油茶籽油及枯餅提取物的抗腫瘤活性研究

葉洲辰　吳友根　張軍鋒　胡新文　于靖　周開兵　林尤奮　王健　陳健妙

摘 要 采用噻唑藍（MTT）法測定7種油茶籽油（茶油）及枯餅提取物的抗腫瘤活性，并通過福林-酚法和三氯化鋁法對提取物中總酚和總黃酮的含量進行測定。結果表明，7種茶油中瓊海茶油（炒）總酚（151.04 μg/g）和總黃酮（1.37 mg/g）含量最高，7種枯餅中總酚含量差異不顯著，莆田枯餅（蒸）中總黃酮含量（5.55 mg/g）高于其他6種枯餅；7種茶油及枯餅提取物均具有明顯的抗腫瘤活性，且在1～50 μg/mL的劑量范圍內，對人肺癌細胞株（Lewis）、黑色素瘤細胞株（B16）及乳腺癌細胞株（SCC891）的增殖有不同程度的抑制作用，呈明顯的劑量依賴關系。因此，開發利用油茶抗癌活性具有潛在的醫用價值和經濟效益。

關鍵詞 油茶；總酚；總黃酮；抗腫瘤活性

中圖分類號 R979.1 文獻標識碼 A

Abstract The anticancer activities of oils and cakes of Camellia spp. were detected by MTT in this paper. And the total phenolics and total flavonoids were measured by Folin-Ciocalteu reagent and aluminium chloride reagent， respectively. The results showed that the content of total phenolic（151.04 μg/g）and total flavonoid（1.37 mg/g）of the oil produced by stir-frying and squeezing from Qionghai exceeded those of the other samples. The total phenol content in seven cakes of Camellia spp. had no significant difference， and the total flavonoid content of the cake produced by steaming and squeezing from Putian was higher than other samples. The specific anticancer activities were clear from the oils and cakes of Camellia spp.. And their antiproliferative activities to lung cancer（Lewis）， melanoma（B16）and breast cancer（SCC891）cells in a range of concentrations from 1 to 50 μg/mL were increased in dose-dependent manner. Therefore， it had potential medical values and economic benefits to develop the anticancer effect of Camellia spp..

Key words Camellia spp.； total phenolics； total flavonoids； anticancer activities

doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2017.07.007

油茶（Camellia spp.）隸屬山茶科（Theaceae）山茶屬（Camellia），是我國重要的木本油料作物，世界四大木本油料樹種之一，具有較高的經濟價值和生態效益[1]。油茶在中國有2300多年的栽培和利用歷史，主要分布在我國的長江流域及其以南地區，資源非常豐富[2-3]。油茶籽經浸出或壓榨即可得到茶油，是一種綠色、生態和高營養的保健油，是食用油中的珍品，富含不飽和脂肪酸、角鯊烯和生育酚等，具有清熱化濕，殺蟲解毒的功效，有“東方橄欖油”之稱[4-5]；枯餅為茶籽榨油后的副產物，其利用率相對較低，現代研究發現，枯餅中富含茶皂素、黃酮、多糖及多酚等成分，具有減肥、降血糖、抑菌、消炎、抗衰老及預防癌癥等功效，若能對枯餅加以有效利用，將大大提高油茶利用率并產生很高的經濟效益[6-7]。

