隱球菌性腦膜炎

陳偉峰 錢晶

概述：隱球菌性腦膜炎主要是由隱球菌屬中的新生隱球菌侵犯中樞神經系統而引起的一種深部真菌病，約占隱球菌感染的800o，預后嚴重，死亡率高，即使經過正規治療，死亡率仍高達25%～60%，治療后的幸存者也常常留下嚴重的后遺癥。這是一種較新型的腦膜炎感染類型，且誤診率較高，常被誤診為其他類型的腦膜炎而造成診斷延誤甚至造成其他疾病的發生。

一、檢測方法及優劣

鑒于隱球菌性腦膜炎誤診率高且易耽誤治療，在此介紹四種常用的檢測方法

1：墨汁染成色法：墨汁染色法是個實驗室最簡單、方便且已展開的方法，墨汁染色法的陽性率和符合率最低，一方面，在發病早期隱球菌數量較少；另一方面，隱球菌主要集中在腦膜或腦室脈絡叢肉芽腫細胞內，穿刺部位對檢出率會有影響。如果穿刺腦脊液時混入血細胞，也會影響隱球菌的檢出率。而且隨著病程進展，大量抗真菌藥物的使用，使治療后的隱球菌出現退形變，有透明的莢膜，在高倍鏡下不易看清或難以辨認。根據可靠資料，陽性率和符合率接近80%。故本方法不利于早期診斷。

2：真菌培養法一直是診斷隱球菌感染的金標準，本方法特異性高，一旦查出就可確診，但其敏感性并沒有PCR方法高。真菌培養法的培養時間是四種方法中最長的，平均需要73h，四種方法中最慢出報告的，因此不利于CM早期診斷。

3：乳膠凝集法的陽性率和符合率都接近90%，可作為早期診斷隱球菌感染非常好的方法。有文獻報道，腦脊液做適當的稀釋可以避免乳膠凝集法假陽性的產生。另外，風濕因子存在也可出現假陽性結果；在隱球菌感染早期，或者高滴度的前帶影響等情況下，乳膠凝集法會出現假陰性結果。PCR方法檢測腦脊液隱球菌的陽性率和符合率分別是100.00%和94.24%，在四種方法中陽性率最高，符合率僅次于乳膠凝集法，而且檢測時間短，操作快速簡便。

總結：墨汁染色法適合早期診斷；真菌培養法敏感性有限，報告時間長；抗乳膠凝集法的特異性和敏感性高，但容易出現假陽性；PCR法情況與抗乳膠凝集法類似。

二、新生隱球菌的流行病學

1894年，Sanfelice首先在桃汁中發現新生隱球菌，我國1940年首次報告。新生隱球菌在組織中呈圓形或橢圓形，直徑（2～20μm）。HE染色陽性，胞壁外常有（3～5μm）的空隙（系莢膜外未著色之故）。PAS染色可見菌體莢膜均呈紅色，菌體為寬厚透明的莢膜，莢膜比菌體大1～3倍，莢膜為致病性隱球菌的標志之一。新生隱球菌按血清學可分為A、B、C、D及AD5個血清型，包括3個變種：grubii變種（血清型A）；新生變種（血清型D、AD）；格特變種（血清型B、C）艾滋病患者合并隱球菌感染主要由新生變種、grubii變種引起。新生隱球菌廣泛存在與土壤和鴿糞中，鴿糞是臨床上最重要的傳染源，中性、干燥的鴿糞利于本菌的生長，其他家禽類排泄物亦能分理出隱球菌，鴿類的遷徙可能有助于隱球菌感染的傳播。我國新生隱球菌血清型分布以AD和A、D為主，A型最多見。新型隱球菌主要感染途徑為吸入空氣中的孢子，隱球菌孢子到達肺部可引起肺部感染，繼而播散至中樞系統及全身，也可通過創傷性皮膚接種及消化道途徑傳播。

