肉羊胚胎移植的要點

（黑龍江省訥河市青色草原種畜場 161300）

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胚胎移植是指通過同期發情和超數排卵技術將優良肉羊品種的胚胎，即約7日齡的受精卵，采取人工方法將其移植到普通品種母羊的子宮內繼續發育，形成胎兒，直至生產的過程。目前，我國通過采用該技術對現有的生產性能較低品種的肉羊、山羊和綿羊進行改良，對羊群整體生產性能的提高具有非常重要的意義。

1 供、受體母羊

供體選擇。供體母羊具有優質的遺傳基因，即具備遺傳優勢，一般選擇高生產性能和經濟價值的母羊作為供體。供體的繁殖能力良好，即繁殖史較好，且容易配種，容易成功受孕；繁殖史上不存在遺傳性缺陷；分娩過程順利，未出現胎衣不下或難產的現象；未患過繁殖性疾病，生殖器官發育正常；發情表現明顯，性周期正常。另外，選擇供體母羊還要考慮年齡、營養需要、發情周期對超數排卵的反應、繁殖力以及自然排卵是否正常等方面，由此進一步選擇優質供體，然后建立嚴格、規范的供體檔案，同時要根據供體在胚胎移植過程中的具體情況重新評價或淘汰個別供體。供體母羊健康無病，體質健壯，且營養狀況良好。具體是選擇經產母羊作為供體，但必須是產后超過60天的母羊，且其生殖系統已經恢復正常，有正常的發情周期。供體母羊體況良好，年齡為1.5～7周歲，膘情中等。選擇的供體羊必須加強飼養管理，同時制定完善的超數排卵計劃。

受體選擇。受體母羊一般選擇本地品種或者非優良品種，但必須確保其健康狀態和繁殖性能良好，體型在中上等。如養殖場飼養的母羊數量很多，也可以選擇與供體發情時間相近或相同的自然發情母羊，一般二者間發情時間相差要少于24小時。但一般情況下常無法找到非常合適的母羊作為受體，因此多數情況下需要對供體和受體采取同期發情。

2 同期發情

供體母羊和受體母羊的發情時間要基本保持一致，且發情時間越接近其受胎率越高，從而為受精卵移植奠定良好基礎。據報道，移植肉羊受精卵時，供體和受體母羊同期發情相差小于24小時，其受胎率可高于70%，而相差48小時則在50%以下。近年來，一般給供體和受體母羊分別肌肉注射15 mg前列腺素一次，則使二者實現發情同期化。

3 供體羊的超數排卵和配種

超數排卵。促卵泡素（FSH）+多聚半乳糖醛酸酶（PG）法，即母羊發情的第12天或第13天進行皮下注射FSH，并呈遞減劑量持續注射3天，每天2次，每次間隔12小時，第五次注射FSH的同時注射PG。母羊注射完FSH后，在每天上午和下午開始進行試情超數排卵處理，待其發情后每只母羊要馬上皮下或靜脈注射100～150 IU黃體刺激素。孕馬血清促性腺激素（PMSG）法，同多次注射FSH法相比，該法操作簡單，動物刺激性小，只要注射1次，價格相對比較便宜，缺點是PMSG的半衰期較長，一般在21小時左右，因此超數排卵后血液中殘留的PMSG往往會造成第二次排卵波出現。聚乙烯吡咯烷酮（PVP）+FSH法，即將適量的FSH溶于適量的15%PVP中再進行一次肌肉注射，可使其超數排卵。

配種。供體母羊進行超數排卵處理后，要對其采取密切觀察，以便及時發現發情。一般情況下，供體母羊多數在超排處理完成后的12～48小時出現發情，在胚胎移植實際過程中，主要的判定標準是其站立不動的接受爬跨。供體母羊發情后，每天早、晚分別進行1次自然交配，中間進行1次人工輸精，每次間隔6個小時，還可依據實際情況確定，直至發情結束。

4 胚胎的、檢查和分級

供體母羊經過超數排卵處理后產生的胚胎，要根據胚胎移植需要的發育階段進行定期回收，一般采取手術法采集供體母羊輸卵管內的胚胎。收集時，現在供體母羊腹中線切口，通過輸卵管傘部將乳膠管導入，在由其引入胚胎收集杯，在宮管連接處將沖胚液注入到輸卵管內進行早卵裂期胚胎的沖洗。一般選擇收集桑椹胚和囊胚，即母羊發情5～7天形成的胚胎，這是由于8天后胚胎會在透明帶中孵出，容易被損傷和丟失。此外，可由子宮基部將二通管插入子宮腔，氣囊充氣后由宮管連接部向子宮腔注入沖胚液，胚胎和沖胚液經由二通管流入到胚胎收集杯中。

胚胎采集結束后，必須將其放在變倍體視顯微鏡下靜置2～3分鐘，當胚胎沉入皿底后進行觀察。檢查完全部的胚胎后要將其移入到發育培養液中進行清洗，并在培養液中對胚胎進行質量分級。

在實際應用中，一搬將胚胎簡單分為三個級別。A級，即胚胎發育情況符合采胚時的胚齡，且形態正常，未出現退化跡象；B級，即發育時期符合胚齡，但形態稍有不同，往往存在小暗區，或者形態正常，但發育時期滯后1天左右；C級，即胚胎發育時期滯后2天，且卵裂球形態松散，非常不正常，或出現大塊深暗的退化區?？梢浦才呤茿、B級，C級則不能移植。此外，檢出的胚胎不能夠與處于1—細胞期的空透明帶、未發育卵和未受精卵相混。

5 胚胎移植

一搬采用外科手術方法將收集于供體母羊的6～7日齡胚胎移植到發情6～7天的受體母羊的子宮角尖端。手術時，先將受體母羊進行全身麻醉，在腹下乳房前白線處切口，將腹腔打開，并將出現黃體一側的子宮角拉出。之后用針頭將子宮壁刺透，再用移胚細管將胚胎移入。此外，還可在母羊乳房前白線兩側將腹腔鏡分別插入腹腔，觀察兩側卵巢黃體情況，并在生成黃體一側的腹腔鏡插入處開一小孔，將該側子宮角子宮用腸鉗拉出，在子宮角尖端移入胚胎。胚胎移入后，子宮角要放回原處，然后縫合腹壁。根據實際情況，1只受體母羊一般可移入1～3枚胚胎。移植胚胎的受體母羊經2～3個情期的觀察，未返情的則為妊娠羊。

肉羊胚胎移植的要點

莊愛春