油茶在海南經過長期的引種馴化，產生了本地特有的栽培種[8]，其所產的茶油一般被當地居民用來治療燒傷、燙傷、胃病及口腔潰瘍等疾病。但目前關于該栽培種的研究報道較少，特別是抗腫瘤活性。因此，筆者通過體外觀察海南瓊海油茶及大陸其他優良品種油茶的茶油及枯餅提取物對人肺癌細胞株（Lewis）、黑色素瘤細胞株（B16）和乳腺癌細胞株（SCC891）增殖的影響，旨在為評價茶油藥用價值提供理論依據，并為發掘枯餅等油茶副產品的新用途奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 植物材料 實驗所用油茶果分別采自海南瓊海、廣西岑溪、江西宜春、福建莆田和湖南岳陽5個市區，每個市區選擇3個具有代表性且種植面積較大的采樣點，選取長勢、樹齡以及果實大小比較一致的油茶樹作為采樣株，由海南大學楊好偉教授鑒定為Camellia spp.。采集時間為2015年10～12月，各市區混合樣品均約為2.00 kg，經自然風干，脫蒲，去殼后，將油茶籽烘干至恒重（60 ℃，48 h），統一在瓊海白石山榨油廠進行加工處理。其中瓊海油茶與岑溪油茶分別采用炒制—壓榨法和熱蒸—壓榨法兩種加工方法各得兩種不同的茶油及茶枯餅，而宜春油茶、岳陽油茶、莆田油茶的加工工藝統一為熱蒸—壓榨法，樣品來源及加工工藝見表1。熱蒸—壓榨工藝和炒制—壓榨工藝是目前加工廠或作坊較為常用的生產食用油的方法，也是市場所銷售茶油的主要加工工藝，具有一定代表性。

1.1.2 細胞株 人肺癌細胞株（Lewis）、黑色素瘤細胞株（B16）以及乳腺癌細胞株（SCC891）由中國藥科大學酶工程實驗室提供，5% CO2，37 ℃恒濕條件下培養。

1.1.3 藥物與試劑 刀豆蛋白（美國Sigma公司），四噻唑藍（MTT，美國Sigma公司），RPMI-1640細胞培養基（美國Gibco公司），臺盼藍染色液（美國Beckman coulter公司），二甲基亞楓（DMSO，上海阿拉丁生化科技有限公司），福林-酚（上海阿拉丁生化科技有限公司），沒食子酸標準品和蘆丁標準品（成都Herbpurify有限公司），乙醇，三氯甲烷，乙酸乙酯，碳酸鈉，亞硝酸鈉和硝酸鋁（分析純，南京化學試劑有限公司）。

1.1.4 主要儀器和設備 細胞培養瓶，96孔細胞培養板和二氧化碳培養箱（美國Thermo Scientific公司），Bio-Rad 550型酶標儀（美國Bio-Rad公司），GL-21M高速冷凍離心機（湘儀離心機有限公司），冷凍干燥機（北京松源華興科技有限公司），超聲波清洗機（北京六一儀器廠），BS214S電子天平（賽多利斯科學儀器有限公司），真空干燥箱（上海實驗儀器總廠），倒置相差顯微鏡（上海光學儀器有限公司），超凈工作臺（蘇州凈化設備有限公司），UV-2100紫外分光光度計（上海UNICO儀器有限公司），SI-T256渦旋振蕩器（美國Scientific Industries公司）。

1.2 方法

1.2.1 茶油提取物的制備 在500 mL燒杯中按體積比為5 ∶ 1的比例加入氫氧化鉀溶液和茶油樣品，振蕩反應20 min，靜置10 min，待分層后棄去上層溶液，下層溶液經0.22 μm孔徑濾膜過濾；濾液加入5倍體積的60%乙醇溶液，過濾；40 ℃水浴減壓濃縮后，將濃縮液移入分液漏斗中，加入等體積的三氯甲烷，萃取2次；合并水層后用等體積乙酸乙酯萃取，收集萃取液，40 ℃水浴減壓濃縮；將樣品移入-50 ℃冷凍干燥機中凍干18 h，收集凍干粉末。

1.2.2 枯餅提取物的制備 在500 mL燒杯中按體積質量比為10 ∶ 1的比例加入60%乙醇溶液和枯餅粉末，40 ℃水浴下超聲（功率500 W，間隔4 s，持續15 s，超聲20 min，重復3次），三層紗布粗濾后，用8 μm孔徑濾膜過濾，殘渣按上述方法用5倍體積的60%乙醇溶液提取20 min，過濾；40 ℃水浴減壓濃縮后，將濃縮液移入分液漏斗中，加入等體積三氯甲烷，萃取2次；合并水層后用等體積乙酸乙酯萃取，收集萃取液，40 ℃水浴減壓濃縮；將樣品移入-50 ℃冷凍干燥機中凍干18 h，收集凍干粉末。

