GP73、AFP 異質體聯合檢測在原發性肝癌早期診斷中的應用進展

周亮++王世明

[摘要] 原發性肝癌已成為五大惡性腫瘤之一，是導致腫瘤患者死亡的第三大因素。在我國，原發性肝癌更是極為常見的惡性腫瘤之一，死亡率較高，僅次于胃癌、食管癌。一直以來，原發性肝癌診斷是臨床上的重點、難點，最近幾年，臨床上對原發性肝癌的研究取得了顯著的進步，治療方法已從單一外科治療發展到外科治療為主、局部治療為輔、多學科的綜合治療，因此早期發現原發性肝癌對提高臨床治療有效率具有極其重要的作用，尤其是新技術、新方法的出現，明顯改善了原發性肝癌的臨床診斷和治療效果，極大地提高了我國原發性肝癌患者的生存率及生活質量。

[關鍵詞] 原發性肝癌；早期診斷；GP73；AFP異質體；發展歷程

[中圖分類號] R735.7 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-4721（2015）02（a）-0015-03

Application progress of joint detection of GP73，AFP corpora heterogenium in early diagnosis of primary liver cancer

ZHOU Liang WANG Shi-ming

Department of General Surgery，The First Clinical Medical College of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China

[Abstract] Primary liver cancer （PHC） has become one of the five malignant tumors，is the third major factor leading to the death of patients with cancer.In China，PHC is one of the extremely common malignant tumors with a higher mortality rate，and the mortality rate is next only to gastric cancer，esophageal cancer.All the time since，the diagnosis of PHC is the focus and difficulty in clinical medicine，in recent years，the clinical research on PHC has made significant progress，the treatment method has been developed from the single surgical treatment to the multi-disciplinary comprehensive treatment of surgical treatment mainly，local treatment auxiliarily，therefore early detection of PHC has extremely important role for improving the effective rate of clinical treatment，especially the emergence of new technologies and new methods significantly improve the clinical diagnosis and treatment of PHC，which greatly improve the survival rate and quality of life in patients with PHC in China.

[Key words] Primary liver cancer；Early diagnosis；GP73；AFP corpora heterogenium；Development history

源自肝細胞和肝內膽管上皮細胞的惡性腫瘤被稱為原發性肝癌[1]（以下簡稱肝癌），以肝細胞癌和肝內膽管細胞癌最為常見，其中肝細胞癌所占比例高達90%以上，因此通常情況下，肝癌指的就是肝細胞癌。在我國，乙肝病毒感染是引發肝癌的主要病因，丙肝病毒感染及長時期飲酒為次要病因[2]，肝癌起病隱匿，發展卻很迅速，當患者被確診為肝癌時多已經轉移或發生遠處轉移，生存期較短[3]，因此早期診斷肝癌對治療肝癌及確?；颊唛L期生存具有至關重要的作用[4]。甲胎蛋白（alpha fetal protein，AFP）被認為是目前診斷肝癌和預后的首選標志物，其診斷肝癌的靈敏度為50%～60%[5]，將有一部分被漏診，所以，就目前提高對肝癌的早期診斷率的高爾基體蛋白73（GP73）聯合AFP檢測進行綜述[6]。

1 早期診斷

GP73是一種跨膜糖蛋白，正常人體肝組織中GP73主要由膽管上皮細胞表達，而肝細胞基本不表達或表達很少[7]。國外研究表明，高爾基體蛋白在肝癌中的表達有不同機制，在急性起病和慢性肝臟疾病中的表達機制不同[8]。雖然該蛋白對肝癌疾病的病因確診沒有幫助，但是該蛋白可以作為該疾病早期診斷的標志物。BLock等發現肝癌患者血清學中高爾基體蛋白含量顯著增高，而在另一項研究中也表明該蛋白的靈敏度、特異度都高于AFP，而且很多肝癌患者中AFP表達呈陰性，但有60%人群中GP73顯著升高，從而說明高爾基體蛋白在肝癌患者血清中增高，且其對肝癌的早期診斷優于AFP[9]。隨著蛋白組學技術的進一步發展，GP73的異質體巖藻糖基化的GP73（fucose-studded GP73）被提出。在一項包括90名患者的研究中，GP73診斷肝癌的靈敏度和特異度分別為64%、89%，而GP73的異質體靈敏度和特異度則分別高達90%、95%，因此，Cassandra提出GP73及其異質體是肝癌可靠的腫瘤標志物。有理由認為，GP73可能成為更好地診斷肝癌尤其是早期肝癌的血清標志物。這項研究是目前世界上最大宗的病例研究，包括不同種族和國家的肝炎、肝硬化、肝癌、肝臟其他惡性腫瘤和肝臟良性腫瘤以及其他器官系統的惡性腫瘤等諸多病例，結果顯示，GP73是診斷肝癌最有價值的腫瘤標志物，GP73聯合AFP檢測可以提高對PHC的早期診斷率，可作為肝癌患者術后監測復發的指標[10]，因此GP73聯合AFP可能成為診斷肝癌的重要血清標志物[11]。

