絞股藍有效成分及抗肝纖維化作用探討

胥展志，李 暉，梁瀠丹，辜海英，侯艷鋒，張天洪，陳 婧，江 婷

（1．成都中醫藥大學臨床醫學院2012級碩士研究生，四川 成都610075；2．成都中醫藥大學附屬醫院感染科，四川 成都610072）

證治探討

絞股藍有效成分及抗肝纖維化作用探討

胥展志1，李 暉2，梁瀠丹2，辜海英2，侯艷鋒1，張天洪2，陳 婧2，江 婷1

（1．成都中醫藥大學臨床醫學院2012級碩士研究生，四川 成都610075；2．成都中醫藥大學附屬醫院感染科，四川 成都610072）

肝纖維化是各種慢性肝病向肝硬化發展的必經階段，其表現為各種致病因素（如嗜肝病毒、酒精、藥物、化學毒物、肝寄生蟲等）所致的慢性肝病損傷和炎癥后組織修復過程的代償性反應。中醫認為，絞股藍味苦、微甘，性涼，歸肺、脾經，具有健脾益氣，清熱解毒功能，主治體虛乏力、虛癆失精及白細胞減少癥、病毒性肝炎、慢性胃腸炎、慢性氣管炎等?，F代藥理研究發現，絞股藍的有效成分具有抗肝纖維化的作用。

絞股藍；絞股藍皂苷；肝纖維化

絞股藍含有與人參皂苷類似的達瑪烷型絞股藍皂苷（Gypenside，GPs），現已發現136種絞股藍皂苷，其酸性產物與人參皂苷的酸水解產物人參二醇具有相同的理化性質，這在五加科植物中非常罕見，絞股藍也因此被譽為“第二人參”。絞股藍的有效成分中絞股藍總苷及絞股藍多糖有對抗肝纖維化作用，分析如下。

1 絞股藍有效成分

絞股藍屬葫蘆科多年生蔓生草本，又名七葉膽、五葉參等［1］。藥典最早記載于《救荒本草》，生長于亞熱帶，全世界約有16種和3個變種，我國有15種和3個變種，廣泛分布于秦嶺及長江以南地區，在湖北陜西等省廣泛栽培。

絞股藍有效成分為絞股藍總皂苷（GPs），其藥理作用廣泛。絞股藍皂苷分布于植物營養器官，包括同化組織及韌皮部薄壁細胞，其含量因植物的部位不同而有所差異，一般情況下絞股藍葉中含量做多。絞股藍皂苷藥理作用因其產地、生長環境、提取方法不同而有所差異。絞股藍地上部分可提取分離出蘆丁、商陸苷、丙二醇［2］。另含有黃酮、甜葉素，糖類成分有果糖、葡萄糖、半乳糖、低聚糖與多糖類成分。絞股藍中含有18種氨基酸，含量達到6.548μg/g；其中8種為人體必需氨基酸。絞股藍中還含有多種維生素與微量元素，其中鋅、銅、鉬、鐵、鉻等與人體增強免疫機能、抗腫瘤有關。藥理研究發現，絞股藍皂苷及絞股藍多糖均有一定抗肝纖維化作用。

2 絞股藍抗纖維化作用

2.1 對信號通路的影響

目前認為，HSC是肝纖維化發生的細胞學基礎，轉化生長因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）CCl4誘導后的肝纖維化的是最重要的促進膠原活化與肝纖維化的細胞因子。大鼠肝組織中TGF-β1、TβR-Ⅰ、TβR-Ⅱ及p-Smad2、p-Smad3蛋白表達增高，在肝纖維化形成過程中，TGF-β1/Smad信號通路活化，絞股藍總皂苷可以使大鼠肝組織TGF-β1蛋白表達顯著降低；p-Smad2及p-Smad3在絞股藍總皂苷蛋白表達顯著降低，提示經絞股藍總皂苷作用后，CCl4誘導的肝纖維化模型中TGF-β1/Smad信號通路被抑制，效應環節在于對TGF-β1及p-Smad2、p-Smad3蛋白表達的抑制，發揮抗肝纖維化作用［3］。Chen等［4］以四氯化碳誘導的肝纖維化大鼠為模型，研究發現絞股藍正丁醇提取部位及所含的絞股藍皂苷可抑制肝星狀細胞的增殖，降低單核細胞趨化蛋白-1（MCP-1）及mRNA表達，減少蛋白質釋放，抑制I型膠原蛋白的表達，對大鼠的肝纖維化具有明顯的改善作用。

2.2 清除氧自由基

GPs可顯著降低免疫性肝纖維化模型大鼠肝組織中脂質過氧化物LPO的水平，同時升高血紅細胞中SOD全血中GSH-Px活性，各種致肝細胞損傷因子如病毒顆粒和免疫復合物均可激活肝內單核巨噬細胞產生自由基，破壞細胞的膜性結構，從而影響肝纖維化的進展。GPs有可能是通過抑制單核巨噬、中性粒細胞釋放超氧陰離子，阻斷自由基鏈式反應，從而防治肝細胞損傷、死亡以及由此引起的肝纖維化。GPs還可能通過調節升高肝細胞環腺苷酸水平，穩定cAMP/cGMP比例，激活腺苷酸環化酶，抑制磷脂酶A活性，促進胞質Ca2+轉入致密管道系統，從而阻斷肝細胞壞死過程進而影響肝纖維化進展［5］。