所有的凍干粉藥物均溶于RPMI-1640培養基配成母液，經0.22 μm孔徑濾膜過濾后，在超凈工作臺內紫外照射20 min，備用。

1.2.3 總酚含量測定 采用福林-酚法，以沒食子酸為標準品來測定油茶樣品中的酚類化合物含量[9]。分別吸取3 mL待測樣品液至25 mL容量瓶中，加入20 mL蒸餾水和1 mL福林-酚試劑，在渦旋振蕩器上充分混勻，室溫反應3 min后，再加入1 mL 20% Na2CO3溶液，50 ℃水浴反應30 min，于765 nm處測定吸光值。沒食子酸標準曲線Y=0.188 1 X-0.009 4（R2=0.998 7），根據標準曲線方程計算總酚含量，實驗重復3次，取平均值。

1.2.4 總黃酮含量測定 采用Gorinstein等[10]所描述的三氯化鋁法測定黃酮含量。分別吸取3 mL待測樣品液至具塞比色管中，用60%乙醇溶液補足體積至5 mL，在渦旋振蕩器上充分混勻后各加入0.3 mL 5% NaNO2溶液，混勻后靜置5 min，加入0.3 mL 10% Al（NO3）3溶液，混勻后靜置6 min，最后加入4 mL 1 mol/L NaOH溶液和0.4 mL 30%乙醇溶液使總體積為10 mL，混勻后靜置10 min，在波長510 nm處測定吸光值。蘆丁標準曲線Y=0.010 4 X + 0.020 3（R2=0.998 5），根據標準曲線方程計算總黃酮含量，實驗重復3次，取平均值。

1.2.5 細胞培養 按藥理實驗[11]方法復蘇細胞，常規傳代培養。肺癌細胞（Lewis）、黑色素瘤（B16）及乳腺癌細胞株（SCC89）分別培養于含1 mg/mL刀豆蛋白的RPMI-1640培養液中，置于37 ℃，5% CO2及恒濕條件下細胞培養箱中培養。視具體情況，每2～3 d傳代培養1次，使細胞保持在對數生長期，臺盼藍染色計數，調整細胞濃度為5×106個/mL，最后，取狀態良好，增殖旺盛的細胞用于本實驗。

1.2.6 噻唑藍（MTT）法測定細胞的抑制率及IC50值 將處于對數生長期的細胞制成細胞懸液，以細胞密度1×104個/孔100 μL接種于96孔細胞培養板中，于37 ℃，5% CO2及恒濕培養箱中培養24 h，待細胞完全貼壁后，吸去原有培養液，加入油茶各提取物，使腫瘤細胞（Lewis、B16及SCC89）懸液中茶油和枯餅提取物的終濃度都分別為50、40、20、15、10、5、2和1 μg/mL，每組3復孔，以RPMI-1640培養基為本底對照組。各提取物與細胞在含37 ℃、5% CO2條件下共同孵育24 h后，于每孔中加入MTT溶液（5 mg/mL）20 μL，繼續培養4 h后，2 500 r/min離心10 min，棄去上清液，加入100% DMSO溶液100 μL，經渦旋振蕩器振蕩10 min，待每孔中甲瓚結晶完全溶解后，用空白孔調零，在酶標儀波長570 nm處測定各孔吸光度（OD）。實驗重復3次，計算細胞存活率和IC50值。

抑制率=（1-OD實驗/OD對照）×100%

1.3 數據處理與分析

采用SPSS 19.0進行統計分析，各組數據以x±s表示。樣品比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），再用LSD檢驗進行兩兩組間比較。p< 0.05有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 茶油及枯餅提取物總酚、總黃酮含量

