TURBT聯合吉西他濱對膀胱癌患者SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表達的影響

蔡仙國　　盧子文　　李衛林　　吳宏劍

[摘要] 目的 探討尿道等離子電切術（TURBT）聯合吉西他濱對膀胱癌患者的可溶性血管內皮生長因子受體1（SVEGFR1）、血清胰島素樣生長因子結合蛋白-3（IGFBP-3）、胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白3（IMP3）表達的影響。 方法 收集2015年1月～2018年4月浙江省臺州醫院泌尿外科治療的101例膀胱癌患者資料并進行回顧性分析，隨機分為對照組與研究組，對比兩組的臨床療效。采用酶聯免疫吸附法檢測SVEGFR1水平、全自動化學發光分析儀測定IGFBP-3水平、免疫組化法測定IMP3水平。 結果 治療后，血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低，IGFBP-3水平升高，相比對照組，研究組SVEGFR1、IMP3、DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平較低，IGFBP-3水平較高（P<0.05）;對照組術后1年、3年復發率及復發時間均較高于研究組，研究組不良反應總發生率高于對照組（P>0.05）。 結論 TURBT聯合吉西他濱治療可提高膀胱癌患者的治療效果，可延長膀胱癌患者的生存時間，且毒副作用小，安全性較好，值得臨床推廣。

[關鍵詞] 尿道等離子電切術;吉西他濱;膀胱癌;影響

[中圖分類號] R699.2? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2022）17-0015-04

Effects of TURBT combined with gemcitabine on expression of SVEGFR1， IGFBP-3 and IMP3 in patients with bladder cancer

CAI Xianguo? ? LU Ziwen? ? LI Weilin? ?WU Hongjian

Departmentof Urology Surgery，Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University， Taizhou 317000，China

[Abstract] Objective To investigate the effect of Human soluble vascular endotherial growth factor receptor1（SVEGFR1） urethral plasmakinetic resection （TURBT） and gemcitabine on the expression of insulin-like growth factor binding protein -3 （IGFBP-3） and insulin-like growth factor II mRNA binding protein 3 （IMP3） in patients with bladder cancer. Methods A total of 101 patients with bladder cancer treated were collected? in Departmentof Urology Surgery，Taizhou Hospital of Zhejiang Province affiliated to Wenzhou Medical University from January 2015 to April 2018 and analyzed retrospectively. They were randomly divided into the control group and the research group， and the clinical efficacy of the two groups was compared. The levels of svegfr1， IGFBP-3 and IMP3 were measured by enzyme-linked immunosorbent assay， automatic chemiluminescence analyzer and immunohistochemistry. Results After treatment， the levels of serum DKK1，CYFRA21-1 and VEGF decreased and the levels of IGFBP-3 increased. Compared with the control group， the levels of SVEGFR1，IMP3， DKK1，CYFRA21-1 and VEGF in the study group were lower and the levels of IGFBP-3 were higher（P<0.05）;The recurrence rate at 1 and 3 years after operation in the control group was higher than that in the study group， and the total incidence of adverse reactions and tine to relapse in the study group was higher than that in the control group（P>0.05）. Conclusion TURBT combined with gemcitabine can improve the therapeutic effect of bladder cancer， prolong the survival time of patients with bladder cancer， and have less toxic side effects and better safety， which is worthy of clinical promotion.

[Key words] Plasma electrourethral resection; Gemcitabine; Bladder cancer; Impact

膀胱癌是發生在膀胱黏膜上的惡性腫瘤形成，是臨床最常見的惡性腫瘤之一[1，2]。膀胱癌的原因與長期吸煙有關，除此之外受慢性感染、個人飲食等原因都易導致，給患者機體功能、身心健康和生活質量造成巨大危害[3，4]。早期的膀胱癌是局限在膀胱黏膜的，常采用經尿道的膀胱腫瘤電切術進行治療，但復發率稍高，單一治療效果不理想[5]。吉西他濱作為一種化療藥，主要用于治療局部晚期或已有轉移的非小細胞肺癌和胰腺癌，療效顯著[6]。近年來研究發現可溶性血管內皮生長因子受體1（SVEGFR1）、血清胰島素樣生長因子結合蛋白-3（IGFBP-3）、胰島素樣生長因子Ⅱ mRNA結合蛋白（IMP3）在膀胱癌患者血清中存在異常表達，但臨床采用藥物治療膀胱癌患者對SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3水平影響的相關報道較少[7，8]?；诖?，本研究通過對膀胱癌患者采用TURBT、吉西他濱聯合治療，分析其對SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表達的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2015年1月～2018年4月浙江省臺州醫院泌尿外科治療的101例膀胱癌患者資料，隨機分為對照組50例與研究組51例。研究組男31例，女20例，年齡28～85歲，平均（56.5±22.8）歲;對照組男29例，女21例，年齡29～84歲，平均（56.5±22.0）歲。膀胱癌分為Ⅰ期55例、Ⅱ期56例。兩組的性別、年齡等臨床資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究已通過醫院醫學倫理委員會批準，患者及家屬均知情同意。