三、艾滋病合并隱球菌性腦膜炎的發病機制

HIV感染可促進隱球菌的散播及隱球菌性腦膜炎的發生。HIV病毒主要感染人類CD4+T淋巴細胞，特別是T輔助細胞，T輔助細胞包括Th1和Th2兩個亞群。Th1類細胞主要介導細胞免疫；Th2類細胞主要促進體液免疫及抗體的產生。艾滋病患者體內Th1類細胞及細胞因子顯著減少，這有助于隱球菌感染的播散，同時，HIV感染破壞了血腦屏障的結構和功能，有助于隱球菌的侵入及隱球菌腦膜炎的發生。

新生隱球菌具有是中樞神經系統感染的特性。莢膜多糖、尿素酶、絲氨酸蛋白酶、磷脂酶等隱球菌毒力因子在隱球菌性腦膜炎的發生中均發揮重要作用。

HIV與隱球菌感染之間有相互促進作用，HIV導致的機體免疫力缺陷有助于隱球菌感染，隱球菌也通過一定的機制促進HIV復制。

四、臨床表現

1.只患有隱球菌性腦膜炎最常見者為發熱，體溫37.8℃～40.6℃為不規則發熱；頭痛惡心、嘔吐，頸部有抵抗感者，腦膜刺激征，精神異?；蛞庾R障礙，抽搐，視力異常，顱神經受累。有可能有腦室擴張

2.艾滋病合并新生隱球菌腦波炎患者發病急驟，多呈現急性或亞急性起病，表現為發熱、頭痛、惡心、嘔吐等，多伴頸項強直陽性。40%以上的患者有精神癥狀，如抑郁、淡漠、易激動、譫妄等，腦實質受累者，則可出現偏癱、失語、癲癇發作、意識障礙、昏迷等癥狀，少數患者表現為顱內占位性病變。部分患者可累及腦神經，如視神經、聽神經、面神經和動眼神經等。多數患者出現顱內壓增高，導致患者視、聽功能障礙，急性顱內高壓可導致腦疝，患者可因腦疝而死亡。

五、治療進展

1 真菌類藥物治療

1.1 多烯類藥物

此種藥物進入人體后可準確與真菌細胞膜上存在的麥角固醇結合、提升細胞膜通透性，是真菌內部成分外漏而死亡。兩性霉素B類藥物的有效成分僅在腦脊液中有較低濃度，部分患者對此種藥物治療沒有反應，也有部分患者容易產生不良反應。近年來應用較多的兩性霉素B脂質體有良好的抗真菌效果，且不容易誘發不良反應。此類藥物以兩性霉素B脂質體、兩性霉素B膠態分散體和兩性霉素B脂質體復合體最為常見，效果最佳，但成本較高。

1.1.1兩性霉素B ⑴副作用：采用二性霉素B靜脈滴注單用或合用5氟胞嘧啶治療的8例患者，主要不良反應有發熱頭痛加劇、低血鉀、肝損害各可恢復性視力下降，寒顫與腎損害各4例，胃腸道反應，腹部不適，腎功能受損

⑵療效：但是，單用氟康

哇治療隱球菌性腦膜炎效果似乎并不盡如人意，一組多中心試驗川表明，單用氟康哇（200mg/d ）10周治療艾滋病伴發的隱球菌性腦膜炎患者，CSF轉陰率僅34%，而二性霉素B組轉陰率為40%，而且二性霉素B似乎能更快使CSF轉陰。

⑶用法：前期治療采用二性霉素B間斷鞘內注射與氟康唑靜脈滴注合用，后期治療應用氟康唑或伊曲康唑口服，這種效果最好且毒副作用較小

1.2 此類藥物可對真菌核酸的產生形成抑制、影響真菌繁殖而達到治療目的。其中的氟康唑使用后可快速在腦脊液中形成高濃度的有效成分，感染早期療效甚佳。伊曲康唑理論療效優于氟康唑，打此種藥物使用后腦脊液有效成分偏低，療效不及氟康唑。國外新推出的Pasaclnzole，Ravuconazole，Voriconazole等新興三唑類藥物均為光譜治療藥物，可有效控制深部及表皮真菌繁殖。有學者證實，新推出的Albaconazole療效優于氟康唑。

