利用高效液相色譜法 高效檢測動物源性食品中β-內酰胺類抗生素殘留

劉彥釗 張麗麗

近些年來，由于β-內酰胺類抗生素細菌耐藥性通過食物鏈從動物源性食品向人體的轉移，消費者越來越擔心畜牧業及水產養殖業中的抗生素濫用情況。動物源性食品中β-內酰胺類抗生素的低濃度水平和基質復雜性，使得在測定其殘留量時必須使用高度敏感、高特異性的測定方法。目前，高效液相色譜法（HPLC）聯合其他檢測儀器已被廣泛用于動物源性食品中β-內酰胺類抗生素殘留的檢測分析。

一、高效液相色譜-紫外檢測法

目前，通過使用二極管陣列檢測器（DAD）進行UV檢測是與HPLC結合使用的非常流行的技術，但在確定β-內酰胺方面存在一些局限性，例如，由于缺乏生色團而導致靈敏度較低，HPLC-UV甚至在不使用DAD的情況下也不能完全可靠地進行β-內酰胺確認。

二、高效液相色譜-串聯質譜法

質譜法是確定食品中是否存在β-內酰胺的首選檢測技術。盡管此檢測技術具有很高的選擇性，但仍需要先進行色譜分離，以避免共洗脫化合物的離子抑制。β-內酰胺首先使用熱噴霧通過HPLC-MS測定，由于β-內酰胺電離的簡便性，目前電噴霧電離（ESI）是這兩種技術之間的首選接口。盡管β-內酰胺具有羧基，但是由于靈敏度較高，通常使用正離子化。

三、高效液相色譜-化學發光法

由于其固有的靈敏度和選擇性，化學發光檢測是抗生素檢測中常用的方法。β-內酰胺可以通過兩種方式參與化學發光反應：增強化學發光發射；用合適的化學發光試劑衍生化。

目前與高效液相色譜聯用檢測β-內酰胺抗生素的化學發光體系常見的有KMnO4、Ce（IV）、魯米諾、Ru（bpy）3 2+等。

四、高效液相色譜-熒光分析法

目前已有使用高效液相色譜法聯合熒光檢測器測定β-內酰胺的相關報道。由于β-內酰胺類化合物中缺少熒光團，通常需要衍生化，而衍生化造成處理過程繁瑣，所以效率不佳。一般來講，使用化學發光能夠檢測的β-內酰胺化合物也可使用熒光分析檢測，但化學發光可獲得更好的靈敏度。（基金項目：河南省教育廳項目： 河南省高等學校青年骨干教師培養計劃（2016GGJS-266）。）

作者簡介：劉彥釗（1978–），男，副教授，研究方向：分析化學。