咽拭子培養聯合降鈣素原、C反應蛋白及肺炎支原體檢測在兒童肺炎診斷中的應用

趙賀紅，曹麗敏，董鳳芝

（1.河南省開封市人民醫院 檢驗科，河南 開封 475000；2.天津醫科大學中新生態城醫院，天津 300467）

肺炎作為兒童最常見及最重要的呼吸系統疾病之一，主要以過敏性變態反應或吸入羊水、油類及病原體感染等引起肺部相應性局部炎癥為特征，具有較高的病死率，其特點包括咳嗽、發熱、呼吸不暢、食欲下降、腹瀉、嘔吐等癥狀為主要表現，好發于我國北方地區冬春季節［1］。兒童一旦罹患肺炎性相關疾病，應及時進行治療，按照誘因的不同可將其分為細菌性肺炎、病毒性肺炎、真菌性肺炎、支原體肺炎及衣原體肺炎等若干類型。細菌性肺炎的患兒降鈣素原（PCT）及C 反應蛋白（CRP）明顯升高［2-3］，肺炎支原體肺炎患兒支原體培養及肺炎支原體（MP）檢測陽性率升高明顯［4］。兒童肺炎發病較急，因此早期有效識別各型肺炎，及早進行對照診治顯得尤為重要。故本研究選取開封市人民醫院收治的各型兒童肺炎病例339 例，通過對其進行咽拭子培養及全血PCT、CRP 和MP 檢測分析探討其在各型肺炎的臨床鑒別應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本研究采用回顧性分析開封市人民醫院兒科病區2018 年10 月至2020 年11 月339 例收治入院的肺炎患兒，其中男167 例，女172 例；年齡2～10 歲，平均（4.3±0.6）歲；分為細菌性肺炎組115 例、病毒性肺炎組113 例、肺炎支原體肺炎組111 例。另外選取健康兒童105 例作為對照組，男58 例，女47 例；年齡2～11 歲，平均（4.7±0.8）歲。排除標準：原發性肝、腎、心、肺功能異常，其它感染性疾病以及血液病史。所選健康兒童性別、年齡與實驗對象構成比差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究征得經醫院醫學倫理委員會批準并告知患者家屬知情同意。

1.2 方法

各研究對象均于晨起采集靜脈血2 mL 于EDTAK2 真空紫色抗凝管，并使用無菌咽拭子采集鼻咽部分泌物于無菌管。對抗凝管血液標本進行盡快檢測，所有實驗項目均在1 h 內完成相關檢測及接種培養。

PCT 檢測采用熒光免疫層析法，儀器為上海奧普生物醫藥有限公司生產便攜式熒光免疫分析儀（型號：Maya-500，注冊證編號：滬械注準20192220131），試劑批號為機器配套的檢測試劑盒，參考值為0.0～0.5 ng/mL，在此區間為正常（或認為是陰性），超過0.5 ng/mL 視為陽性（或認為有感染可能）。CRP 采用乳膠增強免疫散射比濁法進行測定，儀器為BC-5180 全自動血液細胞分析儀（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司），試劑為機器配套的檢測試劑盒，參考值為0.0～10.0 mg/L。MP 采用膠體金免疫層析技術進行檢測，試劑盒由珠海麗珠試劑股份有限公司提供，結果判讀為陰性、陽性和保留三種。MP 培養采用安圖生物支原體培養鑒定計數藥敏試劑盒（鄭州安圖生物工程股份有限公司），培養48 h 判讀，其培養液顏色由桔紅色轉變成黃色表明有MP 生長，結果判讀為陽性，培養液如無顏色改變為無MP 生長，結果判讀為陰性。所有檢測試劑批號均在有效期內使用。

1.3 統計學方法

本研究所有數據經SPSS 20.0 軟件進行統計學處理。計量資料以均數±標準差（±s）表示，多組間比較用單因素方差分析，兩兩比較用t檢驗；計數資料以百分率（%）表示，用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清PCT 和CRP 檢測結果分析

血清PCT 和CRP 在細菌性肺炎組中均顯著上升，差異有統計學意義（P＜0.05）；且PCT+CRP聯合檢測針對細菌性肺炎的診斷與鑒別明顯優于單獨檢測，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1、表2。

表1 各組血清PCT、CRP 水平比較（±s）

表1 各組血清PCT、CRP 水平比較（±s）

注：?與對照組比較，P＜0.05。

表2 各組血清PCT、CRP 及聯合檢測陽性例數比較（例）

2.2 MP 和咽拭子檢測結果分析

肺炎支原體肺炎組MP 檢測陽性率、咽拭子培養陽性率顯著高于其他幾組，差異有統計學意義（P＜0.05）；且MP+咽拭子培養聯合檢測針對肺炎支原體肺炎的診斷與鑒別明顯優于單獨檢測，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 各組MP、咽拭子及聯合培養陽性率比較 ［n（%）］

