HR—HPV DNA PCR和TCT聯合檢測在宮頸癌前病變診斷中的應用價值

張鐵英

【摘要】 目的 研究宮頸癌前病變患者應用高危型人乳頭瘤病毒（HR-HPV）DNA聚合酶鏈反應（PCR）與液基薄層細胞學檢查（TCT）聯合檢測的診斷價值。方法 474例行宮頸癌前病變篩查的患者， 均進行HR-HPV DNA PCR與TCT檢測， 觀察診斷價值。結果 474例患者中， 有270例患者TCT結果存在異常， 而通過活檢顯示存在72例異常者， TCT檢測符合率為26.67%（72/270）。有130例（27.43%）TCT陽性并HPV陽性者患者， 其中鱗狀細胞癌、高及低度鱗狀上皮內病變、非典型鱗狀上皮細胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比， 差異均具有統計學意義 （P<0.05）。結論 宮頸癌前病變患者應用HR-HPV DNA PCR與TCT聯合檢測的診斷價值及推廣價值較高。

【關鍵詞】 宮頸癌前病變；液基薄層細胞學檢查；聚合酶鏈反應；高危型人乳頭瘤病毒

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.02.030

宮頸癌屬于婦科一種常見腫瘤， 具有較高患病率和病死率， 對患者生命安全造成嚴重威脅， 臨床對癌前病變和宮頸癌進行早期篩查與采取有效防治措施對生存率提高發揮著十分重要作用[1-4]。本文分析本院近1年對宮頸癌前病變進行篩查的474例患者臨床資料， 以提高疾病診斷準確率， 盡早實施有效防治舉措， 從而促進患者生存率提高， 現將相關研究內容作如下闡述。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 分析本院2015年11月～2016年11月對宮頸癌前病變進行篩查的474例患者臨床資料， 年齡21～66歲， 平均年齡（42.30±7.92）歲， 孕次1～3次， 平均孕次（1.86±0.39）次，

受教育程度：初中至高中159例， 大專至本科175例， 本科以上140例。本文方案均得到醫學倫理委員會批準， 對象均自愿簽署同意書。

1. 2 儀器與檢測方法

1. 2. 1 TCT 將患者宮頸表面的黏液擦除， 把宮頸細胞刷置入距離宮頸管內約1 cm位置， 進行順時針旋轉， 圈數為5圈， 將其取出置于細胞保存液當中， 針對瓶中收集的細胞通過Prep 2000系統予以薄片涂片染色， 待TCT制片之后由經驗豐富醫師進行閱片。

1. 2. 2 HR-HPV DNA PCR 選擇由蘇州天隆生物科技有限公司提供的核酸擴增儀檢測系統對PCR進行擴增和顯色等， 用原裝的配套試劑HR-HPV核酸定量加以檢測， 采取PCR熒光分析方法， 且將宮頸刷置患者宮頸口， 轉4圈， 將宮頸刷置于備有1 ml洗脫液的洗脫管中， 置零下20℃冰箱待檢或者立即送檢。檢測時把宮頸刷于洗脫管中漂洗， 將洗脫液完全轉移至1.50 ml微量離心管內， 進行離心， 時間維持10 min， 將上清液去除， 對管底細胞快予以保留， 且加50 μl裂解液沉淀， 用100℃水浴加熱10 min， 進行離心， 時間為10 min， 將上清液保留待用。取1 μl DNA抽提溶液， 置HPV PCR的擴增體系， 嚴格遵照擴增程序予以擴增。

1. 2. 3 病理學 針對TCT與HR-HPV DNA PCR檢測結果均通過宮頸錐切下或者借助電子陰道鏡實施病理性活檢， 組織病理學子宮頸上皮內新生病灶分級依據Riehart標準[5]對診斷結果進行評定。

1. 3 統計學方法 采用SPSS21.0統計學軟件進行統計分析。計數資料以率（%）表示， 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2. 1 TCT檢測結果 宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有270例患者TCT結果存在異常， 而通過活檢顯示存在72例異常者， TCT檢測符合率為26.67%（72/270）。

2. 2 宮頸癌前病變不同類型HPV感染率 宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有130例（27.43%）TCT陽性并HPV陽性者患者， 其中鱗狀細胞癌、高及低度鱗狀上皮內病變、非典型鱗狀上皮細胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比， 差異均具有統計學意義 （P<0.05）。見表1。

2. 3 TCT與HR-HPV DNA PCR單用和聯合檢測特異度、敏感度和陽性預測值 通過活檢確診子宮頸上皮內新生病灶分級Ⅱ級以上患者36例， TCT 30例陽性， HR-HPV 33例陽性， 且HR-HPV DNA PCR與TCT聯合檢測敏感度100.00%和陽性預測值27.69%均較單純TCT、HR-HPV高（P<0.05）。

