氣相色譜法測定菠菜中高效氯氟氰菊酯殘留量

劉博靜，趙春苗

(滄州師范學院 化學與化工學院，河北 滄州 061001)

隨著人們生活水平的日益提高，食品安全已經成為人們日益關注的問題，由于農藥的大量使用，環境和食品中的農藥殘留問題已經引起了人們的廣泛重視[1].

高效氯氟氰菊酯，別名三氟氯氰菊酯，是一種擬除蟲菊酯類殺蟲劑.高效氯氟氰菊酯因具有快速殺蟲、相對比較安全等優點成為廣大菜農們為防治病蟲害應用較多的一種殺蟲劑[2].農藥噴灑到蔬菜上，其中一部分附著于蔬菜上，一部分散落在土壤、大氣和水等環境中，環境殘存的農藥中的一部分又會被蔬菜吸收.農藥的殘留會對人體造成一定的危害，因此對農產品中的農藥殘留進行檢測是非常必要的.

高效氯氟氰菊酯殘留量的檢測方法主要有氣相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、高效液相色譜法和高效液相色譜-串聯質譜法.由于蔬菜中含有大量的脂肪酸、有機酸和色素，因此對于樣品的前處理尤為重要.陳玲瓏等[3]研究了高效氯氟氰菊酯在茶葉及土壤中的殘留，汝醫等[4]研究了高效氯氟氰菊酯在玉米中的殘留，楊周寧等[5]研究了高效氯氟氰菊酯在茶葉及土壤中的殘留，但高效氯氟氰菊酯在菠菜中的殘留檢測尚未見報道.

本實驗是采用氣相色譜法分析樣品，在前人研究的基礎上對樣品的提取方法、凈化方法及檢測方法進行研究改進，建立一種更簡單、快速、準確檢測果蔬中高效氯氟氰菊酯殘留量的實驗方法.

1　實驗部分

1.1　儀器與試劑

Agilent7890A氣相色譜儀(美國Agilent公司)；HP-5石英毛細管柱(30m×0.320mm×0.25μm)；HY-6雙層搖瓶機(江蘇省金壇市醫療儀器廠)；低速臺式大容量離心機(江蘇省金壇市醫療儀器廠)；旋轉蒸發儀；循環水式多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司)；電子分析天平FA2004N(上?？茖W精密儀器有限公司).

高效氯氟氰菊酯(純度≥98.0%)，乙腈(色譜純)(天津市福晨化學試劑廠)；磷酸三苯酯(純度≥99.0%)(北京百靈威科技有限公司)；碳酸鈉；硫酸鈉；正己烷(分析純)(天津市光復精細化工研究所)；硅藻土(化學純)(天津市光復精細化工研究所)；活性炭(寧波東錢湖旅游度假區優適活性炭廠).

1.2　色譜操作條件

進樣口溫度：250℃；柱溫升溫程序：起始溫度170℃(保持1min)，以10℃·min-1的速度升到250℃(保持7min)；檢測器溫度：280℃；載氣：高純氮氣(99.99%)，流速20mL·min-1；空氣：400mL·min-1；氫氣：30mL·min-1；不分流進樣，進樣量1.0μL.

1.3　分析步驟

精確稱取高效氯氟氰菊酯0.2500g(精確至0.0002g)，用少量正己烷溶解，并轉移到25mL容量瓶中定容，搖勻，配成高效氯氟氰菊酯的標準溶液.

1.3.230mg·mL-1磷酸三苯酯內標液的配制

精確稱取磷酸三苯酯0.7500g(精確至0.0002g)，用少量乙腈溶解，轉移到25mL的容量瓶中定容，搖勻，配成磷酸三苯酯內標液.

1.3.3樣品的處理

1.3.3.1樣品的提取

將新鮮的菠菜放入干燥的粉碎機中粉碎，準確稱取20.00g菠菜泥10份于小燒杯中，分別用10mL正己烷溶解并轉移到250mL碘量瓶中，蓋上塞子，將其放于雙層搖瓶機上震蕩30min(200r·min-1)，再加入10mL正己烷，然后放于雙層搖瓶機上振蕩30min，如此反復提取三次，過濾，將10份濾液混合，于旋轉蒸發儀中濃縮至10mL左右.

1.3.3.2樣品的層析

鄭九娘祖籍江西，先祖官至兵部尚書，傳至曾祖父時舉家遷往南京，乃石頭城中的名門望族。民國二十七年，南京淪陷，鄭府老少三十余口被日軍屠殺，九娘因隨爺爺回江西探親才逃過一劫。因聞其兄鄭正男逃至蘄州，便攜爺爺來找。然而家兄沒有找到，爺爺卻染病身亡。她舉目無親，身陷絕境。

向直徑2cm，長50cm的層析柱中由下往上依次填充脫脂棉、8.0g無水碳酸鈉、8.0g硅藻土、8.0g粉末活性炭、8.0g無水硫酸鈉，先用正己烷預淋洗濕潤，倒入濃縮后的提取液，用正己烷淋洗，收集濾液，放入旋轉蒸發儀中濃縮至體積大約為5mL，再將其轉移到25mL的容量瓶中，用正己烷定容，制成樣品的儲備液.

