多菌靈對香菇菌絲生長影響及在子實體的殘留研究*

劉新銳，黎志銀，謝寶貴，高 敏，鄧優錦，江玉姬

（1.福建農林大學菌物研究中心，福建 福州 350002；2.福建農林大學生命科學學院，福建 福州 350002；3.福建農林大學食品科學學院，福建 福州 350002；4.福建省莆田市藥品檢驗所，福建 莆田 351100）

多菌靈對香菇菌絲生長影響及在子實體的殘留研究*

劉新銳1，2，黎志銀1，2，謝寶貴1，2，高 敏4，鄧優錦1，2，江玉姬1，3**

（1.福建農林大學菌物研究中心，福建 福州 350002；2.福建農林大學生命科學學院，福建 福州 350002；3.福建農林大學食品科學學院，福建 福州 350002；4.福建省莆田市藥品檢驗所，福建 莆田 351100）

以香菇9319為材料，在拌料和出菇階段使用多菌靈，研究多菌靈對香菇菌絲生長和子實體殘留的影響。結果表明，多菌靈對香菇菌絲生長有明顯抑制作用。在出菇期噴灑300 g/667m2的多菌靈，其在子實體的半衰期為0.67 d，出菇階段按100 g/667m2的量噴灑子實體1次，間隔7 d和3 d檢測其含量低于1 mg·kg－1，但高于0.1 mg·kg－1，若量超過100 g/667m2的量使用，子實體的殘留量易超過1 mg·kg－1。因此，在香菇生產中應謹慎使用多菌靈。

香菇；多菌靈；農藥殘留；無公害；綠色食品

香菇 [Lentinula edodes(Berk.)Sing.]是僅次于雙孢蘑菇的世界第二大類食用菌，是中國食用菌生產的一個重要組成部分，也是我國出口創匯的主要品種[1]。目前我國香菇栽培主要是以大棚季節性栽培為主，栽培方式比較粗放，在香菇栽培每一個環節中，均可能受到真菌、細菌、粘菌、放線菌、病毒和蟲害等的危害，輕者降低菌棒成活率，影響香菇產量及品質，重者導致菌棒報廢，產量絕收，嚴重影響經濟效益[2-4]。而采用化學藥劑進行防治常常是病蟲害防治工作中最有效、最直接的手段，但如果使用不當，容易對香菇造成藥害，產品不合格進而對人體健康構成危害[5]。

多菌靈（Carbendazim）曾是國內登記可在食用菌上使用的農藥產品（http://www.chinapesticide.gov. cn/），為苯并咪唑類廣譜內吸性殺菌劑，對許多真菌（子囊蔭、半知菌和擔子菌） 有抑制和殺滅作用[6]，胡建偉等[7]的研究結果表明毛霉、根霉、木霉、曲霉和青霉菌絲對多菌靈較敏感。要海蘭等[8]通過室內與棚內試驗，發現多菌靈WP500倍、l 000倍兩種濃度處理對綠色木霉菌、黑根霉菌有極顯著的抑制效果，因而有時被用于食用菌的生產中。

本文針對香菇生產的特點，選擇在菌棒制作和出菇管理這兩個重要環節中使用多菌靈，以研究其對香菇生長發育的影響以及在子實體中殘留的情況，探討多菌靈在香菇生產中的合理使用及殘留控制，為香菇的安全生產、產品質量的控制提供技術支撐。

1 材料與方法

1.1供試菌株

香菇9319，中高溫型品種，福建省龍巖市香菇栽培場種植品種。

1.2培養基

PDA培養基：馬鈴薯（去皮） 20%、葡萄糖2%、瓊脂2%。

種植培養基：木屑78%、麥麩20%、石膏2%，含水量60%。

1.3農藥

50%多菌靈可濕性粉劑，購于福州市植保站。

1.4多菌靈對香菇菌絲生長的影響

1.4.1 PDA平板測定

將50%多菌靈可濕性粉劑按0.5 g·kg-1、1 g·kg-1、2 g·kg-1的量直接溶于滅菌的PDA培養基，倒平皿，香菇菌絲接種于平板中，以不加多菌靈的作對照，于25℃下培養，待對照組快長滿時，測量各個處理菌落直徑大小，計算生長速度。