茶油提取物中總酚和總黃酮的含量見表2，結果顯示各組分兩兩之間差異顯著（p<0.05），總酚含量高低依次為瓊海（炒）>岳陽（蒸）>宜春（蒸）>岑溪（炒）>莆田（蒸）>岑溪（蒸）>瓊海（蒸）；總黃酮含量高低依次為瓊海（炒）>岳陽（蒸）>宜春（蒸）>岑溪（炒）>岑溪（蒸）>莆田（蒸）>瓊海（蒸）。其中，瓊海茶油（炒）中總酚及總黃酮含量顯著高于瓊海茶油（蒸），而岑溪茶油（炒）也略高于岑溪茶油（蒸），可推測加工工藝對茶油總酚及總黃酮含量影響較大，且炒制加工方法優于熱蒸加工方法。瓊海茶油（炒）中總酚及總黃酮含量顯著高于其他6種茶油，原因可能是植物活性成分含量會受到產區環境條件的影響。

枯餅提取物中總酚和總黃酮的含量見表3，結果顯示各組分兩兩之間差異顯著（p<0.05），其中總酚含量最高的是瓊?？蒿灒ǔ矗?.10 mg/g），含量最低的是宜春枯餅（蒸）（2.66 mg/g）；而總黃酮在莆田枯餅（蒸）中含量（5.55 mg/g）顯著高于瓊?？蒿灒ㄕ簦?.96 mg/g）。

2.2 茶油提取物體外對腫瘤細胞增殖的抑制作用

不同種茶油提取物對Lewis、B16及SCC891細胞增殖的影響見圖1～3。結果表明，茶油提取物在1～50 μg/mL的劑量范圍內，對Lewi、B16及SCC891細胞的增殖有不同程度的抑制作用，且呈明顯的劑量依賴關系。不同種茶油提取物抑制Lewis、B16及SCC891細胞增殖的IC50值見表4，其中岑溪茶油（蒸）對Lewis細胞抑制作用的IC50值最低為75.56 μg/mL，可見岑溪茶油（蒸）對該腫瘤細胞的抑制能力最強；莆田茶油（蒸）抑制B16細胞增殖的IC50值最低（114.35 μg/mL），顯著低于岳陽茶油（蒸）IC50值（316.77 μg/mL），可見莆田茶油（蒸）對B16細胞增殖的影響最大，而岳陽茶油（蒸）對該腫瘤細胞的抑制能力較弱；7種茶油對SCC891細胞抑制能力的IC50值大小順序為岑溪（炒）>瓊海（炒）>瓊海（蒸）>莆田（蒸）>岳陽（蒸）>岑溪（蒸）>宜春（蒸），宜春茶油（蒸）對SCC891細胞抑制作用最強，其IC50值為98.96 μg/mL，顯著低于其他6種茶油。

2.3 枯餅提取物體外對腫瘤細胞增殖的抑制作用

不同種枯餅提取物對Lewis、B16及SCC891細胞增殖的影響見圖4～6，結果表明，1～50 μg/mL枯餅提取物對Lewis、B16及SCC891 3種腫瘤細胞的增殖均具有抑制作用，且隨提取物濃度升高對細胞的抑制作用增加。與對照組相比較，各給藥組細胞存活率顯著降低（p<0.05），可見枯餅提取物能抑制Lewis、B16及SCC891腫瘤細胞的增殖，且呈濃度依賴性。不同種枯餅提取物對Lewis、B16及SCC891細胞抑制能力的IC50值見表5，其中岳陽枯餅（蒸）對Lewis腫瘤細胞的抑制能力最弱，其IC50值為131.28 μg/mL，其余6種枯餅對該腫瘤細胞抑制作用均較強，莆田枯餅（蒸）對Lewis腫瘤細胞增殖的影響最大，IC50值56.55 μg/mL；岑溪枯餅（炒）表現出對B16腫瘤細胞較強的抑制作用，IC50值為68.31 μg/mL，而瓊?？蒿灒ǔ矗┮种艬16腫瘤細胞增殖的IC50值為275.97 μg/mL，差異十分顯著；7種枯餅對SCC891腫瘤細胞增殖的抑制能力相當。

