中和種子膏干預不育男性精子DNA損傷的臨床研究*

范 曾 盧宗林 趙旭東

近年來，男性不育癥發病率日益增加，臨床醫家都在積極探索有效治療方法。筆者對過去3年在我中心就診并符合條件的90例男性不育癥患者采用中和種子膏口服治療，取得了較好的治療效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年10月—2019年9月在我中心就診的男性不育癥患者90例。年齡24～43歲，平均27.4歲；婚齡1～21年，平均3.7年。其中合并慢性前列腺炎者27例；合并慢性附睪炎者8例，皆為單側；合并精索靜脈曲張者15例，單側11例，雙側4例。

1.2 診斷標準

1.2.1 西醫診斷標準參考《世界衛生組織男性不育標準化檢查與診療手冊》和《男科學》男性不育診斷標準：已婚男女同居1年以上，性生活正常，未避孕而不育，同時排除女方不孕因素；禁欲3～7 d，經2次以上檢測，精子DFI>25%，伴精子濃度<15×106/ml或精子前向運動率<32%。

1.2.2 中醫辨證標準參考《中醫病證診斷療效標準》(國家中醫藥管理局，1994年)和《中藥新藥臨床研究指導原則(試行)》(鄭筱萸，2002年)擬定脾腎兩虛證標準。主癥：腰膝酸軟、性欲減退、食少納呆、體倦乏力。次癥:頭暈、耳鳴、遺精、早泄、食后腹脹、腹痛隱隱、痞悶嘔惡、排便無力；舌淡苔白,脈沉弱。具備主癥2項或2項以上加次癥2項或2項以上，其中主癥2項脾腎各有1項或1項以上，次癥2項脾腎各有l項或1項以上，即可診斷。

1.3 排除標準①嚴重少精、弱精、畸形精子癥及死精子癥患者；②患嚴重勃起功能障礙、逆行射精或不射精癥者； ③內分泌檢測有性腺功能異常者；④有藥物未控制的細菌性前列腺炎及近期發熱等影響生育因素者；⑤服用抗癲癇、抗腫瘤等影響生精功能及精子活力的藥物者；⑥外生殖器先天畸形、精道梗阻、睪丸萎縮者； ⑦過敏體質或對試驗藥物有過敏者；⑧同時應用其他藥物治療者；⑨未按規定用藥、資料不全致影響療效或安全性判斷者。

1.4 治療方法采用中和種子膏口服治療。組方如下：菟絲子100 g, 白茯苓150 g, 山萸肉100 g, 熟地黃200 g, 炒山藥200 g, 枸杞子200 g, 車前子150 g, 覆盆子150 g, 炙遠志100 g, 麥冬200 g, 五味子100 g, 當歸200 g, 柏子仁100 g, 人參150 g, 川牛膝100 g, 沙苑子150 g, 炒杜仲150 g, 蜂蜜250 g。由洛陽市第一中醫院中藥房提供原藥材，制劑室加工制作膏方，一次1袋(15 ml，約25 g)，每天3次,100 ml溫開水沖服。每3個月為一個療程。

1.5 觀察指標根據《WHO人類精液檢查與處理實驗室手冊》(第5版)進行精液常規分析。采用SSA-II精子自動檢測分析系統(北京穗加軟件有限公司)進行精液參數分析，研究數據包括精子濃度和精子前向運動率；采用染色質擴散實驗檢測精子DFI。

1.6 統計學方法采用SPSS 17.0統計學軟件處理數據，計量資料采用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 精子濃度和精子前向運動率治療后患者精子濃度有所增加，但和治療前相比未見明顯差異；精子前向運動率則明顯增加，見表1。

表1 患者治療前后精子濃度和精子前向運動率比較

2.2 精子DFI治療后患者精子DFI較治療前明顯降低，見表2。

表2 患者治療前后精子DFI比較

3 討論

男性不育癥是指夫婦同居1年以上，性生活正常，未采取任何避孕措施，排除女方不孕因素，因男方因素造成不孕者。數據統計，目前全球范圍內不孕不育發病率為8%～12%，其中約20%由男性因素引起，30%與夫妻雙方有關，因此由男性因素引起的不育癥比例高達50%。中國育齡夫婦不孕不育發病率約為10%，其中男性因素超過40%，且有逐年上升趨勢[1]。男性不育癥病因復雜，既往對其研究主要集中于遺傳因素、睪丸因素、精索靜脈曲張和生殖道感染等方面[2]，臨床上對男性不育癥的篩查亦局限于精液常規檢測。事實上，精液常規雖可大體反映男性精子質量，但由于精液本身易受局部溫度、禁欲時間、個人身心狀況、取精環境等諸多外界因素干擾，以及受檢驗人員的主觀操作性影響，導致其不能對精子質量和男性生育能力做出準確評價。