龍碧波等［6］發現，絞股藍具有較強的抗脂質過氧化損傷的作用，絞股藍可減輕運動所產生的內源性自由基對小鼠的傷害。另外，絞股藍對小鼠肝細胞、心肌細胞有顯著的保護作用，可減少組織酶的外泄。韋登明等［7］給四氯化碳誘發的大鼠肝纖維化模型進行絞股藍液腹腔注射后，發現肝細胞變性壞死、纖維結締組織、線粒體腫脹程度及竇周隙增生的膠原纖維均有較明顯的改善，未見明顯假小葉形成。其高劑量組降低血清丙氨酸氨基轉移酶和天門冬氨酸氨基轉移酶效果明顯，且肝組織中MDA水平明顯下降，SOD明顯升高。提示GPs具有改善肝功能、清除自由基、抗脂質過氧化的作用，并呈劑量效應。

2.3 調節免疫

絞股藍的免疫調節作用主要是通過影響單核巨噬細胞系統、NK細胞活性、影響白介素、促干擾素誘生等方面。絞股藍總皂昔40mg/kg/d給小鼠灌胃10d，能明顯提高因環磷酞胺引起的脾NK細胞活性低下。另外，絞股藍多糖能顯著增強Heps小鼠NK細胞活性，且與劑量有一定關系，隨劑量的增大NK細胞活性也逐漸提高絞股藍總皂苷在體外能刺激大鼠脾細胞分泌白介素-2。絞股藍總皂苷可協同conA使正常小鼠脾細胞產生的IL-2明顯增高，使大黃所致脾虛小鼠低下的IL-2活性恢復至正常水平。用絞股藍總皂苷片治療慢性乙型肝炎46例，可見外周血單核細胞IL-2活性和IL-R2較治療前明顯升高。絞股藍總皂苷在體內外均可明顯提高ConA誘導小鼠脾細胞產IFN-γ的水平，絞股藍總皂苷在ConA協同下，在體內外均可明顯提高大黃所致脾虛小鼠低下的INF-γ水平。另有研究報道，小鼠自由飲用絞股藍多糖1g/10ml，20d，其腹腔巨噬細胞補體Cb3受體和吞噬功能明顯提高［8］。

3 絞股藍多糖的作用

絞股藍多糖（gynos-temma pentaphyllum makino polysaccharide，PGP）具有抗腫瘤、提高免疫力和抗氧化等作用，且無任何不良反應［9］。體外實驗表明，絞股藍多糖在體外能夠降低四氯化碳損傷的HepG2肝細胞的凋亡率，對四氯化碳誘導的肝細胞損傷有顯著保護作用［10］。張從梅［11］用絞股藍多糖給四氯化碳大鼠灌胃，絞股藍多糖干預組能有效控制肝臟組織中iNOS的表達，逆轉細胞毒性因子對肝細胞的損傷，防止胞漿內容物外漏，穩定肝細胞膜，從而有效恢復肝功能，其中對ALT水平的降低最明顯。楊倚天等［12］發現PGP對CCl4急性肝損傷大鼠有明顯的保護作用，其機制可能與抗氧化，穩定細胞膜和溶酶體膜防止肝細胞壞死有關，并發現對大鼠的最佳保護濃度為6mg/kg。

4 討 論

絞股藍全世界有13個種系，我國有11個種系，如短柄絞股藍、長柄絞股藍、心籽絞股藍、甜味絞股藍、光葉絞股藍、毛葉絞股藍、喙果絞股藍。絞股藍有三葉、五葉、七葉、九葉之分，其中九葉甘味絞股藍皂苷含量最高，但我國境內非常少見。其次是七葉甘味絞股藍，其藥用價值和保健功效是普通五葉絞股藍的5～10倍。近年來，在湖南省西南山區地帶發現了大面積的野生七葉絞股藍，皂苷含量很高，湖南綏寧藥用植物研究所及清華大學中藥現代化研究中心進行檢測發現，皂苷含量高達8%～12%以上，藥用及保健價值非常高。藥理實驗發現，絞股藍能增加人體血液循環中淋巴細胞活性，調節人體的免疫功能，增強體力，減輕衰弱、疲勞等癥狀，并且可以延緩衰老，改善腦力活動，提高大腦機能。

肝纖維化是多種慢性肝病的共同病理過程，以肝組織內細胞外基質成分過度增生與異常沉積導致肝臟結構和功能異常改變為特征。肝纖維化的發展過程，是肝臟動態創傷-愈合過程，在肝硬化漫長的病變過程中，肝纖維化階段是可逆的，阻斷或逆轉肝纖維化就有可能阻斷疾病向肝硬化發展的進程，因此抗肝纖維化是慢性肝病治療中的重要環節。目前認為，肝硬化共同的病理改變是以膠原蛋白為主的細胞外基質成分過度沉積，導致肝臟結構和功能異常。肝星狀細胞是肝纖維化發生的細胞學基礎。在慢性肝損傷過程中，HSC被激活，轉變為肌成纖維細胞分泌與合成膠原。ECM的合成與降解受到基質金屬蛋白酶及其組織抑制因子的調節。

藥理研究發現，絞股藍具有抗肝纖維化的作用［13］。絞股藍可改變血流變學異常，抑制C反應蛋白的形成。絞股藍總皂的主要作用表現在對TGF-β1/Smad信號通路的影響、清除氧自由基調節免疫等方面。絞股藍多糖也具有一定的抗氧化、調節免疫作用。

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R285.6

B

1004-2814（2015）03-0256-02

2014-11-05

成都中醫藥大學附屬醫院院基金（2011-D-YY-05）

李 暉