2.4 油茶提取物體中活性成分含量與其抗腫瘤活性的相關性分析

茶油及枯餅提取物中總酚和總黃酮含量與抗腫瘤活性的相關性分析見表6和表7，結果表明，茶油提取物中總酚的含量與對Lewis細胞的抑制能力呈極顯著正相關，而總黃酮含量與對Lewis和B16細胞的抑制能力呈極顯著正相關；枯餅提取物中總酚含量與對B16細胞的抑制能力呈極顯著正相關，而總黃酮含量與對SCC891細胞的抑制能力呈極顯著正相關，且相關系數可達0.858。由此可見，總酚和總黃酮等活性物質是油茶提取物抗腫瘤活性能力的主要成分，在生物體系中相關性明顯，但茶油提取物和枯餅提取物中同一活性成分與對相同腫瘤細胞抑制作用的相關性程度不同，原因可能是茶油與枯餅中相同活性物質的組成成分不同，因而其活性能力存在差異。因此，在今后的研究中，不能僅局限于評價化合物體外抗腫瘤效果，還應該對其化學結構、抗腫瘤機理以及多組分協同作用等進行深入探討，確切抗腫瘤活性還有待在動物水平上做進一步研究，這將有利于天然藥物的開發和利用，并為先導化合物的發現以及天然化學物質的結構修飾和合成提供理論依據。

3 討論

惡性腫瘤是機體在各種致癌因子作用下，局部組織細胞增生所形成的新生物，其普遍性與危害性嚴重危及人們的健康和生命，是當今世界最大的醫學難題之一[12]。目前對腫瘤的各種治療方法和手段尚不能從根本上杜絕腫瘤，切除手術又難以避免惡性腫瘤的轉移擴散，且大部分抗腫瘤化學藥物在殺死腫瘤細胞的同時，也嚴重損傷了正常細胞，故從傳統植物中藥資源中開發高效低毒的抗腫瘤藥物已成為當今研究的一個熱點[13]。

本文綜合分析了茶油及枯餅提取物對多種腫瘤細胞增殖的抑制作用，結果表明，瓊海茶油（炒）中總酚含量為151.035 μg/g，總黃酮含量為1.369 mg/g，顯著高于其他茶油，尤其是瓊海茶油（蒸），而岑溪茶油（炒）也略高于岑溪茶油（蒸），故推測加工工藝對茶油中總酚和總黃酮的含量存在一定的影響。周晴芬等[14]對4種茶油的總酚含量進行測定，結果表明毛油中的多酚含量高于精煉油。呂杰[15]認為活性物質在從油茶籽到油脂的轉移過程中會發生損失，且其程度與加工工藝有關。此外，總酚和總黃酮的含量在岳陽茶油（蒸）、宜春茶油（蒸）、莆田茶油（蒸）、岑溪茶油（蒸）和瓊海茶油（蒸）這5種茶油中均不相同，這說明相同加工技術，不同產區茶油間的總酚和總黃酮含量也存在差異，推測茶油中含有的活性成分也可能會受到環境氣候，收獲時間以及貯藏條件等的影響，這與Moghaddam等[16]的研究結論相一致。瓊?？蒿灒ǔ矗┲锌偡雍浚?.096 mg/g）也是7種枯餅中最高的，莆田枯餅（蒸）中的總黃酮含量（5.548 mg/g）顯著高于瓊?？蒿灒ㄕ簦?.958 mg/g），可見同一產地品種在不同加工工藝條件下所得到的枯餅，其活性成分含量存在差異，且同種加工工藝下的不同產地油茶枯餅活性成分含量也不盡相同。曹耀強等[17]采用不同提取方法對油茶餅中酚類物質進行提取，結果差異較大。謝鳳等[18]表明溶劑種類對所提酚類物質的種類和含量具有一定的影響，且不同品種的油茶多酚含量也存在一定的差異，這與本實驗結論一致。

