奧利司他原料藥制備過程中的雜質分析

張寶棟　劉秀香

[摘要]目的：對奧利司他原料藥制備過程中的雜質進行分析。方法：采用高效液相色譜法（HPLC）測定奧利司他在發酵、制備以及包裝的過程中產生的雜質，本次檢測色譜柱Agilent C18柱；流動相；乙腈-水；紫外（UV）檢測波長195nm，流速：1.2mL/min。結果：奧利司他在發酵、制備以及包裝過程中均會由于微生物代謝、氧化、水解及降解等反應引入或產生雜質，不同包裝材料同樣會引起雜質。結論：只有分析奧利司他原料藥制備過程中雜質引入情況，才能進一步采取解決措施，有效控制雜質含量，提高藥品質量。

[關鍵詞]奧利司他；原料藥制備過程；雜質分析

奧利司他是全球唯一在售非處方減肥藥，超過四千萬人次使用并成功達到減重目的，廣泛受到消費者的歡迎。奧利司他是強效特異性胃腸道脂肪酶抑制劑，其減重機制在于直接阻斷人體從食物中吸收脂肪，減小能量攝入，達到減重目的。該藥物作用于機體所產生的不良反應較少，由于不作用于中樞神經系統，不會產生頭暈、心慌、失眠等情況；同時有效成分不會進入血液循環，作用安全。但其原料藥在制備過程中產生雜質的情況較多，本文圍繞奧利司他原料藥制備過程中的雜質進行分析，對控制雜質含量，提高藥品質量進行探討。資料整理如下。

1.儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀系統（AgilentC18）。

1.2試劑

色譜純（乙腈）；分析純（氫氧化鈉、甲醇、過氧乙酸、庚烷、鹽酸）。

1.3色譜條件

流動相（乙腈：水=80：20）；色譜柱：Agilent C18；UV檢測波長：195nm；流速：1.2mL/min；進樣量：20uL。

2.方法與結果

2.1雜質分析

原料藥制備過程中產生的雜質主要包含發生反應的副產物、未反應完全的中間體以及未發生反應的原料藥、溶劑等。特別對于有發酵工藝藥物來說，引入的雜質種類與數量更多。以下對奧利司他制備中所可能引入的相關雜質進行簡單分析。

（1）發酵過程引入的雜質。奧利司他是由前提藥物利普斯他汀通過發酵得來，在發酵過程中不可避免的引入了雜質。通過分析發現，此過程中的雜質主要是毒三素鏈霉菌次級代謝產物，其性質與利普斯他汀差異不明顯，保留時間較接近，利用單純的層析或者萃取的方式很難去除，根據國際藥品注冊技術規范的要求，可改進發酵工藝，有效控制及降低雜質含量。除此之外，雜質中還可能含有微生物的代謝產物，例如一些色素等，對于其可通過重結晶的方去除雜質。

（2）氧化反應產生的雜質。奧利司他含有酯式結構，容易發生氧化反應。本研究中通過模擬加速氧化過程，發現圖譜中比標準品多出了5個雜質峰，且主峰面積減少，說明奧利司他發生分解。通過分析雜質峰出現的先后時間，總結得出，可以通過縮短制備時間、防止與氧化物質過分接觸以及填充惰性氣體防止氧化的方式，有效對雜質生成進行控制。對于在奧利司他之前產生的雜質可以通過結晶法去除，對于其后產生的雜質可以通過層析聯合結晶的方式去除。

（3）自然降解過程引入的雜質。實驗表明，在含水的醇溶液里，本品會出現水解，在不含水的醇溶液里不會發生水解。因此在對奧利司他純化的過程中避免使用含水醇溶液，利用硅膠層析或極性有機溶劑層析結晶可去除雜質。

（4）受熱分解產生的雜質。制備奧利司他會經過減壓濃縮的工序，受熱會使奧利司他分解，為除去這一過程所帶來的雜質，可控制壓力及濃度，縮短時間，減少雜質生成。另外可通過非極性溶劑結晶法去除由受熱分解產生的雜質。

（5）遇酸、堿性物質產生的雜質。通過實驗，營造酸性與堿性環境，都可觀察到奧利司他發生分解，通過比較，在堿性環境中的破壞作用最強，因此，在制備及保存過程中要嚴禁與酸性或堿性的物質接觸。

（6）不同包裝材料引入的雜質。制備奧利司他過程中，相關有機溶劑的使用較多，而大部分的有機溶劑對于聚乙烯材料都有溶解作用，若使用該種材料包裝藥品，會引入較多雜質，因此在藥品的儲存過程中要盡量選擇耐有機溶劑腐蝕的材料。通過實驗發現，乳橡膠、聚乙烯等材料會引起較多雜質，而采用聚丙烯或聚酰胺類材料，一般不會引入雜質，因此在藥品包裝材料的選擇上要尤為注意。

3.討論

奧利司他是一種不進入中樞神經系統的脂肪酶抑制劑，主要采用微生物發酵工藝生產，由前體原料藥利普斯他汀經過分離純化、氫化及結晶得到，制備工藝中通常涉及到有機溶劑萃取、打孔吸附、硅膠層析以及結晶等分離技術，引入雜質的可能性比較大。通過本文研究發現，發酵、氧化、受熱、強酸強堿以及不同的包裝材料都會引起不同的雜質，因此制備時要尤為注意，避免新雜質的引入，優化制備工藝，提高藥品質量。