1.3.4測定

1.磷酸三苯酯　　2.高效氯氟氰菊酯圖1　標準溶液的氣相色譜圖(加內標)

在上述最佳色譜條件下，待儀器基線穩定后，進樣，標樣的氣相色譜圖(加內標物)(見圖1).由圖可看出，在選定的色譜條件下，磷酸三苯酯的出峰時間為9.528min，高效氯氟氰菊酯的出峰時間為11.621min.兩峰之間分離效果較好，且相互之間無干擾.

2　實驗結果與討論

2.1　色譜條件的優化

根據氣相色譜條件選擇原則，以各組分的沸點為參考設定進樣口、柱箱、檢測器的溫度.進樣口的溫度既能保證樣品全部組分瞬間完全氣化，又不引起樣品分解，故設定其溫度為250℃.檢測器溫度比進樣口溫度高20℃～30℃，將溫度設定270℃～280℃.柱溫起始溫度一般比組分的平均沸點低20℃～30℃，高效氯氟氰菊酯在275℃時易分解，因此柱溫的設定范圍是150℃～270℃.

通過實驗探討可知，在上述1.2節的色譜條件下，高效氯氟氰菊酯與內標物之間的分離效果較好，分離度大于1.5，且峰形對稱.

2.2　提取劑的選擇

高效氯氟氰菊酯易溶于有機溶劑，在丙酮、甲醇、乙腈和正己烷(20℃左右)的溶解度大于500mg·L-1，由于丙酮、甲醇等親水性溶劑會把水帶進色譜柱，對氣相色譜柱的損傷比較大；乙腈的毒性較大，長時間接觸乙腈會使身體產生不適.綜合考慮，最終選用正己烷作為樣品預處理的提取劑和淋洗劑.

2.3　內標物的選擇

在上述色譜條件下，對鄰苯二甲酸二己酯、對羥基苯甲酸丙酯、磷酸三苯酯等內標物進行選擇.由圖譜結果表明，磷酸三苯酯作為內標物，與高效氯氟氰菊酯能夠很好的分離，保留時間適宜，峰形較好.

2.4　方法的線性相關性測定

準確移取1、5、10、20、30、40、50μL10.00mg·mL-1高效氯氟氰菊酯標樣溶液于2mL試劑瓶中，分別加入10μL磷酸三苯酯，后用正己烷定容到1mL，配成標準系列.在上述最佳色譜條件下進行分析，以高效氯氟氰菊酯標樣溶液質量濃度ρ(μg·mL-1)為橫坐標，高效氯氟氰菊酯與磷酸三苯酯的峰面積比值(I)為縱坐標繪制標準曲線，得線性關系方程I=0.27723ρ+0.08339，線性相關系數r=0.9996.

2.5　樣品的測定

移取0.8mL的樣品溶液于2mL試樣瓶中，加入10μL磷酸三苯酯，用正己烷定容到1mL，在最佳色譜條件下進行測定，得到高效氯氟氰菊酯的峰面積與磷酸三苯酯的峰面積比值(I樣品)，代入線性方程中，計算出菠菜中的高效氯氟氰菊酯殘留量為0.45mg·kg-1，低于食品安全國家標準規定的蔬菜中高效氯氟氰菊酯最大殘留量2mg·kg-1.

2.6　準確度實驗

準確稱取40.00g菠菜泥3份于小燒杯中，依次加入1、2、3μL10.00mg·mL-1高效氯氟氰菊酯標準溶液，按上述1.3.3節樣品的處理方法分別處理為3份加標溶液.按上述2.5樣品的測定方法在最佳色譜條件下進行測定，并計算加標回收率(見表1)，結果表明，高效氯氟氰菊酯的加標回收率范圍為85.0%～106.5%，分析方法準確度良好.

表1　高效氯氟氰菊酯加標回收率

2.7　精密度實驗

準確移取5份30μL的樣品溶液，在上述最佳色譜操作條件下進行測定，計算高效氯氟氰菊酯在該分析方法下測定的相對標準偏差(RSD)(見表2)，結果表明，高效氯氟氰菊酯相對標準偏差1.35%，在誤差允許范圍內，分析方法的精密度較高.

表2　相對標準偏差(RSD)

3　結論

本實驗利用氣相色譜法測定菠菜中高效氯氟氰菊酯殘留量，通過對內標物的選擇、色譜條件的探討，建立了一個快速、準確測定高效氯氟氰菊酯農藥殘留量的分析方法，此方法簡單、速度較快、分離效果好、準確度高、精密度高，可作為果蔬中高效氯氟氰菊酯殘留量的理論依據，為蔬菜種植中科學合理使用殺蟲劑高效氯氟氰菊酯提供了依據.

參考文獻：

[1]張紅波.我國食品安全現狀分析及其對策[J].中國安全科學學報，2004，14(1):15.

[2]鄧金花，劉騰飛，楊代鳳，等.高效氯氟氰菊酯殘留動態與降解去除方法概述[J].現代農藥，2012，5(11):37-43.

[3]陳玲瓏，陳九星，馬銘，等.氣相色譜法測定茶葉及土壤中的高效氯氟氰菊酯殘留量[J].色譜，2010，28(8):817-820.

[4]汝醫，李慧冬，王文博，等.氣相色譜法測定玉米中的高效氯氟氰菊酯殘留[J].農藥，2008，51(12):893-895.

[5]楊周寧，楊仁斌，佘佳榮，等.高效氯氟氰菊酯在小白菜和土壤中的殘留動態研究[J].現代農業科技，2011，40(1):188-190.