茶油及枯餅提取物在1～50 μg/mL的劑量范圍內，對Lewi、B16及SCC891細胞的增殖有不同程度的抑制作用，呈明顯的劑量依賴關系，這與淦永鑒等[19]所得出的結果相一致。7種茶油中，岑溪茶油（炒）對Lewis細胞增殖的抑制能力最強，莆田茶油（蒸）對B16細胞的影響最大，而宜春茶油（蒸）對SCC891細胞增殖的抑制率顯著高于其他6種茶油；相對應的7種枯餅中，莆田枯餅（蒸）對Lewis細胞的增殖有明顯的抑制作用，岑溪枯餅（炒）抑制B16細胞增殖的IC50值最小，7種枯餅對SCC891細胞增殖的抑制作用能力均較弱。另外，茶油及枯餅提取物中總酚、總黃酮含量與抗腫瘤活性間相關性明顯，故推測茶油抗腫瘤活性能力的強弱可能主要取決于其所含有的次生代謝產物，但究竟哪些活性物質對腫瘤細胞的抑制效果最好，及其作用機理仍須進一步研究與探討。唐玲等[20]測得油茶籽醇提取物對人體乳腺癌細胞（MCF-7）的IC50值低于油茶籽水提取物的IC50值，推測不同提取劑所得到的提取物活性成分含量及組成存在差異。馬麗媛等[21]測得油茶粕提取物對人肺癌細胞（A549）和人乳腺癌細胞（MCF-7）的IC50值分別為77.56 μg/mL和81.51 μg/mL，且提取物的主要成分為皂苷。Kweon等[22]研究表明多酚類物質對多種腫瘤細胞能夠發揮其抑制腫瘤和誘導細胞凋亡的作用。Lu等[23]發現黃酮類化合物具有潛在的抑制人體肺癌腫瘤細胞（A549）生長的潛力。因此可推測皂苷類、多酚類及黃酮類成分在枯餅的抗腫瘤療效中發揮著重要作用，且活性成分之間相互協同或者拮抗作用可能也會對腫瘤細胞的增殖造成一定的影響。

海南瓊海油茶與大陸其他優良品系油茶提取物的抗腫瘤活性能力相當，故此栽培種具有一定的推廣價值[24]。整體而言，茶油及枯餅提取物有明顯的抗腫瘤活性，且其總酚、總黃酮的含量與抗腫瘤活性存在一定的相關性。因此，油茶可作為潛在的天然抗腫瘤藥物來源，應用于食品或醫藥行業。

參考文獻

[1] 莊瑞林. 中國油茶[M]. 北京： 中國林業出版社， 2008.

[2] 楊偉波， 陳良秋， 王興勝， 等. 海南省中部地區發展油茶的生態適應性分析[J]. 江西農業學報， 2010， 22（5）： 93-95.

[3] 何新鐘. 對油茶的開發利用及發展的研究[J]. 現代經濟信息，2010（10）： 158-159.

[4] Zhang L L， Wang Y M， Wu D M， et al. Comparisons of antioxidant activity and total phenolics of Camellia oleifera Abel fruit hull from different regions of China[J]. Med Plants Res， 2013（4）： 1 407-1 413.

[5] 陳中海， 肖仁顯， 沈建福， 等. 7種低溫冷榨油茶籽油的理化性質及氧化穩定性分析[J]. 中國油脂， 2012（8）： 34-38.

[6] Chen Y F， Yang C H， Chang M S， et al. Foam properties and detergent abilities of the saponins from Camellia oleifera[J]. International Journal of Molecular Sciences， 2010， 11（11）： 4 417 -4 425.