3 討論

兒童免疫力相對較低，肺炎的發病率在兒童群體中居高不下，且具有相對較高的病死率。兒童是一個特殊的群體，因其語言表達能力差，所以兒科臨床醫生如何能夠快速準確鑒別各型肺炎，并給予及時正確的治療顯得尤為重要。

PCT 是一種含有116 個氨基酸，生理情況下主要由甲狀腺C 細胞合成分泌［5-6］的蛋白質，當機體受到細菌攻擊感染時，上皮細胞合成表達PCT 濃度則引起上調。PCT 在細菌攻擊所引起的周身性炎癥早期反應中（2～3 h）即可顯著升高，炎癥反應12～24 h 即可達到峰值，患者受感染的程度比例與PCT 測定的數值呈正相關性，當機體所受感染因素消除后PCT 濃度即可恢復正常水準［7］；而當患者機體受到病毒性感染時，PCT 表達正常，這一數據變化可以用于初步協助評價患兒受到細菌性感染的危險程度［8］。本研究通過PCT 濃度的升高來區分兒童細菌性肺炎，指導臨床準確快速用藥，盡早減輕患兒痛苦。

超敏CRP 作為可以與肺炎鏈球菌的C 多糖體反應的一種急性時相反應蛋白，其通常主要由肝細胞分泌合成。在組織發生損傷6～8 h 就開始升高，峰值高度可以達到正常參考范圍的20～500 倍，而當機體所受致病因素解除后CRP 則能夠迅速降到正常范圍［9］。CRP 在血液中的半衰期短暫（＜1 d），現在已廣泛應用于臨床，在觀察抗生素治療療效時具有一定的參考價值。有研究指出CRP 對兒童肺炎早期檢測特異度低，單獨檢測CRP 對鑒別各型肺炎意義不大［10］，因此本研究將實驗對象進行PCT 與CRP 聯合檢測，且實驗結果顯示CRP 和PCT 聯合檢測能提高兒童細菌性肺炎的檢出率。

從人類體內可以分離得到的支原體種類具有12 種，但能夠對人體致病并可以引人類肺部炎癥的僅有MP 這一種。支原體所引起的肺炎以患者多為兒童和青少年，長期頑固性咳嗽，頭孢類及青霉素類常用藥物對其治療無效為特點。機體感染后MP 最早能在血清中檢測到其抗體，對于MP 所引發的肺部炎癥早期的診斷、早期的治療具有很大意義。MP 作為主要的人類原發性非典型性肺炎病原體之一，其可從人體的上呼吸道以及口腔處分離采集。MP 通常經飛沫進行傳播，主要易感人群為青少年及兒童。通過染色直接鏡檢病人的分泌物標本診斷MP 意義欠佳，是由于其沒有固定的形態特點，導致染出的結果與樣本中的組織碎片等雜物不能夠進行區分，實驗室通常主要通過微生物分離培養檢驗及依靠血液學免疫球蛋白M（IgM）抗體檢查法。臨床上通常采集胸水、痰、鼻咽部位及支氣管部的分泌物等，由于兒童采集鼻咽部分泌物比較方便，通過咽拭子細菌培養出致病菌的方式可對兒童細菌性肺炎的診斷和治療提供很大幫助；咽拭子MP 培養聯合MP 檢測可對兒童肺炎支原體肺炎的診斷和治療提供幫助［11-12］。MP 陽性則表明該兒童現在感染或者近期曾經感染肺炎支原體肺炎，具有一定的假陽性與假陰性率；咽拭子MP 培養陽性表明兒童現在感染MP，但陽性率較低。血MP 檢測聯合咽拭子MP 培養結果可對該兒童是否為現在感染做出精準判斷，并提高其檢出率［13］。

本研究表明血清PCT、CRP 和MP 檢測方便，快速；咽拭子培養耗時雖長，但是作為肺炎支原體肺炎來鑒別意義重大。咽拭子培養聯合血清PCT、CRP 和MP 檢測對兒童肺炎的分型很有幫助，并能夠精準指導臨床用藥。

綜上所述，我國各個地區醫療資源配置不同，兒童感染肺炎就醫后如何能快速準確的鑒別和診治顯得尤為重要。咽拭子培養聯合PCT、CRP 及MP 檢測能夠在兒童肺炎診斷的早期進行指導。臨床醫生可根據檢測結果針對性采取預防與治療的措施，對延緩和阻止肺炎的發生與發展具有積極的臨床意義。