超高效液相色譜-串聯質譜法測定豬肉中氯霉素類獸藥殘留量研究

徐秋艷

摘 要：對于現階段豬肉中可能會存在氯霉素類藥品殘留的情況，需要對豬肉進行實驗室檢測，本文建立了超高液相色譜-串聯質譜法檢測豬肉樣品中存在的氯霉素類獸藥含量，探究該法的檢測效果，提高氯霉素類藥物的檢測精度。

關鍵詞：實驗室檢測;豬肉;超高效液相色譜-串聯質譜法

1 實驗材料準備

該實驗選用的超高效液相色譜-串聯質譜儀，為1290UHPLC6400QQQ型制，另配置ST8R型冷凍離心機、LPVortex Mixer型渦旋振蕩儀。選用精度分別為十萬分之一、百分之一的電子天平，超聲波儀型制Ultrasonic Cleaner，并采用瑞士BUCHI公司生產的旋轉蒸發儀、德國IKA公司生產的高速勻漿機。

該實驗選用的試劑有甲醇、乙酸乙酯、濃度為29%左右的氨水、無水硫酸鈉等。另外該實驗需用超純水，提前制備。

該實驗選用市場隨機購買的生豬肉，氯霉素類物質選用純度高于98.8%的標準品。

2 實驗操作過程

2.1 配制標準溶液

選擇氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考等3類藥物的標準品各5.0 mg，分別放置于容量瓶中，使用甲醇將其稀釋至50 mL刻度位置，由此得到三瓶標準儲備溶液，其濃度均100 μg/mL。在實驗操作前，可由此標準儲備溶液作為基礎液，向內加超純水用以稀釋，可達所需濃度。

2.2 儀器條件

對色譜條件進行調試，將甲醇與水的體積比例調至2∶3;實驗流速調至每分鐘1 mL;樣品進量數值調至20 μL;色譜柱數值調至C18（3 mm×100 mm），并將色譜柱溫度調至恒定35 ℃。儀器運行原理見圖1。

2.3 處理豬肉樣品

取豬肉1 kg，去皮，絞碎并勻漿

1 min，稱取已勻漿試樣（5.00+0.05） g，置50 mL聚丙烯離心管中，加入3 g無水硫酸鈉，乙酸乙酯10.0 mL，氨水0.3 mL，渦旋2 min，超聲處理5 min，離心5 min，取上清液2 mL至25 mL雞心瓶中，45 ℃旋轉蒸發至干[1]。殘渣渦旋靜置分層，取下層溶液過濾膜后，供液相色譜-串聯質譜測定。

2.4 氨水影響試驗

取3類藥品物質標準液，將其提取后勻漿，該步驟原理是加入氨水量不同，將會對各物質的定量離子平均峰的面積產生影響，以此判斷氨水濃度、數量對該實驗過程的影響范圍及對實驗結果的影響效果。該步驟下選用的氨水濃度為28%～30%，選用量為0～0.5 mL，設置等量區間為5段。

2.5 回收率與精密性試驗

在豬肉樣品中加入不同濃度的標準溶液，其中每個濃度下設置6個平行因素，并按照樣品的處理方式，去制備加標的溶液樣式。氯霉素與氟苯尼考的溶液濃度區間相同，分別為0.1、0.3和1.0 μg/kg，而甲砜霉素的溶液濃度設置為0.5、1.5和5.0 μg/kg。該步驟操作目的為探究加標回收率和該法下的數據精密性，分析相對標準偏差。

3 研究結果討論

3.1 氨水影響試驗的結果

實驗可知，當改變氨水濃度和添加量時，將影響氯霉素類藥物的提取數據，且影響較大，因此在使用該法測定時，需將氨水濃度固定，并著重確定添加量的具體數值。為增加提取效率，應將0.3 mL或0.4 mL作為氨水添加量，若綜合考慮不同物質的提取效率，則選用0.3 mL氨水作為豬肉樣品提取液。

3.2 回收率與精密性結果

分析實驗回收率，可知在空白豬肉樣品中3種氯霉素類藥物添加水平為0.1～5.0 μg/kg時，平均回收率為90.8%～108.2%。分析該法下的實驗精密性，可知相對標準偏差為2.4%～9.8%（n=6），回收率和精密度結果均較好。

4 結論

綜上，采用超高效液相色譜-串聯質譜方法，對豬肉中的氯霉素類藥物進行含量測定，通過實驗可知該法的應用效果良好，能在簡便操作下，將藥物含量檢出，且檢出限較低，能實現低含量的檢出目的。其中發現氨水可影響實驗進度，因此實驗過程中需對其進行良好運用，另外實驗分析回收率、精密性效果較好，該實驗方法滿足了實驗室中的檢測要求。

參考文獻

[1]賈瑋，徐曦，石琳.液相色譜-高分辨質譜法同時測定羊肉中12種獸藥殘留[J].陜西科技大學學報，2020，38（3）：54-59.