S100A8蛋白在口腔鱗癌中的表達及臨床意義

瞿澤豐　馬洪　段曉峰　劉?！「攮?/p>

550004 貴陽， 貴州醫科大學附屬口腔醫院口腔頜面外科

口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma，OSCC)的發生和發展是一個漸進過程,表型的演變是以生物學事件和機制為基礎的逐漸演進過程[1]?，F已有研究報道S100A8在眾多惡性腫瘤中表達升高，近年來對S100蛋白家族有關于腫瘤的研究逐漸增多，但該蛋白與口腔鱗癌關系的研究卻鮮有報道。本文意在檢測口腔鱗癌中的S100A8的表達情況，結合臨床病例病理特點，探討S100A8蛋白在口腔鱗癌的意義。

1　資料與方法

1.1　組織標本

收集2014～2016 年貴州醫科大學附屬醫院口腔頜面外科病房、貴州省腫瘤醫院病人標本共計65 例。均未行任何放化療處理的35 例鱗癌標本及30 例正常組織標本。

1.2　試劑及方法

1.2.1免疫組織化學染色行SP法將蠟塊以5 μm連續切片，實驗均嚴格遵循SP免疫組化二抗試劑盒(北京中杉金橋生物技術有限公司)說明書進行常規染色。S100A8一抗(Abcam公司)，PBS代替一抗作為空白對照組。

1.2.2免疫印跡法在組織中加入裂解液，離心后提取上清蛋白。蛋白濃度測定后取20 μg蛋白進行檢測S100A8蛋白的表達。一抗兔抗人S100A8單抗(Abcam公司)、 內參鼠抗人GADPH單抗及HRP標記的羊抗兔、 抗鼠二抗(北京中杉金橋公司)，最后加入化學發光劑(Millipore)并于暗室用X膠片顯影定影。

1.3　統計學處理

應用SPSS 22.0軟件包進行統計分析，P<0.05被認為有統計學意義。

2　結　果

2.1　免疫組化結果

S100A8陽性著色位于細胞核和細胞漿，偶見于細胞間質，出現棕褐色或棕黃色顆粒為陽性見圖 1。免疫組化中OSCC組及正常組中的S100A8蛋白表達情況見下表 1。S100A8陽性表達與OSCC臨床病理的相關性見表 2。

2.2　Western blot 結果

口腔鱗癌組織中可見S100A8較正常組織中呈高表達狀態(圖 2)。N即為正常組織(Normal)，Ca為鱗癌組織(OSCC)。

圖 1S100A8蛋白質表達情況 (AP,×200)

3　討　論

S100A8蛋白被認為是與腫瘤發生發展緊密相關的因子[2]。本課題組于2011 年通過蛋白質組學的方法建立OSCC與正?？谇唤M織中的差異蛋白表達，發現口腔鱗癌的組織中S1OOA8較正?？谇唤M織表達上調[3]。此次研究是繼上次研究的延續，發現S100A8的高表達與口腔鱗癌的分化狀態有較顯著的相關性，提示該蛋白有可能為判斷惡性程度提供重參考。

綜上所述， S100A8在口腔鱗狀細胞癌呈高表達，該現象為早期預防及基因水平的治療口腔鱗癌提供了重要的實驗依據。

表 1　OSCC及正常組織中的S100A8的表達

表 2　S100A8在口腔鱗癌中的陽性表達與其臨床病理參數的相關性

圖 2Western blot 中S100A8蛋白的表達

[1]Dmitrenko AP. Lateral differences in Ki-67 in breast cancer[J]. Mol Clin Oncol, 2016, 4(6): 1041-1044.

[2]Shin JM, Chang IK, Lee YH, et al. Potential role of S100A8 in cutaneous squamous cell carcinoma differentiation[J]. Ann Dermatol, 2016, 28(2): 179-185.

[3]邱樂宏, 馬洪. 口腔鱗癌組織蛋白差異表達的蛋白組學測定[J]. 口腔醫學, 2011, 31(8): 453-455.