1.4.2 種植培養基測定

在種植培養基中，每千克干料分別拌入多菌靈0.5 g、1 g、2 g、4 g、8 g，以不加多菌靈的栽培料為對照，常壓滅菌24 h，冷卻后接入香菇菌種，置于25℃下培養，測量菌絲生長速度。

1.5多菌靈拌料在香菇子實體中殘留量測定

根據多菌靈拌料對香菇菌絲生長影響的試驗結果，設計每千克干料拌入多菌靈1 g、2 g和4 g三個處理，以不加多菌靈作對照，出菇后采收第1潮子實體檢測多菌靈的殘留量。

1.6多菌靈噴施香菇子實體殘留消解動態試驗

根據NY/T 788-2004《農藥殘留試驗準則》中多菌靈的使用規范，設計其使用劑量為使用說明推薦最高用量的1.5倍，即300 g/667m2。在香菇菌棒開袋后子實體長至離成熟期1/3大小時開始噴施，施藥后2 h、1 d、2 d、3 d、4 d、5 d采樣，檢測子實體中多菌靈的含量。

1.7多菌靈不同噴施方法的殘留試驗

設計多菌靈的使用量分別為100 g/667m2、200 g/667m2、300 g/667m2，施藥次數1次，子實體采收間隔期分別為7 d、3 d、2 d、1 d；施藥2次，則間隔5 d第2次施藥，在施藥后2 d進行采收。

1.8檢測方法

多菌靈的檢測方法，參照GB/T 23380-2009《水果、蔬菜中多菌靈殘留的測定高效液相色譜法》。

2 結果與分析

2.1多菌靈對香菇菌絲生長的影響

PDA培養基及種植培養基中不同濃度多菌靈對香菇菌絲生長影響見表1、表2。

表1 PDA培養基中不同濃度多菌靈對香菇菌絲生長影響Tab.1 The effects of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes in PDA medium

表2 種植培養基中不同濃度多菌靈對香菇菌絲生長影響Tab.2 The effects of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes in artificial medium

從表1和表2可以看出，在PDA和種植培養基中添加多菌靈，均對香菇菌絲生長產生很強的抑制作用，且達到極顯著水平。隨著多菌靈添加量的增加，對香菇菌絲生長的抑制作用加強。添加同濃度的多菌靈，PDA培養基中菌絲生長抑制率高于種植培養基中，這可能是由于在PDA培養基中，多菌靈可濕性粉劑直接添加，未經高溫滅菌，而在種植培養基中，多菌靈經高溫滅菌，多菌靈含量可能有所降解，因此對菌絲的毒性降低。

2.2多菌靈拌料栽培對香菇子實體農藥殘留量影響

每千克香菇種植培養料干重中分別拌入1 g、2 g和4 g的50%多菌靈可濕性粉劑，新鮮香菇子實體均可檢測到多菌靈，其含量分別是0.028 mg·kg-1、0.036 mg·kg-1、0.021 mg·kg-1，符合我國 《NY/T 749-2003綠色食品食用菌》限定的0.1 mg·kg-1要求。

2.3多菌靈噴施香菇子實體殘留消解動態

待香菇子實體長到1/3大小時開始噴施多菌靈，其在香菇子實體中的殘留量情況見表3，并以2 h（1/12 d）為對照。

表3 香菇中多菌靈的消解動態Tab.3 Degradation of carbendazim in Lentinula edodes

由表 3可見，消解方程為 y=17.2866e-1.0395x，R2為0.9647。多菌靈在香菇子實體中消解比較快，其 T1/2為 0.67 d，噴施 2 h的殘留量為16.191 mg·kg-1，經過1 d后消解至4.585 mg·kg-1，消解量達11.606 mg·kg-1。噴施4 d后，多菌靈在子實體中的殘留量僅為0.022 mg·kg-1，遠遠低于0.1 mg·kg-1，達到綠色食品要求。