3 討論

臨床相關研究表明：系統性宮頸篩查可有效降低疾病患病率， 對患者生存率提高至關重要， 臨床需引起臨床醫師和患者重視， 并積極尋求可靠檢測方法[6-12]。

本研究結果顯示：宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有270例患者TCT結果存在異常， 而通過活檢顯示存在72例異常者， TCT檢測符合率為26.67%（72/270）。表明臨床對宮頸癌前病變篩查者應用TCT檢測的異常檢測符合率較低， 易出現漏診， 單一檢測價值不高。宮頸癌前病變篩查的474例患者中， 有130例（27.43%）TCT陽性并HPV陽性者患者， 其中鱗狀細胞癌、高及低度鱗狀上皮內病變、非典型鱗狀上皮細胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率對比， 差異均具有統計學意義 （P<0.05） 。鱗狀細胞癌與高、低度鱗狀上皮內病變及非典型鱗狀上皮細胞HPV、低危型HPV、HR-HPV感染率顯示高度差異， 其中非典型鱗狀上皮細胞HPV感染幾率60.00%均較鱗狀細胞癌3.08%與高、低度鱗狀上皮內病變6.15%、30.77%高， HR-HPV感染率18.18均較鱗狀細胞癌100.00%與高度鱗狀上皮內病變71.43%低， 且HR-HPV DNA PCR與TCT聯合檢測敏感度100.00%和陽性預測值27.69%均較單純TCT、HR-HPV高， 和鄧弘[5]研究結果具有較高一致性。提示：伴隨宮頸癌前病變的級別升高， HR-HPV感染率也不斷升高， HR-HPV感染和宮頸病變嚴重度呈現正相關性， 且感染HPV危險類型和細胞學分級存在一致性， 高危型患者細胞分化較差， 低危型患者細胞分化較好[13-20]。

總之， 臨床對宮頸癌前病變者應用HR-HPV DNA PCR與TCT聯合檢測具有較高價值， 屬于宮頸病變篩查一種可靠方法， 有利于盡早發現宮頸存在的異常細胞， 為疾病防治舉措開展提供重要依據， 從而促進患者病情改善和生存率提高， 臨床應用及推廣價值較高。

參考文獻

[1] 康慧杰， 王金桃， 高晨菲， 等. DNA甲基轉移酶1與甲基-CpG-結合蛋白2異常表達在宮頸病變中的作用及相互關系.中華流行病學雜志， 2013， 34（12）：1223-1227.

[2] 趙宇倩， 宋艷， 趙方輝， 等.陰道鏡下四象限活檢在宮頸癌前病變篩查中的價值.中華腫瘤雜志， 2015， 37（11）：875-879.

[3] 常小壘， 郭科軍， 張頤.HPV亞型與子宮頸癌前病變及癌變的關系探討.中國醫科大學學報， 2014， 43（8）：720-723， 727.

[4] 柯水香， 郭玲.高危HPV病毒分型與液基細胞學檢查在早期宮頸病變篩查中的臨床價值.海南醫學院學報， 2014， 20（6）： 825-827， 831.

[5] 鄧弘.宮頸液基細胞學檢測在宮頸癌防治中的作用.中國藥物與臨床， 2013， 13（2）：241-242.

[6] 陳炎添， 陳青龍， 熊燕， 等. HR-HPVDNAPCR聯合TCT檢測對宮頸癌前病變的診斷價值. 檢驗醫學， 2013， 28（6）：516-518.

[7] 宋林林， 李迎莉. 宮頸癌及癌前病變篩查中TCT和HPV-DNA聯合檢測的分析研究. 中國傷殘醫學， 2012（12）：44-45.

[8] 畢倩波. 宮頸TCT和HPV-DNA聯合檢測在宮頸癌前病變中的診斷意義. 吉林醫學， 2015（14）：3027-3028.

[9] 夏莉花. 液基細胞學檢查聯合HR-HPV DNA PCR檢測對宮頸癌前病變篩查的應用評價. 醫學理論與實踐， 2016（21）：2973-2974.

[10] 王娟利. 超薄液基細胞學和人乳頭瘤病毒檢測在宮頸癌和癌前病變篩查中的價值. 中國腫瘤臨床與康復， 2014（5）：528-530.

[11] 熊煒， 陳萰. TCT和HPV-DNA聯合檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的應用價值. 中國計劃生育和婦產科， 2015（12）：45-47.

[12] 汪永強， 鄢志麗， 袁平宗， 等. 高危HPV、TCT、DNA定量對宮頸癌及癌前病變的診斷價值. 中國衛生檢驗雜志， 2015（16）： 2716-2719.

[13] 李瑛. 腫瘤標志物聯合TCT與HPV DNA檢測在宮頸癌及癌前病變中的臨床意義. 現代中西醫結合雜志， 2016， 25（1）：92-93.

[14] 王欒玲. TCT和HPV-DNA檢測在宮頸癌前病變篩查中的臨床應用. 四川醫學， 2008， 29（10）：1386-1387.

[15] 馬秋麗. 宮頸癌及癌前病變篩查中TCT和HPV-DNA聯合檢測的應用分析. 中國醫藥指南， 2012， 10（3）：102-103.

[16] 陸潔清. TCT聯合HPV檢測在宮頸癌前病變診斷中的價值. 實用癌癥雜志， 2013， 28（5）：550-552.

[17] 陸枰， 蔣云芬， 金龍， 等. 兩種方法聯合檢測在宮頸病變篩查中的應用. 當代醫學， 2012（36）：42-43.

[18] 潘小利， 張子云， 張連云， 等. 高危型人乳頭瘤病毒DNA檢測在宮頸癌篩查中的應用. 中國婦幼保健， 2009， 24（16）：2278-2280.

[19] 孫曉莉， 高美華， 王在秋， 等. HPV-DNA與TCT聯合檢測在宮頸癌診斷中的應用. 現代生物醫學進展， 2012， 12（9）：1745-1747.

[20] 李沛， 許云， 杭國琴， 等. TCT聯合高危型HPV DNA檢測在宮頸病變篩查中的診斷價值. 國際檢驗醫學雜志， 2012， 33（9）： 1123-1125.

[收稿日期：2017-01-09]