鼻敏方對變應性鼻炎miRNA表達水平的影響

摘要：目的：對鼻敏感方對變應性鼻炎模型大鼠的影響進行觀察，探究鼻敏感方對變應性鼻炎miRNA表達水平的調控作用。方法：本實驗于2018年月1份～2018年11月進行，取36只SD大鼠，按隨機分類表法分為常規組、模型組、研究組、氯雷他定組。除常規組外，其他三組以卵清蛋白為致敏原，建立大鼠變應性鼻炎模型，成功后分別給予給予0.9%的NaCI溶液、鼻敏感方水提劑、氯雷他定水溶液，進行灌胃處理。對用藥前、用藥7日、14日、28日后大鼠的行為進行觀察，28日后對血清進行檢測。結果：藥物治療7日、14日、28日后，使用鼻敏感方的研究組和氯雷他定組比模型組大鼠的鼻部癥狀改善較明顯，P<0.05，差異具有統計學意義。結論：鼻敏感方是治療變應性鼻炎的有效方劑，對于miRNA的表達有所影響，治療機制是通過對IL-4、IL-17、IFN-γ、IL-10水平的影響，來調節Th1/Th2和Th17/Treg細胞間的平衡去實現的。

關鍵詞：鼻敏感方;變應性鼻炎;miRNA表達

【中圖分類號】R246.8 【文獻標識碼】A 【文章編號】2107-2306（2020）01-055-01

變應性鼻炎（allergic rhinitis，AR）是國內外均比較多見的疾病，因其較高的發病率已受到高度重視，由于環境污染的不斷加重，其發病率呈逐年上升的趨勢[1]。中醫將其稱之為“鼻鼽”或“鼽嚏”。AR是發生在鼻粘膜的反應性疾病，主要臨床癥狀有鼻癢、噴嚏、鼻分泌亢進、鼻粘膜腫脹等，現階段多將其分類為季節性和常年性兩種[2]。AR的主要治療手段是藥物控制，使用糖皮質激素和抗組胺藥物的有效性雖被認可，但這種方式也有耐藥等缺陷。關于AR的發病機制研究，Th1、Th2和Th17、Treg細胞免疫的平衡，一直都是研究熱點[3]。

1資料與方法

1.1一般資料

（1）動物： 36只SD大鼠，3月齡，重180-220g，雌性。

（2）藥物：卵清蛋白;氫氧化鋁;IL-17、IL-10試劑盒;氯雷他定片;鼻敏感方，水提后減壓濃縮，滅菌后 4 ℃ 瓶裝密封保存，生藥濃度為1.6g.ml。

（3）儀器：THZ-312臺式恒溫震蕩儀;冰箱;酶敏儀;顯微鏡;相機;電腦。

1.2方法

將36只SD大鼠根據質量排序，按隨機數字表法分為常規組、模型組、研究組和氯雷他定組，每組9只。常規組正常飼養，不予造模及給藥。其余三組建立AR模型，以卵清蛋白0.3mg為抗原，氫氧化鋁30mg為佐劑，調入0.9%NaCl溶液1ml，注射入腹腔，隔日一次，以8次為基礎，再用0.25%卵清蛋白生理鹽水溶液滴鼻，每側50μl，每日一次，連續7日。攻擊致敏7日后，觀察并評分。造模后，每組給予溶液灌胃，劑量為成人的常規服用量。氯雷他定組以氯雷他定溶液灌胃，研究組以鼻敏感方水提劑灌胃。常規組和模型組每天給予研究組等量0.9% NaCl溶液灌胃。連續28天。

1.3觀察指標

（1）對比鼻部癥狀評分;

（2）各組間血清IL-4、IFN-γ水平對比、血清IL-10、IL-17水平對比。

1.4統計學處理

本研究所有數據使用SPSS 20.0軟件進行分析。使用均數±標準差（x±s）表示計量數據，組間比較及治療前后差異對比使用t檢驗，使用n表示計數資料，以 P<0.05代表差異具有統計學意義。

2結果

2.1鼻部癥狀評分對比

給藥前：模型組、研究組、氯雷他定組的大鼠，激發出典型的變應性鼻炎癥狀。如連續噴嚏、大量清涕、陣發性劇烈瘙癢抓鼻面。連續激發7日后給藥前，各組積分都大于5分，對比常規組P<0.05，差異具有統計學意義，說明造模成功。

