仔豬大腸桿菌病原分離鑒定及藥敏試驗

李靖

摘要：本文將陜西某豬場發生嚴重腹瀉的仔豬作為研究對象，采集了仔豬黃、白痢糞便樣品共計20份，并從中分離出了6株大腸桿菌。經過藥敏試驗后得出分離得到的這6株大腸桿菌對頭孢噻肟，頭孢拉啶、諾氟沙星等藥物最為敏感?？梢詫⒎蛛x得到的菌群混合制成疫苗為產前的母豬接種，從而使其后代黃痢、白痢發病率降低。

關鍵詞：仔豬；大腸桿菌；藥敏試驗

前言

黃白痢和水腫病都屬于仔豬大腸桿菌病。該疾病是因致病性的大腸桿菌所引發的腸道傳染性疾病。黃痢在1周齡的幼豬身上較為高發，主要的癥狀是排便呈現黃色糊狀。而白痢則在10至30天齡的幼豬身上較為高發，其糞便形態也多為糊狀，顏色呈現出灰白或乳白，伴有惡臭。近些年，仔豬大腸桿菌疾病在各大豬場的發病率皆有所上升，嚴重影響了仔豬的成活率，限制了養豬行業的發展。且致病性的大腸桿菌亦呈現出一定的耐藥性，這與此前濫用抗生素的做法有密切關聯，且針對該疾病的血清種類較多，為抗原康復帶來不小的困難[1]。本文將陜西某豬場發生嚴重腹瀉的仔豬作為研究對象，將患有黃白痢疾病的仔豬糞便進行收集和細菌分離鑒定，并通過藥敏試驗進行進一步的分析。以下是具體的研究報告：

1材料和方法

1.1一般資料

將陜西某豬場發生嚴重腹瀉的仔豬作為研究對象，采集了仔豬黃、白痢糞便樣品共計12份，并從中分離出了6株大腸桿菌。

1.2研究材料

研究中所用到的輔助材料包括培養基、藥敏紙片、鋁膠以及清潔級的實驗小白鼠若干。

1.3方法

1.3.1 病原菌的分離鑒定

采用無菌采集法分別對豬場內患有黃痢或白痢的仔豬糞便進行采樣，樣品數量共計20份，分別接種于麥糠培養基和伊紅美藍瓊脂培養基上。放入溫箱24小時后，溫度控制在37攝氏度，隨后把挑選出來的菌落接種到普通的肉湯里面去增菌。具體的做法同樣是，在37攝氏度的溫控條件下，放入溫箱18小時。完成以上操作后把培養物在麥糠凱瓊脂平板與伊紅美藍瓊脂平板上分別進行劃線接種培養操作1天后再挑選其中的可疑菌落進行抹片和染色鏡檢。

1.3.2藥敏實驗

通過常規的紙片法對復方新諾明、卡那霉素、鏈霉素等13種藥物進行藥敏試驗。

1.3.3 致病測試

選取6只實驗小白鼠，作為研究對象。另選取2只小白鼠作為參照。將菌落純培養物對實驗小白鼠進行空腹注射。如出現發病小白鼠或死亡小白鼠，抽取其心血并進行抹片和染色鏡檢。

1.3.4仔豬黃、白痢菌苗制備

用無菌生理鹽水制備成菌懸液，活菌的計數濃度是每毫升30億，加入甲醛。然后進行滅活48小時，在此期間將溫度始終控制在37攝氏度。完成以上操作以后再加入無菌生理鹽水和鋁酸佐劑，直至菌液濃度降低到每毫升10億。

2結果

2.1病原菌的形態觀察

所有培養出來的可疑菌株在麥康凱瓊脂培養基上培養16小時之后全部都都呈現出紅色的菌落狀態，而全部可疑菌株在伊紅美藍瓊脂上培養基上的培養結果則全部為大小適中的紫黑色的或者是具有金屬光澤的圓形菌群。

2.2 藥敏試驗

由表1我們可以得知，全部分離菌都對頭孢拉啶、頭孢噻肟、諾氟沙星這幾個藥物較為敏感，而其他的藥物產生了程度不一的耐藥性。

2.4致病性試驗

在本場實驗中作為實驗對象的6只小白鼠里面，總計有4只在接受注射后的24小時里死亡，有1只在接受注射后的30小時內死亡，剩余一只雖為死亡但出現發病癥狀。對照組中的兩只實驗小白鼠安然無恙，沒有發病[2]。給實驗中發病及死亡的小白鼠做了心血抹片和染色鏡檢，全部檢查結果都顯示為中等小桿菌。

2.4 仔豬黃、白痢疾菌苗免疫效果

將6珠菌群混合，并制備成鋁膠滅活菌苗，然后按照每只5毫升的劑量為產前半個月的母豬接種。從實驗的結果來看，該豬場中懷孕的母豬，在臨產前的半個月接受菌苗注射的，所生產的幼仔豬的黃、白痢疾病發病概率都明顯得到下降。

結語：

從菌群的培養結果來看，全部的6株分離細菌都是致病型的大腸桿菌。會對仔豬健康構成威脅。藥敏試驗表明，出現該疾病的仔豬可以通過頭孢拉啶、頭孢噻肟、諾氟沙星等藥物對其進行診治。此外，做好母豬的健康防御工作能夠對該疾病起到一定的抑制作用。試驗證明，為即將生產的母豬注射大腸桿菌多價菌苗，所生產的幼仔豬的黃、白痢疾病發病概率都明顯得到下降。而值得注意的是，菌苗的制備須與本豬場的致病大腸桿菌血清種類一致，否則將無法達到預設的防治效果。仔豬依然存在黃、白痢發病的風險。

參考文獻：

[1]楊作豐，宋淑英，高鋒，等. 生豬養殖場仔豬白痢大腸桿菌分離、鑒定及藥物敏感性試驗[J]. 飼料工業，2017，38（9）：61-62.

[2]祖立闖，謝金文，姚春陽，等. 一例仔豬致病性大腸桿菌的分離鑒定與藥敏試驗[J]. 養豬，2017，34（2）：100-101.