無償獻血者血液初檢、復檢、再檢結果研究

馮娟

(安陽市中心血站 檢驗科 河南 安陽 455000)

無償獻血者血液初檢、復檢、再檢結果研究

馮娟

(安陽市中心血站 檢驗科 河南 安陽 455000)

目的對無償獻血者血液初檢、復檢、再檢結果進行比較，分析其符合情況，確保檢測結果的準確性。方法對2014年5月至2015年5月安陽市中心血站無償獻血者67 436人份標本的初檢、復檢、再檢結果進行比較、分析。結果HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初、復檢符合率分別為99.05%、99.55%、99.57%、99.60%；再檢符合率分別為38.10%、25.99%、45.52%、51.11%；HBsAg、抗-HIV、抗-TP初、復檢陽性率比較，差異均具有統計學意義(P<0.05)。結論選擇質量優良的試劑和規范實驗室操作是保證檢測結果準確性的關鍵所在。

無償獻血者；初檢；復檢；再檢；符合率；假陽性

根據GB18467-2001《獻血者健康檢查要求》對非預檢獻血者經健康情況征詢和體格檢查合格后即可采血，采出的血液必須進行初檢和復檢，獻血者血液初檢和復檢不得用同一試劑廠生產的試劑，同一標本的初檢和復檢不得由同一人進行操作，合格后方可供臨床應用。由于同一份血液標本用不同的試劑檢測，實際檢測中有部分標本初、復檢結果不一致，需要用初、復檢試劑進行雙孔再檢，根據再檢結果判斷該血液是否合格。為保障臨床輸血的安全性，確保檢測結果的準確性，本研究對2014年5月至2015年5月安陽市無償獻血者初檢、復檢、再檢結果進行統計學分析。

1 材料與方法

1.1樣本來源選擇2014年5月至2015年5月無償獻血者67 436人份標本，初、復檢標本為采血人員采血時直接留取的真空采血管標本，再檢標本為血袋上小辮標本。

1.2試劑與儀器初檢試劑：HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP(均為北京萬泰)；復檢試劑：HBsAg(法國伯樂)、抗-HCV(北京科衛)、抗-HIV(法國伯樂)、抗-TP(北京科衛)。以上試劑均有國家批準文號和批檢標識，且在有效期內使用。儀器：ML-STAR CH.8全自動加樣系統(瑞士HAMILTON公司)，ML-FAME 24/20全自動酶免后處理系統(瑞士HAMILTON公司)，愛康全自動酶免儀Uranus AE280(深圳愛康)。

1.3檢測方法與結果判定分別用ELISA法初檢、復檢試劑對同一獻血者血液標本進行檢測，初、復檢結果一致時，按標準判斷結果，初、復檢結果不一致時，用原有初、復檢試劑對血袋小辮進行雙孔再檢，再檢結果一致時，按標準判斷結果，不一致時，按有反應性結果報告。判定標準：S/CO≥1判為陽性；0.7≤S/CO<1判斷為灰區；S/CO<0.7判為陰性；陽性、灰區結果判定為有反應性。

1.4統計學分析采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據處理分析，定性資料的組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1初、復檢結果情況HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初、復檢符合率分別為99.05%(66 793/67 436)、99.55%(67 132/67 436)、99.57%(67 146/67 436)、99.60%(67 166/67 436)；再檢率分別為0.95%(643/67 436)、0.45%(304/67 436)、0.43%(290/67 436)、0.40%(270/67 436)。見表1。

2.2初、復檢不符標本再檢結果情況HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP再檢符合率分別為38.10%(245/643)、25.99%(79/304)、45.52%(132/290)、51.11%(138/270)，再檢不符率分別為 61.90%(398/643)、74.01%(225/304)、54.48%(158/290)、48.89%(132/270)。 見表2。

2.3初、復檢陽性檢出及統計情況HBsAg、抗-HIV、抗-TP初、復檢陽性率比較，差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表1 初、復檢結果情況(n，%)

表2 初、復檢不符標本再檢結果情況(n，%)

表3 初、復檢陽性檢出及統計情況(n)

