞0.05)，而與患者淋巴結轉移、ER及PR差異有統計學意義(P＜0.01)。見表2。

表2 乳腺癌患者血清VEGF和P53抗體與臨床病理因素的關系例(%)

3 討論

VEGF主要由癌細胞產生，在腫瘤的生長、轉移中起著重要作用，是目前公認的最關鍵的促血管形成因子。不僅如此，它還能上調纖溶酶系統的表達，誘導內皮細胞產生間質膠原酶，蛋白水解酶和組織因子等，這更有利于腫瘤細胞脫落進入脈管或向鄰近組織擴散，為腫瘤的浸潤、轉移創造條件［4］。本研究結果顯示，血清VEGF在乳腺腺病中的表達明顯低于乳腺癌中的表達，表明在惡性病變中VEGF呈過表達，一定程度上反應了病情的狀態。與李菊梅等［5］研究結果相同。通過分析VEGF與乳腺癌臨床病理因素的關系發現，血清VEGF的水平與患者年齡、腫瘤直徑、組織學分級及HER-2的狀態無關，而與患者淋巴結轉移、ER及PR有關。這進一步表明，受VEGF刺激生成的血管可以滿足腫瘤生長所需的營養，加強了腫瘤細胞遠處轉移的能力。有資料表明，VEGF是一種性激素反應因子，異位內膜中VEGF與ER均呈正相關，提示異位內膜中VEGF可能與ER存在相互促進的依存關系［6］。但在乳腺癌中VEGF與ER、PR之間的具體調節及誘導機制還有待進一步研究。

P53基因定位于人染色體17P13.1，是一個腫瘤抑制基因，具有阻止不正常細胞增殖和誘導細胞凋亡的作用。然而，突變的P53基因不僅喪失了其抑癌的功能，而且還獲得了致癌性。研究發現P53抗體出現與P53蛋白異常以及P53基因突變有明顯相關性，因而可以相對簡單地由血清中P53抗體的狀態推測機體有無P53基因突變［7，8］。本研究結果表明，血清P53在乳腺腺病中的表達低于乳腺癌中的表達，顯示出癌癥患者血清中有高水平突變的P53，其水平越高越能表明患者的預后。在臨床病理因素中，血清P53的水平與患者淋巴結轉移、ER及PR有關，而與其他因素無關。有文獻報道，突變的P53基因增強了蛋白激酶C對VEGF表達的誘導，兩者呈顯著的正相關，其相關性亦有非常顯著的意義，從而說明VEGF的表達可能受P53調控［9］。但VEGF不僅是促血管形成因子，而且又是性激素反應因子，其這兩項功能也許使P53與ER、PR之間有某種聯系。文獻顯示，乳腺癌患者血循環中P53癌基因蛋白含量與癌組織ER、PR表達存在負相關，同時認為P53陽性腫瘤對環磷酰胺、甲氨喋呤、氟尿嘧啶聯合化療有一定抵抗性，對含蒽環類藥的聯合化療卻敏感［10］。據此可知，P53不僅與乳腺癌患者的預后有關，還可指導臨床治療方案的選擇。

綜上所述，血清VEGF、P53在乳腺癌患者中呈高表達，且與患者淋巴結轉移、ER及PR有關，因而，檢測兩者在一定程度上能反映患者的病情狀況，除此之外，還能為臨床的治療及方案的選擇提供有價值的幫助。

1 龍志華.血清CA72-4檢測在乳腺癌診斷中的臨床應用.北方藥學，2011，8：67-68.

2 龔春芳.血清CA125、CA199、CEA及VEGF聯合檢測在卵巢癌診斷中的意義研究.中國當代醫藥，2011，18：35-36.

3 唐懷民，黃根池.血清VEGF和p53抗體與非小細胞肺癌的相關性研究.實用心腦肺血管病雜志，2011，19：1469-1470.

4 宋亞輝，劉青云，張林.VEGF和p53蛋白在宮頸癌中的表達.現代生物醫學進展，2010，10：313-315.

5 李菊梅，韓建軍，郭梅艷.VEGF和TNF-α在乳腺癌中的表達及臨床意義.河北醫藥，2009，31：2377-2378.

6 陳瓊華，曲軍英，邱娜璇，等.VEGF、ER、PR在異位和在位子宮內膜中的表達.廈門大學學報(自然科學版)，2005，44：870-873.

7 Chang SC，Lin JK，Liang WY.Genetic alteration of P53，but not overexpression of intrtumoral P53 protein，or serum P53 antibody is a prognosis factor insporadic colorectal adenocarcinoma.International Journal of Oncology，2005，26：65-75.

8 Luts W，Nowakowska-Swirta E.Gene P53 mutation，proteinP53，and anti-P53 antibodies as biomarkers of cancers process.Int JOccup Med Evioren Health，2002，15：209-218.

9 朱穎蔚，成金羅，錢科卿，等.胃癌患者血清VEGF、P53的表達及意義.現代腫瘤醫學，2007，1：375-376.

10 瞿峰.乳腺癌組織中VEGF的表達與CD44v6、MMP-2的相關性研究.河北醫藥，2012，34：808-810.