AFP異質體是一種糖蛋白，正常情況下，這種蛋白主要來自胚胎的肝細胞，胎兒出生后約兩周AFP從血液中消失，因此正常人血清中AFP的含量尚不到20 μg/L[12]，它的相對分子量約為68×103，近年來有關研究表明，許多肝癌患者中AFP的表達特異性低[13]，不足以早期對肝癌進行診斷，但是AFP異質體有助于對肝癌的早期診斷。AFP異質體能早于影像占位前1年在患者體內升高。AFP異質體有助于檢測肝癌預后[14]，近年來發現肝癌產生的AFP和其他情況下所產生的AFP具有不同的生化特性，這是因為肝癌細胞內催化合成糖蛋白中糖鏈的酶的組成和活性有了變化，結果使AFP的糖鏈結構發生變化，肝癌產生的AFP能夠和小扁豆凝集素結合，而其他情況產生的AFP不能和小扁豆凝集素結合。這種由肝癌細胞產生的能和小扁豆凝集素結合的AFP叫AFP異質體[15]。在需要鑒別AFP升高的來源時，可檢測AFP異質體，如AFP異質體超過AFP總量的25%時提示系肝癌引起的AFP升高，如<25%提示系其他情況引起的AFP升高。調查結果顯示，AFP水平陽性率大約為55%，約30%的肝癌患者都會漏診，因此AFP檢測具有一定的局限性，無法成為早期肝癌診斷的最理想方法[16]。成人中，AFP可以在大約75%的肝癌患者血清中升高，在其他腸胃管腫瘤（胰腺癌或肺癌）及肝硬化等患者亦可出現不同程度的升高。當肝細胞發生癌變時，又恢復了產生這種蛋白質的功能，而且隨著病情惡化其在血清中的含量會急劇增加，AFP就成了早期診斷PHC的一個特異性臨床指標，然而大量的臨床卻發現，部分肝硬化患者會長期出現AFP達到上千ng/ml，但多年都沒有肝癌的跡象；同時發現約20%的晚期肝癌患者，直至病故前，AFP仍不超過10 ng/ml，故肝硬化、慢性肝炎患者、家族中有肝癌患者的人應半年檢測1次，且對于AFP陰性的患者應聯合多種肝癌的早期診斷標志物進行檢查，以提高對早期肝癌的診斷率。

GP73聯合AFP異質體檢測對肝癌的早期診斷有重要的價值[17]。肝癌組織中GP73蛋白及mRNA表達均顯著高于對應的癌旁組織及正常肝組織，其表達水平與腫瘤大小、血管侵犯及腫瘤分化等代表腫瘤侵襲力的指標相關，與患者總體生存預后無關?；诟伟┙M織中GP73的高表達，我們推測未來針對GP73表達調控的研究將為肝癌提供新的治療靶點[18]，并為了解其與肝癌的生長、侵襲及復發的潛在相關性，闡明GP73在肝癌發生、發展中的作用機制及其與肝癌的因果關系打下基礎。目前，肝癌的顯像診斷已形成三大體系，即超聲顯像、CT掃描、磁共振成像。這些現象診斷技術能夠明確腫瘤的大小、位置、病灶性質及浸潤程度等，具有較高的準確性，被廣泛應用于肝臟腫瘤的診斷中，但是，在肝癌的早期診斷中，GP73、AFP異質體等的出現確實提高了肝癌的早期診斷率[19]，大大提高了患者的手術治愈率，改善了患者的預后。此外，兩者作為血清學腫瘤標志物，在肝癌的早期診斷中聯合檢測，同實時超聲造影技術，成為診斷肝癌的最具價值的檢查技術之一。近兩年，CT掃描和磁共振成像多期動態掃描的應用，使小肝癌的診斷率明顯提高。CT增強掃描中，尤其是病灶的動脈期，檢出靈敏度為93%[20]，綜合多時相薄層掃描靈敏度為96%，而動態高場強磁共振能更準確、實時、動態地顯示肝臟局部病灶的強化表現，其靈敏度、特異度均高于增強CT掃描，靈敏度為98%，特異度為91%[21]，尤其在直徑<1 cm的病灶中，其檢出率高達90%以上，但是，影像檢查對于中、晚期肝癌的診斷準確率較高，在肝癌早期診斷中，尤其是亞臨床肝癌的診斷還是比較困難的，因此對早期肝癌的誤診率相對較高，同時影像設備價格較高，對于中小型醫院難以推廣，因此對于早期肝癌的診斷方法還需繼續探索。其次，臨床上發現了很多有效的生物標志物，例如異常凝血酶原、AFP異質體、GP73等[22]，其中GP73為肝癌早期診斷的理想血清標志物，其靈敏度及特異度均高于AFP；相關調查顯示，聯合檢測AFP、血清鐵蛋白能夠顯著提高肝癌早期診斷率，同時降低了漏診率，肝癌陽性檢出率可達95%以上，多種標志物聯合使用在診斷AFP陰性肝癌患者時起到互補的作用[23]。特別是異常凝血酶原在肝癌診斷中的特異性，目前已被日本、韓國等國家認可。值得注意的是，不是每一種標志物都具有一定的局限性，不可能使用一種標志物就可以診斷所有的肝癌患者，需要經過研究證實后方可廣泛使用[24]。

2 結語

早期診斷肝癌依然是肝癌診斷中的研究重點，由于肝癌的發病因素較多、階段較多，使其在不同的階段、不同機體的表現也不盡相同，因此臨床上一直以篩選和優化腫瘤檢測組合為努力方向[25]。提高人群小肝癌的篩選率是提高肝癌預后的主要途徑，而早期發現肝癌病變則是早期診斷的最理想途徑。GP73、AFP異質體的聯合檢測可提高對肝癌的早期診斷率，但是從實驗室到臨床還有很多路要走，更需要對這些標志物進行廣泛深入的實驗室研究和臨床對照試驗來確立其功能[26]。

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（收稿日期：2014-10-21 本文編輯：許俊琴）