1.3丙烯胺類藥物

此類藥物進入人體后可對角鯊烯環氧化酶產生抑制作用，導致真菌細胞膜發生破裂而最終死亡。其中的氟胞嘧啶口服使用便可快速形成適宜的濃度產生抑菌效果，但此藥使用過后可產生耐藥性，不建議單獨用藥。

2.藥物治療方案的選擇

2.1 非HIV感染者

每日予以0.7～1.0mg/kg的兩性霉素B+100mg/kg氟胞嘧啶治療，連續6～10周。若為難治性隱腦，靜滴兩性霉素B聯合鞘內靜注，后者單次劑量為0.05～0.1mg，可逐漸增加劑量，最高1mg，鞘內用藥每周2～3次，總量為15～20mg。

2.2 HIV感染者及免疫功能低下者

建議分期治療，急性期予以0.7～1.0mg/（kg·d）、100～150mg/（kg·d）治療；鞏固期每日予以400mg伊曲康唑或氟康唑治療；后期可每日使用200mg氟康唑維持治療。

2.3 顱壓控制

可使用白蛋白、呋塞米、甘露醇等脫水藥物控制顱壓。若檢測到患者顱壓升高幅度在2.4kPa之上，在脫水藥物使用同時予以持續腰穿腦脊液引流，使顱壓低于2kPa或降為原先水平的一半。

注意：肝硬化伴發隱球菌性腦膜炎

由于兩性霉素B對肝有嚴重的損害作用，因此不宜做常規藥物，而氟康唑的效果不明顯，因此此類病人需根據詳細的情況用藥，以防病人因肝損傷而死亡

六、兒童隱球菌性腦膜炎早期診斷

兒童隱球菌性腦膜炎早期癥狀不典型，不同年齡段臨床表現均有差異，因此，早期診斷主要依靠詳細詢問病史，包括密切接觸史和高危因素史，周密的臨床觀察及對該病的高度警惕性。凡有鴿糞接觸史及高危因素的患兒，當出現頭痛、惡心、易激怒、嗜睡、反應遲鈍、精神恍惚、行為異常和記憶力、判斷力下降等應警惕。而較小的患兒表現為哭鬧、尖叫，腦神經損害主要是視力模糊、復視和面部麻木，多數患者無發熱或輕中度發熱，也有表現為高熱。大部分患者只有輕微的甚至沒有頸項強直。視神經盤水腫約見1/3患者，腦神經麻痹發生率大約是1/5.。失明可見于疾病進展的患者，因隱球菌直接侵犯視神經通路、粘連性蛛網膜炎、脈絡膜視網膜炎以及顱內壓升高可直接損傷視神經。部分患者神經反應亢進，可引出踝陣攣或足底反射，也可見舞蹈癥。除腦神經損傷外，早中期患者局灶的感覺和運動障礙非常少，癥狀消失后再發可能提示腦積水的存在。

七、誤診分析

隱球菌性腦膜炎及結核性腦膜炎患者的臨床表現、腦脊液改變和頭顱CT或MRI特點，結果提示兩者在臨床癥狀、腦脊液白細胞數、蛋白、氯化物、腺苷脫氨酶含量和頭顱CT或MRI表現等方面差異無統計學意義（P>0.05），故容易將隱球菌性腦膜炎誤診為結核性腦膜炎。因此，臨床考慮結核性腦膜炎，經正規抗結核治療，期臨床療效及實驗室檢查化驗指標好轉不明顯者，要警惕結核性腦膜炎并發新型隱球菌性腦膜炎，應及時做腦脊液墨汁染色，反復找新型隱球菌。