2.4不同施藥方法與香菇子實體農藥最終殘留量的關系

根據香菇的栽培特點，從施藥劑量、施藥次數及采收間隔期這三方面考察多菌靈在香菇子實體中的殘留情況。多菌靈在香菇子實體上的施藥方法及殘留結果見表4。

由表4可見，噴施3種劑量多菌靈7 d后采收的香菇子實體，多菌靈的殘留量均小于0.1 mg·kg-1，達到綠色食品要求。噴施劑量100 mg·kg-1，采收間隔期3 d，其殘留量為0.736 mg·kg-1，只符合無公害限量要求。而其它施藥方法，香菇子實體中多菌靈的殘留均超過限量要求，施藥次數2次的殘留量遠遠高于施藥1次的，隨著施藥劑量的提高，其殘留量也增加，同時施藥后采收的間隔期越短，多菌靈的殘留量也越大，易造成香菇子實體的殘留量嚴重超標。因此，要在香菇生產中安全使用多菌靈，必需間隔7 d或以上才能采收。

表4 不同施藥方法香菇子實體中多菌靈殘留量Tab.4 The residues of carbendazim with different dosage in Lentinula edodes

3 結論與討論

多菌靈因高效低毒被廣泛使用于作物上，已有的研究結果表明其也是食用菌生產中常見污染菌木霉等雜菌的有效防治藥劑[8]。張浩等[9]用50%多菌靈可濕性粉劑噴灑平菇子實體，研究多菌靈的殘留動態，結果發現原始沉積量為3.214 mg·kg-1時的半衰期為2.58 d。本文使用50%多菌靈可濕性粉劑噴灑香菇子實體原始沉積量16.19 mg·kg-1時的半衰期為0.67 d，表明子實體和施藥量的不同將影響農藥半衰期，此外，平菇一般栽培于溫度較低季節，香菇9319栽培于溫度較高的夏、秋季節，可能環境溫度的不同也是影響農藥半衰期長短的重要因素之一。

噴灑使用濃度、使用次數和采收間隔期對多菌靈的殘留量影響顯著。本次試驗中使用100 g/667m2的量，并且使用1次，采收間隔期在3 d以上，產品能達到無公害殘留的標準。而使用同樣劑量、噴灑2次，由于采收間隔期縮短，導致殘留量高，為6.474 mg·kg-1，遠高于無公害殘留的標準。噴灑量在200 g/667m2以上且間隔期低于3 d時都將引起多菌靈殘留量的超標。從實驗結果可知，夏秋栽培香菇9319時，使用合適劑量的多菌靈，在采收間隔期保證7 d及以上時，多菌靈在香菇子實體中的殘留符合無公害要求或綠色標準。多菌靈在香菇栽培過程中的降解，時間是一個非常重要的影響因素。

在培養料中拌入多菌靈，可以降低培養菌棒的污染率，但也會影響香菇菌絲的生長，使用濃度越高，對香菇菌絲生長的抑制越強，在拌藥量為0.5 g·kg-1時，菌絲抑制率為10%，達到顯著效果。暴紀春等[10]的研究結果也表明，多菌靈對香菇菌絲生長影響較強，在生產中不宜使用或要嚴格控制拌料時的濃度。同時從實驗結果可知，在拌料中使用多菌靈含量低于4 g·kg-1，香菇子實體多菌靈的含量未超過1 mg·kg-1。

綜上分析，在香菇生產中拌料使用多菌靈容易影響香菇菌絲的生長，在出菇階段噴灑多菌靈，劑量使用不當、采收時間間隔期縮短都容易造成子實體殘留的超標，因此多菌靈在香菇生產中應慎重使用。食用菌在生產過程中一般不用或較少使用農藥，但有些季節性生產的菇類，有時會發生較為嚴重的有害生物為害，應盡量采用物理或生物的方法防控。農藥的使用即影響食用菌菌絲的生長，又容易造成食用菌產品農殘超標，特別是產品要求達到綠色食品以及產品定位對外貿易時應杜絕使用，從源頭上控制污染，這樣產品才能符合日本、歐盟等對多菌靈極低限值，避免遭受貿易損失。

[1]謝福泉，謝寶貴，羿紅，等.福建省袋栽香菇主要菌株交配型測定及品種鑒別[J].福建農林大學學報，2004，33（4）：521-526.

[2]陳俏彪，吳全聰，吳應淼.浙江省代料香菇病蟲害調查[J].食用茵學報，2006，13（2）：69-73.

[3]胡清秀，宋金娣，管道平.食用菌病蟲害危害分析與防治關鍵控制點[J].中國農學通報，2008，24（12）：401-406.

