冀產遠志與卵葉遠志的含量測定研究

王永艷

河北省邯鄲市第一醫院藥劑科，河北邯鄲　056002

冀產遠志與卵葉遠志的含量測定研究

王永艷

河北省邯鄲市第一醫院藥劑科，河北邯鄲056002

目的探討冀產遠志與卵葉遠志的種間差異，以指導臨床合理用藥。方法采用高效液相色譜法測定冀產遠志與卵葉遠志在不同采集期、不同用藥部位中有效活性成分遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮?。 色譜柱為Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm），流動相為甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），檢測波長為230 nm，流速為1.0 mL/min，柱溫30℃。結果各組分分離度良好，遠志口山酮Ⅲ在0.46003～4.6003 mg/mL濃度范圍內與峰面積線性關系良好（r=0.999）；3，6二芥子?；崽窃?.41587～4.15872 mg/mL濃度范圍內與峰面積線性關系良好（r= 0.999），平均回收率分別為98.10%（RSD=1.80%）和98.13%（RSD=1.63%），7批樣品中遠志山酮Ⅲ的含量分別為0.113、0.078、0.121、0.105、0.082、0.054、-0.003 g/g，3，6二芥子?；崽堑暮繛?.665、0.392、0.390、0.453、0.394、0.586、0.411 g/g。結論該方法簡便、快速，為冀產遠志的品種開發提供科學數據。

遠志；卵葉遠志；含量測定；高效液相色譜法

［Abstract］Objective To discuss the difference between Polygala tenuifolia Wi11d.and Polygala sibirica L.for guiding c1inica1 rationa1 drug use.Methods Effective active ingredient Po1yga1axanthone and 3，6'-Disinapoy1sucrose content of different co11ection period and parts of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d and Po1yga1a sibirica L were measured by HPLC method.The determination was performed on Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）co1umn with methano1-0.05%phosphate acid（70∶30）as mobi1e phase at detection wave1ength of 230 nm，the f1ow rate was 1.0 mL/min，the co1umn temperature was set at 30℃.Results The components were separated comp1ete1y.The good 1inear re1ationship of Po1yga1axanthoneⅢoccurred in the range of 0.460 03～4.6003 mg/mL（r=0.999），the good 1inear re1ationship of 3，6'-Disinapoy1sucrose in the range of 0.415 87～4.158 72 mg/mL（r=0.999）.The average recoveries were 98.10%（RSD=1.80%）and 98.13%（RSD=1.63%）.In the 7 groups，the content of Po1yga1axanthoneⅢwas 0.113，0.078，0.121，0.105，0.082，0.054，-0.003 g/g，3，6'-Disinapoy1sucrose was 0.665，0.392，0.390，0.453，0.394，0.586，0.411 g/g.Conclusion The method is simp1e and quick，which can be used for rationa1 deve1opment of Po1yga1a tenuifo1ia Wi11d.

［Key words］Polygala tenuifolia Wi11d.；Polygala sibirica L.；Content determination；HPLC method

遠志為遠志科植物遠志（Polygala tenuifolia Wi11d.）或卵葉遠志（Polygala sibirica L.）的干燥根。春秋兩季采挖。性苦、辛、溫，歸心、腎、肺經。有益智安神、交通心腎、消腫祛痰的功效［1］。臨床用于抗焦慮、鎮靜催眠，祛痰鎮咳、抗衰老、抗抑郁、消腫利尿等［2-7］?！吨袊幍洹?015年版一部的標準中沒有區分遠志與卵葉遠志的種間區別，有關藥用遠志的研究主要集中在細葉遠志的化學成分、含量測定、藥理作用、制劑質量控制、栽培技術等方面［8-15］。

近年來，卵葉遠志的研究也逐漸展開，滕紅梅等［16］對卵葉遠志的生藥學研究，宋月林等［17-18］對卵葉遠志的地上部分進行了化學成分研究，周雨虹等［19］對卵葉遠志根的化學成分研究，卵葉遠志的含量測定僅限于遠志皂苷成分［20］等。遠志與卵葉遠志的對比研究還有待開展，本研究針對冀產遠志與卵葉遠志中有效成分遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮窟M行比對研究，比較兩種間的差別，為開發冀產遠志資源提供技術參考。

1　儀器與材料

GC2010AT高效液相色譜儀（日本島津），Labso1ution工作站，紫外檢測器，AUW120D型電子天平（日本島津）。甲醇、磷酸均為分析純，乙腈為色譜純，水為純化水，遠志山酮Ⅲ對照品（中國食品藥品檢定研究院；批號：116050-201203）；3，6二芥子?；崽菍φ掌罚ㄖ袊称匪幤窓z定研究院；批號：11848-201303）；6批藥材均由邯鄲市藥品檢驗中心孔增科主任藥師鑒定（產地：涉縣固鎮、涉縣九峰山、涉縣固鎮、武安、涉縣九峰山、涉縣小井）。