給藥7日后，對比模型組，研究組和氯雷他定組差異均有統計學意義（P<0.05）。研究組與氯雷他定組間對比無統計學意義（P>0.05）。

給藥14日后，對比模型組，研究組和氯雷他定組差異均有統計學意義（P<0.05）。研究組與氯雷他定組間對比無統計學意義（P>0.05）。

給藥28日后，對比模型組，研究組和氯雷他定組噴嚏等癥狀明顯減少，偶爾流涕，抓撓鼻面部的現象基本消失，差異均有統計學意義（P<0.05）。研究組與氯雷他定組間對比具有統計學意義（P<0.05）。附表1。

2.2組間血清IL-4、IFN-γ水平對比及血清IL-10、IL-17水平對比

與常規組對比，模型組IFN-γ水平降低， IL-4水平升高（P<0.05）。與模型組對比，研究組IFN-γ水平升高， IL-4水平降低（P<0.05）;氯雷他定組IFN-γ水平升高， IL-4水平降低（P<0.05）。研究組與氯雷他定組對比，IL-4、IFN-γ水平差異具有統計學意義（P<0.05）。詳情附表2。

與常規組對比，模型組IL-10水平降低，IL-17水平升高（P<0.05）。與模型組對比，研究組IL-10水平升高，IL-17水平降低（P<0.05）;氯雷他定組IFN-γ水平升高， IL-4水平降低（P<0.05）。研究組與氯雷他定組對比，IL-10、IL-17水平差異具有統計學意義（P<0.05）。詳情附表2。

3討論

鼻敏感方是在益氣溫陽方的基礎上變化而來的，有相關研究顯示，鼻敏感方對AR的療效明顯，相對西藥而言，有療效持久、副作用小等優點[4.5]。miRNA在免疫系統中具有重要的調控作用，特別是對CD4+T向Th1/Th2分化極性進行調控，可能與AR的發病的Th1/Th2失衡有關。

Th1細胞主要產生干擾素IFN-γ、腫瘤壞死因子TNF-β、白細胞介素-2等細胞因子;Th2細胞主要產生細胞因子IL-4、IL-5、IL-10等細胞因子[6]。鼻敏感方通過益氣散寒的功效，對變應性鼻炎患者血清中的IL-4起到調節使其降低，對IFN-γ調節使其升高。從而對miRNA的表達水平產生影響[7]。

變應性鼻炎的發生時抗原呈遞細胞攝取變應原后，將其加工處理，變為變應原肽，傳遞給Th細胞。Th細胞誘導B細胞釋放IgE。當相同的變應原再次進入體內時，與IgE相結合，肥大細胞脫顆粒后，釋放組胺、前列腺素、白三烯等炎性遞質，引起毛細血管擴張、腺體分泌增強、通透性增強、嗜酸性粒細胞哦浸潤等情況，因此AR癥狀便會出現[8]。早期研究認為，AR的發病機制是Th1/Th2細胞免疫失衡，AR的發生源于變應特異性Th細胞的分化發生偏移，導致體內Th1及Th2反應失去平衡[9]。又有研究者認為Th17介導炎癥反應屬于促炎性細胞，Treg介導免疫耐受屬于抑炎性細胞，在兩者功能及分化的過程，出現相互對抗，會保持兩者的平衡，這有利于維持機體穩定的免疫狀態[10]。

綜上所述，鼻敏感方是治療變應性鼻炎的良效方劑，鼻敏感方通過影響AR模型大鼠血清IL-10、IL-17、IL-4、IFN-γ的水平，來調節Th1/Th2和Th17/Treg細胞的平衡，從而發揮抗變應性鼻炎的作用。這一影響會改變miRNA的表達。

然而，細胞平衡與細胞因子的關系和影響細胞因子分泌的因素都較為復雜，從細胞因子的角度對細胞平衡進行分析，有一定的局限性，今后仍需進一步研究。

參考文獻：

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作者簡介：彭文靜，女，1986年6月出生，研究生學歷，民族：漢;籍貫：山東泰安;研究方向：主要從事耳鼻喉專業研究。

基金名稱：佛山市自籌經費類科技計劃項目合同書（編號20161021010035）

項目名稱：鼻敏方對變應性鼻炎miRNA表達水平的影響

（佛山市第二人民醫院 廣東佛山 528000）