肺炎鏈球菌臨床檢驗分析

于洋

摘要 探討由肺炎鏈球菌感染患者的臨床檢驗分析方法及細菌特性。方法選取2011年3月-12月，我院收治的由肺炎鏈球菌感染患者20例，臨床通過取痰、膿液、腦脊液、血液等方式對鏈球菌進行檢驗分析。結果在35% C0環境行菌種生存活動降低，生存率30%，10%C0環形中菌種的生存率85%，菌種的生存條件經培養分析顯示在10%C0環境中生長更好。最適溫度35℃，最適pH7.6～8.0。對比生存率顯示，p<0.05，表示差異有統計意義。結論 通過鑒別診斷對菌種進行分型，細菌培養確定菌種在不同溶液及環境下成陰性或是陽性。在分析培養下確定不同的生存環境下細菌的活動能力。

關鍵詞 肺炎鏈球菌；檢驗方法

肺炎鏈球菌俗稱肺炎雙球菌。該菌廣泛分布于自然界，主要寄生在人類上呼吸道，大多數人鼻咽腔中有本菌存在。根據莢膜抗原的不同，可分為84個血清型，多數菌株不致病，少部分強致病菌株，主要引起人類化膿性感染和大葉性肺炎。選取2011年3月-12月，我院收治的由肺炎鏈球菌感染患者20例，對20例患者臨床菌種檢驗分析進行總結，報告如下。

1臨床資料與方法

1.1一般資料 選取2011年3月-12月，我院收治的由肺炎鏈球菌感染患者20例，患者年齡3-40歲，平均年齡35歲，20例患者中，大葉性肺炎患者10例，6例呼吸道功能異常，4例由酒精及藥物中毒引起，肺炎鏈球主要引起人類大葉性肺炎。75%的成年人肺炎鏈球菌肺炎及50%以上嚴重的肺炎鏈球菌菌血癥。臨床菌種采集根據疾病的不同采集相應的標本。通常取痰、膿液、腦脊液、血液等。

1.2標本采集 根據疾病的不同采集相應的標本。通常取痰、膿液、腦脊液、血液等。最好在用藥前采集標本。采集菌種所使用的器皿應清潔無菌，采集標本時避免污染，盡快送檢。自肺部咳出的痰，應選擇鐵銹色或膿性分泌物部分送檢。診斷菌血癥、敗血癥，采血時應選擇在寒戰、高熱時。采血量應在5～10 ml。

1.3檢驗方法 直接涂片檢查 除血液標本外，其他標本均可使用該方法。經革蘭或亞甲藍染色后鏡檢，見符合肺炎鏈球菌形態特點，周圍有較寬的透明區，經莢膜染色確定為莢膜者，可初步報告。莢膜腫脹試驗 可作為肺炎鏈球菌的快速診斷。取純培養菌液l滴和肺炎鏈球菌診斷血清l滴再加一接種環亞甲藍染液，混勻后加蓋片油鏡檢查。如莢膜顯著增厚，即莢膜腫脹試陽性[1] 。

1.4細菌培養 增菌培養：血液、腦脊液經葡萄糖硫酸鎂肉湯增菌后，肺炎鏈球菌均勻渾濁生長并有綠色熒光。分離培養：膿液、腦脊液沉淀物或經無菌鹽水洗滌過的痰液，接種血平板，35℃l8～24小時培養后，觀察菌落生長情況，再取可疑菌落作進一步鑒定。

1.5統計分析利用spss19.0軟件對臨床數據處理，審核資料數據計量采用t檢驗，結果顯示p<0.05，表示臨床差異有意義，有顯著效果。

2結果 在20例患者中根據不同病因對患者的痰、膿液、腦脊液、血液進行抽取檢驗及分離培養顯示，20例患者中12例患者抑菌圈 >18mm，為陽性，在35% C0環境行菌種生存活動降低，生存率30%，10%C0環形中菌種的生存率85%，菌種的生存條件經培養分析顯示在10%C0環境中生長更好。最適溫度35℃，最適pH7.6～8.0。對比生存率顯示，p<0.05，表示差異有統計意義。