2　方法與結果

2.1色譜條件及系統性試驗

色譜柱：Sunfire C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）為固定相，流動相：甲醇-0.05%磷酸溶液（70∶30），檢測波長為320 nm，柱溫為室溫，進樣量為10 μL。在以上色譜條件下，各組分分離度良好。見圖1。

圖1　HPLC色譜圖

2.2對照品溶液的制備

精密稱取遠志山酮Ⅲ對照品12.03 mg與3，6二芥子?；崽菍φ掌?0.83 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液。

2.3供試品溶液的制備

取樣品遠志（卵葉遠志）細粉（過四號篩）約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加入70%甲醇25 mL，精密稱定，加熱回流1.5 h，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液即得。

2.4線性關系的考察

取對照品溶液，分別精密量取1、2.5、5、10 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別進樣10 μL于高效液相色譜儀中，按上述色譜條件進行峰面積測定，以質量濃度X為橫坐標，峰面積Y為縱坐標，進行線性回歸，遠志山酮Ⅲ回歸方程：Y= 2×106X+137 647，r=0.999，結果表明遠志山酮Ⅲ質量濃度在0.460 03～4.6003 mg/mL范圍內呈良好線性關系；3，6二芥子?；崽腔貧w方程：Y=2×106X+ 106 030，r=0.999，結果表明，3，6二芥子?；崽琴|量濃度在0.415 87～4.158 72 mg/mL范圍內呈良好線性關系。

2.5精密度試驗

精密吸取混合對照品溶液 10 μL，連續進樣5次，記錄色譜圖，遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑腞SD分別為0.37%、0.41%，結果表明儀器精密度良好。

2.6重復性試驗

按“2.2.3”項下方法平行制備5份供試品溶液按“2.2.1”項下色譜條件進行測定，測得遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮糠謩e為0.105%、0.453%，表明重復性良好。

2.7穩定性試驗

取供試品溶液10 μL，分別在0、2、4、6、8、12 h進樣，共測定6次，其RSD=1.5%，表明該溶液12 h內基本穩定。

2.8加樣回收率試驗

取已知含量的供試品細粉（遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮糠謩e為0.105%、0.453%）約0.5 g，精密稱定6份，再分別精密加混合對照品儲備液1 mL，按“2.2.3”項下供試品溶液的制備方法，進樣測定，遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽?，平均回收率為98.10%、98.13%，RSD分別為1.80%、1.63%。結果見表1。

表1 回收率測定結果

2.9樣品含量測定

取樣品，按上述供試品溶液制備方法制備，精密量取供試品溶液和對照品溶液10 μL，注入液相色譜儀測定。結果見表2。

表2　樣品測定結果（n=6）

3　討論

通過采用液相色譜法對遠志和卵葉遠志的不同采摘期及不同部位中有效活性成分遠志山酮Ⅲ與3，6二芥子?；崽堑暮窟M行比對研究發現，冀產卵葉遠志根中兩種成分的含量高于與冀產遠志根，建議可將卵葉遠志作為遠志的開發品種之一；地上部分（遠志小草）幾乎不含遠志山酮Ⅲ，3，6二芥子?；崽堑暮窟€較高，并且二者根中兩種成分的含量均高于其全草，說明這與傳統習慣把根作為主要藥用部位是一致的；二者3，6二芥子?；崽堑暮窟h大于遠志山酮Ⅲ，且秋季采摘的3，6二芥子?；崽呛扛哂诖杭?，遠志山酮Ⅲ含量春季采摘的大大高于秋季，原因北方日照時間長，陽光充足，糖分含量高，酮成分含量較低，可根據藥理作用選擇合理的采摘期。

經方法學考證，該方法簡便快捷、準確，通過測定兩種成分的含量指標，可用于有效區別冀產遠志及卵葉遠志的種間差異，為冀產遠志的品種開發提供科學依據。

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Determination research of Polygala tenuifolia Willd.and Polygala sibirica L.

WANG Yongyan
Department of Pharmacy，the First Hospita1 of Handan，Hebei Province，Handan056002，China

R927.2

A

1673-7210（2016）04（c）-0132-04

河北省中醫藥管理局科研計劃項目（2010184）。

王永艷（1974-），女，碩士，副主任藥師；研究方向：藥物的臨床應用及藥物分析。

2016-01-22本文編輯：趙魯楓）