結核感染T細胞斑點試驗在輔助診斷骨結核中的應用價值分析

饒濤 竇吉辰 劉思源

【摘 要】目的：分析探討結核感染T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）在輔助骨結核診斷中的應用價值。方法：通過對本院161例疑似骨結核患者的臨床資料進行回顧性分析，結合患者的臨床表現，病原學、影像學和組織病理學檢查結果，以及臨床抗結核治療效果開展診斷，確認骨結核患者81例，非骨結核患者80例。治療前所有患者均接受過結核菌素純蛋白衍生物（TB-PPD）試驗及T-SPOT.TB。對T-SPOT.TB在輔助診斷骨結核中的效能進行分析。結果：T-SPOT.TB輔助診斷骨結核的敏感度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均高于TB-PPD試驗數據，差異有統計學意義（P<0.05）。結論：結核感染T細胞斑點試驗診斷敏感性、特異性較高，可作為輔助工具來診斷骨結核[1]。

【關鍵詞】T-SPOT.TB;輔助診斷;骨結核;應用價值

【中圖分類號】R529.2;R446.6 【文獻標識碼】A 【文章編號】1002-8714（2020）02-00-01

1 資料與方法

1.1臨床資料

選取2015年3月至2016年3月本醫院收治的疑診骨結核患者161例，男85例，女76例，年齡（32.62±18.3）歲;有卡介苗接種史156例（96.89%），合并肺結核或肺結核病史19例（11.8%），糖尿病史9例（5.6%），慢性腎病3例（3.1%）。根據臨床表現，影像學、病原學組織病理學檢查結果以及臨床抗結核治療效果等信息對患者進行診斷分組。結果骨關節結核組81例，其中脊柱結核42例、膝關節15例、髖關節16例;排除骨關節結核的患者80例。

1.2采用北京祥瑞生物制品有限公司生產的結核菌素純蛋白衍生物進行結核菌素純蛋白衍生物試驗（藥品規格：5支/盒，20IU/ml.每支1ml，國藥準字：S10960018），將TB-PPD[0.1ml（2U）]注射于患者前臂掌側皮內，72h后觀察注射部位皮膚的狀況。參照《中國結核病防治規劃實施工作指南》（2008版）標準[9]對結果進行判斷：硬結直徑<5mm判斷為陰性;5～9mm判斷為弱陽性;10～20mm判斷為陽性;>20mm或局部出現水泡、淋巴管炎、壞死等判斷為強陽性。檢測均在患者治療前進行。

1.3 T-SPOT.TB

在4h內分離患者的新鮮肝素抗凝全血5～10ml，然后按1∶1的比例跟室溫預熱的RPMI-1640培養液混合均勻，將血樣按3：1比例加在Ficoll淋巴細胞分離液上層，注意血樣與分離液避免混合[2]。溫度18℃，離心22min，相對離心力1000g。將分離管中的單核細胞層轉移到新的15ml無菌尖底離心管內。外周血單核淋巴細胞（PBMCs），按試劑盒說明將分離的PBMCs加入預包被抗人-γ干擾素抗體的板孔中，每個樣品加4個板孔，每孔約2.5×105個PBMCs，然后再將細胞培養液、ESAT-6抗原，CFP-10抗原及陽性對照分別加入4個已加樣板孔中，放置于培養箱中孵育16到20小時，要求培養箱內37℃，5%CO2、并保持一定的濕度[3]。用堿性磷酸酶偶聯的二抗和底物顯色，洗板后統計斑點的數量。判定結果為：抗原ESAT-6或CFP-10板孔中任意1孔的點數減去對照孔點數大于或等于6判定為陽性，點數小于6判定為陰性。本檢測均在患者治療前進行。

1.4統計學分析

采用SPSS23.0統計學軟件對實驗數據進行分析，分別對T-SPOT.TB和TB-PPD兩種試驗的敏感度、特異性、陰性預測值、陽性預測值、陽性預測值進行計算，采用x2進行檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

比較發現，T-SPOT.TB診斷骨結核的敏感度、特異度、陽性預測值以及陰性預測值均高于TB-PPD試驗，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1～3。

3 討論

傳統方法采用活檢結核分枝桿菌的方式來檢測早期骨結核，此種方法取材難，準確率低，其檢測的敏感度、特異度不是很理想，效果也不明顯，一直以來醫生們都苦于沒有一種有效的方法來診斷早期骨結核[4]。進幾年，核感染T細胞斑點試驗（T-SPOT.TB）做為一種新的早期篩查方法，具有簡便、快捷、成本低的特點，在結核病的診斷等方面因診斷效果明顯而被廣泛推廣應用，成為目前診斷結核感染的一種常用方法[5]。本研究通過T-SPOT.TB與TB-PPD兩種試驗對骨結核的診斷效能進行比較，發現T-SPOT.TB輔助診斷骨結核的敏感度為97.88、特異度為92.56、陽性預測值為92.33，陰性預測值為98.58均高于TB-PPD試驗數據的51.23，73.15，69.51，61.24，差異顯著，具有統計學意義（P<0.05）。這種新的診斷方法為骨結核的檢測提供了更方便、快捷的方式，大大縮短了檢測時間，提高了檢測效率，在輔助檢測骨結核上取得了良好的效果。

綜上所述，T-SPOT.TB在骨結核檢測過程中有較高的檢測敏感性和特異度，其檢測效果明顯優于TB-PPD試驗，而且整個檢測過程僅需要兩天的時間、檢測效率高，取材方便，可以作為一種有效的方法來輔助診斷骨結核，具有很高的臨床推廣應用價值。

參考文獻

[1] 吳青，呂幸，李艷，等.結核感染T細胞斑點試驗在輔助診斷骨結核中的應用價值[J].廣西醫學，2016，38（12）：1649-1650.

[2] 李建華，張文龍，鮑玉成，等.結核感染T淋巴細胞斑點試驗在骨結核病診斷中的臨床應用價值[J].中國實驗診斷學，2015（10）：1770-1772.

[3] 李自軍.結核感染T淋巴細胞斑點試驗在骨結核病診斷中的臨床價值[J].河南預防醫學雜志，2017，28（5）：388-389.

[4] 苗瑞瑞，張文龍，鮑玉成，等.T-SPOT.TB在骨與關節結核鑒別診斷中的價值[J].贛南醫學院學報，2016，36（1）：76-77.

[5] 馬俊，肖和平.332例骨關節結核的臨床特點分析[C]//第三屆骨關節結核臨床診斷與治療進展及其規范化專題研討會資料匯編.2015.