八、人體自身對抗免疫作用

1雷文知1等根據試驗表明，隱球菌性腦膜炎患者在治療前CD4 + T 細胞中Th9 細胞的比值與正常對照相比無統計學差異，但Th17 細胞的比值與健康對照相比明顯下調，經過治療后，Th9 和Th17 細胞的比值均明顯升高，以Th17 的升高更為明顯，且在治療好轉的患者中差異更大，而治療無效的患者Th9 和Th17 細胞的比值在治療前后均無統計學差異。我們推測，Th17 細胞介導的免疫通路對于隱球菌性腦膜炎患者有效清除隱球菌的感染起重要作用，而Th17 細胞的缺乏或者不應答是導致隱球菌性腦膜炎患者中隱球菌產生免疫逃逸的重要突破口。在小鼠實驗中也發現IL-17A 缺陷小鼠具有較低的真菌清除能力。Th17 細胞在特定條件下也能大量分泌IL-9，正向調節Th9 細胞的產生。在體外培養中也發現，Th17 細胞的減少可能導致IL-9 和IL-9 受體的衰減。隨著Th17 細胞比值的升高，Th9 細胞在治療后的隱球菌性腦膜炎患者中比值也與健康對照相比有明顯上調。

2.1 hFgl2蛋白能夠表達于隱球菌性腦膜炎患者及健康對照組外周血單核細胞和中性粒細胞中，且表達程度相當。

2.2 hFgl2蛋白能夠表達于隱球菌性腦膜炎腦脊液單核細胞和中性粒細胞中，且表達程度相當。

2.3 hFgl2蛋白在隱球菌性腦膜炎患者外周血中單核細胞和中性粒細胞的表達與在腦脊液單核細胞和中性粒細胞中的表達一致，其表達強度均隨著病情的減輕而逐漸下降.

2.4隱球菌性腦膜炎患者hFgl2蛋白表達的強度與腦脊液隱球菌數成正相關。

九、隱球菌性腦膜炎應用腰椎置管鞘內注射治療的護理

臨床治療隱球菌性腦膜炎疾病采用兩性霉素B藥物，但靜脈注射兩性霉素B藥物副作用多且難以通過血腦屏障到達感染部位。治療效果不明顯。因此鞘內注射兩性霉素B成為治療隱球菌性腦膜炎疾病的重要方法，但反復腰穿實施鞘內注射給藥量低，且操作復雜。所以采用了腰椎置管鞘內注射方式治療隱球菌性腦膜炎基本，此為護理措施

護理措施

1及時更換敷料?；颊叽┐讨委熎陂g應及時更換敷料，一般情況下置管后24h

更換1次，第一次更換后每周更換3次。護理人員查房時應及時觀察敷料，若發現敷料松動或潮濕，應立即更換。

2密切觀察。鞘內注射兩性霉索B后，護理人員應囑咐患者去枕平臥4h一6h，密切觀察患者的生命體征變化情況，觀察患者有無頭痛、嘔吐等癥狀，密切注意穿刺部位是否出血、連接器是否出現漏液情況。

3預防并發癥。經鞘內注射兩性霉素B后，患者出現短暫性尿潴留，腰部會現輕度疼痛等癥狀，出現上述癥狀后可以通過局部敷熱方法予以處理，在下次注射時應增加混合腦脊液的總量，注射時降低速度。

4實施心理護理。隱球菌性腦膜炎治療時間較長，而且腰椎置管過程中患者會出現疼痛等癥狀，給患者的生活造成一定不便，患者多會出現焦慮、恐懼等心理，這就要求護理人員應加強對患者的心理護理.幫助患者樹立戰勝疾病的信心，向患者詳細解釋疾病的治療情況，日常工作中多與患者溝通、交流，緩解患者的心理壓力。

十、總結

隱球菌性腦膜炎為新型的腦膜炎，目前完全有效的治療手段并不多，主要體現在切實有效的藥物，一般早期患者治愈率較高，但早期診斷是目前臨床上實施治療的難題，行之有效的方法有四種，各有優缺點，而且早期癥狀與結核性腦膜炎過于類似，實驗室診斷也未必可靠，給臨床診斷造成了巨大的困難，今后的研究方向應會注重于早期的實驗室檢測和藥物的研究較為妥當。

【參考文獻】

[1]雷文知 桑軍軍 潘煒華 廖萬清；隱球菌性腦膜炎患者外周血中Th9 和Th17細胞水平變化及意義