[7] Jin X C， Ning Y. Antioxidant and antitumor activities of the polysaccharide from seed cake of Camellia oleifera Abel[J].International Journal of Biological Macromolecules， 2012， 51（4）：364-368.

[8] 葉洲辰， 吳友根， 戴 俊， 等. 海南島白花油茶花粉形態結構的掃描電鏡觀察[J]. 熱帶生物學報， 2015， 6（3）： 310-314.

[9] Kataki M S， Kakoti B B， Bhuyan B， et al. Garden rue inhibits the arachidonic acid pathway， scavenges free radicals， and elevates FRAP： role in inflammation[J]. Chin J Nat Med， 2014， 12： 172-179.

[10] Gorinstein S， Jaramillo N O， Salas I A， et al. The total polyphenols and the antioxidant potentials of some selected cereals and pseudocereals[J]. Eur Food Res Technol， 2007， 225： 321-328.

[11] 徐淑云， 卞如濂， 陳 修. 藥理實驗方法學[M]. 北京： 人民衛生出版社， 2001： 1 784-1 798.

[12] 唐 玲， 葛迎春， 劉 平， 等. 油茶籽提取物對體外培養不同腫瘤細胞增殖的抑制作用[J]. 遼寧中醫藥大學學報， 2008， 10（10）： 141-144.

[13] 林 俊， 李 萍， 陳靠山.近5年多糖抗腫瘤活性研究進展[J].中國中藥雜志， 2013， 38（8）： 1 116-1 125.

[14] 周晴芬， 徐 洲， 魏 嵐， 等. 4種油茶籽油中多酚類物質的抗氧化活性比較研究[J]. 中國油脂， 2014（1）： 35-38.

[15] 呂 杰. 不同種質油茶籽性狀及其多酚組成的研究[D]. 株洲： 中南林業科技大學， 2011.

[16] Moghaddam M， Pirbalouti A G， Mehdizadeh L， et al. Variation in essential oil composition and antioxidant activity of cumin （Cuminum cyminum L.） fruits during stages of maturity[J]. Ind Crops Prod， 2015， 70： 163-169.

[17] 曹耀強， 謝新華， 陳衛軍， 等. 油茶餅中酚類化合物的抗氧化性研究[J]. 食品科技， 2012（3）： 201-204.

[18] 謝 鳳， 鐘海雁. 油茶多酚的提取及功能研究進展[J]. 經濟林研究， 2015， 33（2）： 158-162.

[19] 淦永鑒， 李 旭， 楊莉琳， 等. 油茶籽殼提取物抗氧化及抗癌活性研究[J]. 食品工業科技， 2015， 36（8）： 171-174.

[20] 唐 玲， 陳躍龍， 史麗穎， 等. 油茶籽提取物的體外抗癌活性[J]. 華西藥學雜志， 2008， 23（6）： 658-660.

[21] 馬麗媛， 李 林， 唐 玲， 等. 油茶的粕、果皮和葉的抗腫瘤活性研究[J]. 華西藥學雜志， 2012， 27（1）： 8-12.

[22] Kweon M H， Adhami V M， Lee J S， et al. Constitutive overexpression of Nrf2-dependent heme oxygenase-1 in A549 cells contributes to resistance to apoptosis induced by epigallocatechin 3-gallate[J]. Journal of Biological Chemistry， 2006， 281（44）： 33 761-33 772.

[23] Lu J， Papp L V， Fang J， et al. Inhibition of mammalian thioredoxin reductase by some flavonoids： Implications for myricetin and quercetin anticancer activity[J]. Cancer Research， 2006， 66（8）： 4 410-4 418.

[24] 周開兵， 吳友根， 胡新文， 等. 越南油茶“瓊海優”品系實生選種研究初報[J]. 熱帶生物學報， 2016， 7（3）： 80-84.