隨著對男性不育癥的深入探索，近年來，精子DFI作為一項新的評價精子功能的指標，已成為該病的研究熱點。人類精子DNA主要指位于精子頭部的核DNA，在發育成熟過程中，精子組蛋白向魚精蛋白轉化，使精子核濃縮并重新塑形，對于保護精子基因免受外界不利因素的影響、保持DNA完整性具有重要意義。研究顯示，精子發育過程中，包括一系列生殖與內分泌疾病，如精索靜脈曲張、睪丸腫瘤、生殖道炎癥、下丘腦-垂體代謝紊亂性疾病等，都可導致精子DNA損傷；許多放療、化療、放射性物質對精子核DNA具有破壞性，影響精子DNA完整性；過量吸食煙酒，可誘導精液中活性氧類物質(ROS)增多，損傷精子DNA；人類輔助生殖技術、精液處理及冷凍技術的應用同樣可造成精子的物理損傷，增加DNA損傷概率[3,4]。而精子發生過程中，DNA受到損傷將導致受精障礙、胚胎發育異常，降低臨床受精率和妊娠率[5]。有鑒于此，精子DFI已成為臨床評價精子功能的一個獨立指標。關于男性精子DNA損傷的治療，現代醫學多明確病因，做針對性治療。同時多采用口服抗氧化制劑，減少活性氧類物質(ROS)對精子的損害，常用藥物如肉毒堿、輔酶Q10、維生素C、維生素E等[6]。

中醫藥在治療不育男性精子DNA損傷方面前景廣闊。前期研究表明，治療不育癥的多種中藥具有良好的抗氧化作用。如梁培育等[7]研究表明黃芪注射液能顯著提高弱精子癥患者的精子活力，而且精子懸液中的MDA含量顯著下降；楊欣等[8]通過實驗證實菟絲子水提取物可提高精子懸液中SOD活力，降低MDA含量，進而干預ROS對精子膜的脂質過氧化反應，對精子膜結構和功能具有良好的保護作用。王祖龍對男性精子DNA損傷，從中醫角度進行了辨證分型，即腎虛濕熱證、腎陽不足證、脾腎兩虛證、腎虛血瘀證、肝腎陰虛證，進而分別治以清熱利濕補腎法、溫補腎陽法、健脾補腎法、益腎通絡法、滋補肝腎法，為臨床治療該病，提供了新的借鑒。臨床已經證實，一些中藥復合劑型對治療精子DNA損傷具有較好的療效[9-11]。

中和種子膏源于明·岳甫嘉《妙一齋醫學正印種子編》所載中和種子丸[12]，原方主要用于治療脾腎兩虛型男性不育癥，臨床療效顯著?？紤]該病治療周期長，本項目采用膏方劑型，以方便攜帶和服用。方中以菟絲子、沙苑子、覆盆子、炒山藥、炒杜仲溫補腎氣，熟地黃、山萸肉、枸杞子、麥冬、五味子滋養腎精，車前子瀉腎濁，人參、白茯苓健脾益氣，當歸、川牛膝養血祛瘀，炙遠志、柏子仁安神定志?？v觀全方，打破了單純補腎法治療男性不育癥的思維，從心、脾、腎三臟入手，重在健脾補腎。全方溫而不燥，滋而不膩，采用膏方劑型，以蜂蜜為敷料，口感容易被接受，方便攜帶和服用。本研究表明，男性不育癥患者經中和種子膏治療后，其精子前向運動率顯著提高，精子DFI明顯降低。說明該方具有提高不育男性精子活力、保護精子DNA完整性的作用。然受一些條件限制，如患者病例數較少，以及缺少流式細胞儀等更為精確的檢測設備，對于精子前向運動率與精子DFI之間的相關性，以及中和種子膏提高男性精液質量，減輕精子DNA損傷的作用機制有待進一步探索。