3 討論

血站采用法規要求的方法對無償獻血者的血液標本進行檢測，ELISA是目前檢測輸血相關性疾病的主要方法之一。但由于ELISA實驗影響因素多，有一部分初篩反應性樣本需要通過重復試驗進行最終判斷。本次調查發現HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初、復檢符合率分別為99.05%、99.55%、99.57%、99.60%，再檢率分別為0.95%、0.45%、0.43%、0.40%，再檢符合率分別為38.10%、25.99%、45.52%、51.11%，低于濮陽再檢符合率[1]。以上數據分析可以看出HBsAg初、復檢符合率較其他項目偏低，其再檢符合率也較低，提示HBsAg檢測中產生的假陽性較高，假陽性結果成為血液初、復檢結果不符的主要原因。假陽性結果的產生與標本狀態、實驗操作、試劑質量等因素有關。①標本狀態：標本處理不完全，血清中的纖維蛋白與酶結合物易黏附到ELISA檢測板上，洗板時清洗不干凈，可造成殘留出現假陽性結果[2]。溶血標本可以使紅細胞溶解釋放出大量具有過氧化物活性的血紅蛋白，從而導致非特異性顯色。此外，類風濕因子、嗜異性抗體、自身抗體及外源性物質等也會干擾檢測結果。②實驗操作：溫度是ELISA試驗結合反應的重要影響因素，為保證檢測標本在溫度一致的條件下反應，實驗前應將試劑平衡至室溫，避免由于ELISA反應板升降溫速度的差別，引起周邊與內部位置結果的差異導致的邊緣效應[3]。加樣過程中的污染、拖帶，在使用一次性加樣尖情況下可以有效避免。加樣速度不可太快，避免加在孔壁上部的非包被區，易導致非特異吸附。洗板機注液針堵塞或洗液配置比例不當會導致非特異性結合未被洗掉而顯色。ELISA影響因素較多，實驗過程中的每個環節都會對試驗結果產生影響，特別是加樣、孵育、洗板、顯色等關鍵點，應避免檢測過程中操作誤差的影響，排除各種影響因素的干擾才能提供出正確可靠的檢測結果。

目前血站系統血液檢測大多采用全自動酶免系統，提高了工作效率，減少了人為誤差的因素。設備的運行狀態是獲得穩定結果的前提，設備運行期間的監控可作為分析失控或試驗無效原因的重要依據。室內質控是實驗室監測和評價工作質量，以決定報告能否發放所采取的一系列檢查、控制手段，是實驗室自我檢測的最主要的方法。應建立和實施血液檢測過程的質量保證程序[4]，才能提高實驗室對檢測樣品獲得正確結果的技術能力，發現問題并制定糾正措施，提高實驗室檢測能力。

除抗-HCV外，其他試劑初、復檢陽性率比較，差異均具有統計學意義?？梢姴煌噭╅g的差異是明顯的。目前國內ELISA試劑已較為成熟，但試劑靈敏度與特異性仍存在一定的差別，由于試劑包被的抗原或抗體片段來源不同，檢測的能力也有所不同。非特異性吸附固相載體的干擾物質、抗原或抗體純度不夠，含有雜蛋白產生非特異性吸附也不可避免。盡管大部分試劑能夠檢出最低檢出量，但由于試劑靈敏度的不同，S/CO值的結果差距較大，導致弱陽性標本初、復檢結果不一致。因此，選擇高質量的試劑是保證檢測結果準確的關鍵之一，應選擇靈敏度高、特異性好、穩定性好、批間差小的檢測試劑。國家參比實驗室每年對各家試劑進行質量評估，可作為選擇試劑的參考依據，在使用前對試劑進行評估、確認，也是有效監控的手段之一。

綜上所述，排除各種影響因素的干擾和正確的操作是保證ELISA 檢測結果準確可靠的必要條件，保證標本狀態、設備運行狀態、環境溫度、人員操作等達到最佳狀態并進行持續有效的人為監控，對檢測結果進行室內質控符合性檢查，結果異常時的重復試驗也是保障結果準確性的有效措施，必須對ELISA試驗過程進行全方面的質量控制。

[1] 胡秀蘭.無償獻血者血液初復檢結果不一致再檢的意義[J].臨床輸血與檢驗,2014,16(4):424-425.

[2] 張春艷.酶聯免疫吸附試驗檢測結果的影響因素和應對措施[J].中國醫藥指南,2014,12(29):393-394.

[3] 謝璟,崔江龍,王宏碧,等.ELISA法對乙肝六項檢測結果的影響及處理對策[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(1):83-84.

[4] 丁永波,金花.淺談實驗室自動化血液檢測過程的質量保證[J].新疆醫學,2011,41(2):114-115.

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10.3969/j.issn.1004-437X.2017.19.020

2016-03-26)