山羊接種小反芻獸疫疫苗后不同檢測試劑的檢測效果田間試驗

李芳++蘇益瓊++羅生++覃周嵐++覃萬福++吳雙燕++余波++經孝紅++施佳露++梁麗娟

摘要 為了切實掌握山羊小反芻獸疫疫苗免疫狀況，評估免疫效果。通過用不同廠家的試劑盒來評估小反芻獸疫疫苗的大田效果，其中一種是由青島立見診斷技術發展中心生產的小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測抗體試劑盒，另一種為法國ID-VET生產的ID Screen？誖PPR Competition小反芻獸疫抗體檢測試劑盒。結果表明，其檢測結果一致，只是法國ID-VET生產的試劑盒檢測的OD值較青島立見的高0.07。說明國產試劑盒與進口試劑盒效果一致，但青島立見的試劑盒經濟實惠許多。

關鍵詞 山羊；小反芻獸疫；疫苗；檢測試劑；效果；田間試驗

中圖分類號 F858.27 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）01-0233-01

小反芻獸疫（Peste des Petits Ruminants，PPR）也稱羊瘟，是由副粘病毒科麻疹病毒屬的小反芻獸疫病毒（PPRV）引起的，以發熱、口炎、腹瀉、肺炎為特征的一種急性接觸性傳染病。山羊和綿羊易感，山羊發病率和死亡率均較高。該病是我國的一類動物疫病，OIE規定疫情必須上報[1]。2014年在我國大范圍暴發，一直呈擴大趨勢，成為了嚴重危害畜牧業生產安全的重大跨國動物疫病之一[2]。2014年我國農業部共發布小反芻獸疫疫情260起，涉及21個省份，給我國的養羊業造成了巨大損失[3]。2015年我國將其列為強制免疫病種，為了準確掌握山羊小反芻獸疫疫苗臨床免疫狀況和評估免疫效果，研究了小反芻獸疫疫苗不同劑量免疫接種山羊的田間試驗，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 疫苗。試驗所使用疫苗為政府采購，由新疆天康畜牧生物技術股份有限公司生產（批號：2015005-1，規格100頭份/瓶；批號：2016020，規格50頭份/瓶），凍干苗。試驗用疫苗均取自廣西鹿寨縣疫苗儲備庫。

1.1.2 試驗羊場。臨床免疫試驗羊場為鹿寨縣中渡鎮、平山鎮、黃冕鎮的8家羊場，中渡鎮、平山鎮的羊場位于山腳，天然防疫屏障良好，飼養的是本地山羊，方式為放養，黃冕鎮的羊場為圈養；場主經驗豐富，注重防疫，管理意識較強。

1.1.3 檢測試劑。小反芻獸疫阻斷ELISA抗體檢測抗體試劑盒（批號：201513）由青島立見診斷技術發展中心生產；小反芻獸疫抗體檢測抗體試劑盒（ID Screen？誖PPR Competition，批號：923）由法國ID-VET生產。

1.2 試驗方法

1.2.1 免疫試驗。嚴格按照說明書操作，每只羊皮下注射疫苗1頭份，免疫接種后對羊只進行臨床觀察。2015年采集注射批號為2015005-1的小反芻獸疫疫苗的羊場5個，免疫4周后每個場采集15份血樣，分離血清，冷凍待檢。2016年采集注射批號2016020的小反芻獸疫疫苗的羊場3個，免疫4周后每個場采集22份血樣、分離血清，冷凍待檢。

1.2.2 檢測方法。阻斷ELISA抗體檢測抗體試劑盒，用青島立見診斷技術發展中心生產的試劑盒檢測血清中的PPRV抗體（阻斷ELISA法，PB>50為陽性），嚴格按試劑盒的操作說明及判定標準進行；競爭酶聯免疫吸附試驗（GB/T 27982—2011）[4]，用法國ID-VET生產的ID Screen？誖PPR Competition小反芻獸疫抗體檢測試劑盒檢測血清中的PPRV抗體（競爭ELISA法，S/N≤50%為陽性），嚴格按試劑盒的操作說明及判定標準進行。

2 結果與分析

臨床應用安全性好，免疫后的羊只采食正常，精神狀況良好，沒有免疫反應死亡，生長發育正常。免疫4周后抗體檢測結果見表1。

2015年隨機抽取5個場，其中4個場的抗體轉陽率都超過農業部規定的70%，而C場的抗體轉陽率只有13.33%，可能是操作失誤致使疫苗失效所致。2016年隨機抽取3個場，其中2個場的抗體轉陽率都超過農業部規定的70%，而F場的抗體轉陽率為54.17%，原因是當年出生的小羊還未進行免疫。隨機抽取的2016年的抗體轉陽率比2015年高5.82個百分點，說明養殖戶的防疫水平有了進一步的提升。

通過比較，試劑盒競爭ELISA法與阻斷ELISA法的檢測的結果一致，只是OD值相差0.070，基本可以忽略，另外，在操作方法上，阻斷ELISA試劑盒比競爭ELISA試劑盒的洗滌次數多1次，時間較長，但從經濟效益考慮，青島立見生產的阻斷ELISA試劑盒（平均約12元/份）比法國ID-VET生產的競爭ELISA試劑盒（平均約30元/份）經濟實惠許多[5-6]。

3 結論

通過試驗，所有免疫動物接種后沒有出現明顯的免疫副反應，說明該疫苗具有良好的免疫安全性，可以大規模使用。同時，試劑盒競爭ELISA法與阻斷ELISA法的檢測結果一致，僅OD值相差0.070，且阻斷ELISA試劑盒比競爭ELISA試劑盒更經濟實惠。

4 參考文獻

[1] 薛青紅，印春生，李 寧，等.小反芻獸疫活疫苗效力評[J].中國獸醫學報，2011，31（9）：1276-1278.

[2] 龍云鳳，劉曉慧，周曉黎，等.小反芻獸疫流行病學及防控研究進展[J].動物醫學進展，2012，33（5）：94-98.

[3] 王昌建，林源，何世成，等.湖南省小反芻獸疫防控措施及評估[J].畜牧獸醫科技信息，2015（7）：19-20.

[4] 刁新育，楊林.基層動物疫病監測指導手冊[M].北京：中國農業出版社，2013：75-76.

[5] 張東東，寧宜寶，劉燦，等.兩種豬瘟病毒ELISA抗體檢測試劑盒對疫苗免疫豬血清抗體檢測的比較試驗[J].中國獸醫雜志，2016（7）：28-29.

[6] 李娟，陳震，霍子威，等.殘余牛血清白蛋白含量檢測試劑盒抗干擾性研究[J].微生物學免疫學進展，2010（4）：39-41.