3討論 當出現某種降低這種抵抗功能的因素時，肺炎鏈球菌可引起感染，如①呼吸道功能異常：病毒及其它感染性因子損傷呼吸道粘膜上皮細胞；某些異常因素（如過敏）導致粘液的過度分泌，使侵入的病原菌受到保護；各種原因導致的支氣管阻塞及各種原因導致的纖毛功能損傷；②酒精及藥物中毒：酒精及某些藥物中毒可抑制吞噬細胞的活性及咳嗽反射，有利于病原菌的吸入；③循環系統功能異常及任何原因導致的肺充血、心功能衰竭；④其它：營養缺陷、體質虛弱、貧血、血清補體水平低下等。肺炎鏈球菌肺炎常突然發病，表現為高熱、寒戰、胸膜劇烈疼痛、咳鐵銹色痰。10%～20%的患者可于高熱期伴發菌血癥。其病理表現主要是最初肺泡內有大量纖維蛋白滲出液，繼之是紅細胞和白細胞向肺泡內滲出，最終導致病變部位肺組織實變[2] .

肺炎鏈球菌革蘭染色陽性，呈矛頭狀排列，尖端向外。在痰及膿液中可單個、成雙或短鏈狀排列。無鞭毛及芽孢，在體內可形成莢膜。營養要求較高，必須在含有血液血清或葡萄糖的培養基中才能良好生長。本菌為兼性厭氧菌，但在10%C0環境中生長更好。最適溫度35℃，最適pH7.6～8.0。在血平板上，35℃24小時可形成細小、灰白色、透明或半透明、表面光滑的扁平菌落。菌落周圍有草綠色溶血環。培養稍久，可產生自溶酶而使菌落中央塌陷，邊緣隆起，呈臍狀。

肺炎鏈球菌能分解多種糖類，如：葡萄糖、乳糖、麥芽糖、蔗糖等產酸不產氣。多數新分離的菌株分解菊糖，有的也可不分解。菊糖分解、膽汁溶菌及奧潑托欣（optochin）試驗肺炎鏈球菌均陽性，借此可與甲型溶血性鏈球菌相鑒別。該菌不產生靛基質，不液化明膠[3] 。

鏈球菌主要致病物質：莢膜是肺炎鏈球菌的主要侵襲力，失去莢膜其毒力減弱或消失；肺炎鏈球菌溶血素0類似A群鏈球菌SL0，抑制淋巴細胞的增殖、中性粒細胞趨化及吞噬。脂磷壁酸具有黏附作用；而神經氨酸酶則與細菌在黏膜上皮細胞定植、繁殖、擴散有關。

通過本檢驗研究顯示，20例患者中12例患者抑菌圈 >18mm，為陽性，在35% C0環境行菌種生存活動降低，生存率30%，10%C0環形中菌種的生存率85%，菌種的生存條件經培養分析顯示在10%C0環境中生長更好。最適溫度35℃，最適pH7.6～8.0。對比生存率顯示，p<0.05，表示差異有統計意義。通過鑒別診斷對菌種進行分型，分離培養中明顯查別均屬生活環境特性及性狀。

參考文獻

[1] 王靜靜，宋曉萍，王海靜.臨床微生物檢驗和細菌耐藥性監測分析 . 中國保健營養（中旬刊） .2014，06： 3924-3924.

[2] 羅湘蓉，袁平，李紅凌，金婷婷，胡方芳，袁軍 .肺炎鏈球菌臨床分布及其耐藥性分析. 檢驗醫學與臨床. 2014，03： 361-362，364.

[3] 曹焱 .下呼吸道感染患者病原菌檢驗的臨床分析. 中外醫療 .2014，33（03）： 186，188.