[4]劉建密，李晶，上官舟建.代料香菇病蟲害及其防治[C]//海峽兩岸第十屆菌物學暨第三屆食藥菌學術研討會論文集.武漢：華中農業大學，2011：339-343.

[5]吳應淼，陳俏彪，毛可紅，等.代料香菇病蟲害綜合防治技術[J].中國食用菌，2006，25（5）：51-52.

[6]肖奎，葉華智.多菌靈對茶樹菇菌絲生長的影響及其在子實體中的殘留[J].中國食用菌，2008，27（3）：31-33.

[7]胡建偉，龔明福，彭英，等.多菌靈和石灰對5種霉菌的抑制效果[J].中國蔬菜，2003（3）：41.

[8]要海蘭，把存芳，賈秀芬，等.食用菌主要雜菌—綠色木霉、黑根霉藥劑防治試驗[J].食用菌，2010，32（4）：60-61.

[9]張浩，張祥輝，逯忠斌，等.食用菌中多菌靈和噻菌靈殘留動態的研究[J].食用菌，2009，31（2）：36-37.

[10]暴紀春，趙桂云，趙洪彬，等.不同濃度度的多菌靈對食用菌菌絲生長的影響[J].中國林副特產，2006（1）：12，49.

木耳炒臘肉

黑木耳味甘性平，有涼血、止血作用，主治咯血、吐血、衄血、血痢、崩漏、痔瘡出血、便秘帶血等，因其含鐵量高，可以及時為人體補充足夠的鐵質，所以是一種天然補血食品。黑木耳含有維生素k和豐富的鈣、鎂等礦物質，能減少血液凝塊，預防血栓等癥的發生，有防治動脈粥樣硬化和冠心病的作用。

主料：干黑木耳、臘肉、胡蘿卜、青辣椒

輔料：植物油、鹽、姜、味極鮮、雞精、蒜苗

做法：

1把木耳用溫水泡，去蒂洗凈，臘肉泡3小時，用蒸鍋蒸30分鐘，晾一會切片。

2胡蘿卜洗凈去皮切菱形、姜切末，蒜苗、青辣椒洗凈切段。

3熱鍋涼油，油熱8成，下姜末、胡蘿卜翻炒出香味，下木耳、辣椒、鹽翻炒均勻。

4加臘肉、少許水燜炒2分鐘，加蒜苗、味極鮮、雞精翻炒均勻即可。

黑木耳最好用溫水泡；臘肉多泡可減少咸味；先加少許鹽翻炒木耳、胡蘿卜，這樣臘肉不用加鹽。

中國食用菌信息網

2015.04.30

Effects of Carbendazim on Mycelia Growth of Lentinula edodes and Residue in Fruit Body

LIU Xin-rui1,2,LI Zhi-yin1,2,XIE Bao-gui1,2,GAO Min4,DENG You-jin1,2,JIANG Yu-ji1,3
(1.Mycological Research Center,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;2.College of life sciencer, Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;3.College of Food Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;4.Putian institute for drug control,Putian 351100,China)

The effect of carbendazim on mycelia growth of Lentinula edodes strain 9319 and residue in fruit body were studied, and carbendazim was used in the artificial medium and fruiting phase.The results showed that mycelia growth of Lentinula edodes strain 9319 was restrained obviously.In the mushroom phase carbendazim was sprayed on fruit body 300 g per 667 m2one time,then its half－life in fruit body was 0.67 day.While spraying carbendazim on fruit body 100 g per 667 m2one time and then after three day and seven day,the carbendazim in fruit body was less than 1 mg·kg－1,but over 0.1 mg·kg－1.The carbendazim in fruit body would be over 1 mg·kg－1if the carbendazim used over 100 g per 667 m2.So it should be careful use the carbendazim in Lentinula edodes cultivation.

Lentinula edodes;carbendazim;pesticide residue;non－pollution;green food

A

1003-8310（2015）03-0068-04

10.13629/j.cnki.53－1054.2015.03.017

國家支撐計劃項目（2013bad16b03）；福建省現代農業食用菌產業技術體系項目（K83139295）。

劉新銳（1980－），男，碩士，助理研究員，主要從事食用菌方面研究。E－mail:liuxr3623@163.com

**通信作者：江玉姬（1965－），女，博士，教授，主要從事食用菌栽培、安全生產方面研究。E－mail:jyj1209@163.com

2015－03－10