納入標準：①經病理學診斷為膀胱癌;②病灶直徑0.7～2.6 cm;③化療前血常規及心電圖、肝腎功能無異常者。排除標準：患有心、肝、肺、腎、免疫系統性等疾病者;②非原發性膀胱癌且合并其他惡性腫瘤者;③意識模糊不清或患有精神疾病，不能夠積極配合完成治療者;④對本研究藥物過敏者。

1.2 方法

兩組均進行尿道等離子電切術（TURBT）治療，患者平躺于治療床，取截石位，全身麻醉，消毒鋪巾后經尿道置入GYRUS電切鏡確認病灶位置、大小、數量，使用0.9% NaCl溶液沖洗，從腫瘤表面徹底切除至基底層，對膀胱腫瘤蒂部周圍約2 cm范圍進行處理，電凝止血，沖洗送檢，使用0.9% NaCl溶液沖洗，無出血置入導尿管，留置7d。對照組術后7d使用30 mg吡柔比星（浙江海正藥業股份有限公司，國藥準字H20045982）溶于50 ml 0.9% NaCl溶液進行稀釋灌注治療。研究組術后7d給予吉西他濱膀胱灌注治療，灌注前囑患者排空膀胱尿液，取截石位，將1.2 g吉西他濱（江蘇豪森藥業集團有限公司，國藥準字H20030104）于40 ml 0.9%NaCl溶液進行稀釋，囑患者適當變換體位，保留1 h后排出。兩組治療時間均為每周1次，2個月后改為每個月1次，持續治療1年。

1.3 觀察指標及隨訪

1.3.1 因子測定? 于治療前及治療1年后抽取兩組患者晨間空腹靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，-80℃冰箱保存備用。酶聯免疫吸附法檢測SVEGFR1、DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平。試劑盒購自上海機純實業有限公司。將標本血清自冰箱取出，室溫放置30 s，備置標準血清及溶液，300 μl洗板液洗板30 s，微孔拍干，導入50 μl檢測緩沖液，將50 μl標準液及樣本和檢測抗體放置微孔，封板，震蕩，室溫（37℃）孵育2 h，洗板，100 μl的酶標記物導入檢測孔，封板，震蕩，放置室溫內45 min，洗板，將100 μl底物液加入微孔，遮光孵育30 min，加入100 μl終止液，震蕩，采用酶標儀在450 nm處測吸光值。采用免疫組化法測定IMP3水平。石蠟切片脫蠟、水化后清洗3次，95℃檸檬酸鹽緩沖液（pH 6.0）加熱，30 min后取出，PBS液清洗。加0.3%過氧化氫，4%脫脂奶粉，孵育30 min，PBS清洗3次，滴加山羊血清，26 ℃培養0.5 h，添加一抗（1∶1000），4 ℃孵育過夜，PBS液清洗，滴加二抗兔抗羊IgG（1∶1000），孵育30 min，與抗生物素蛋白-生物素-過氧化物酶復合物，孵育30 min，PBS液清洗，DAB顯色處理8 min，蘇木精染核，反藍、脫水處理后封片，顯微鏡觀察（200倍），使用ImageJ軟件分析ANXA10、FOXM1、CD63表達的積分光密度值。IGFBP-3采用MAGLUMI2000全自動化學發光分析儀（武漢醫盾醫療器械有限公司）測定。

1.3.2 隨訪? 術后隨訪半年，51例膀胱癌患者進行隨機隨訪20例，隨訪率為39%，其中隨訪應答17例，應答率為85%;記錄兩組術后1、3年復發率和復發時間及并發癥發生率;統計并記錄患者的不良反應發生情況及復發預后情況，包括腹瀉、皮疹、惡心等。

1.4 統計學方法

應用SPSS 21.0統計學軟件處理數據，計量資料以均數±標準差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料用[n（%）]表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床資料分析

兩組患者臨床資料比較，差異無統計學意義（P>0.05）。見表1。

2.2 兩組血清腫瘤標志物水平比較

治療后，患者血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低，且研究組DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平較低于對照組，差異有統計學意義（均P<0.05）。見表2。

2.3 兩組血清SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3水平比較

治療后，患者血清SVEGFR1、IMP3水平降低，IGFBP-3水平升高，相比對照組，研究組SVEGFR1、IMP3水平較低，IGFBP-3水平較高，差異有統計學意義（均P<0.05）。見表3。

2.4 兩組患者預后情況比較

對照組術后1、3年復發率及復發時間均高于研究組，差異有統計學意義（均P<0.05）。見表4。

2.5 兩組不良反應比較

治療后，研究組不良反應總發生率（13.73%）略高于對照組（12.00%），但差異無統計學意義（P>0.05）。見表5。3 討論

膀胱癌是一種常見的惡性腫瘤，其發病率占我國男性泌尿生殖系統的首位。膀胱癌主要表現為血尿、尿頻尿急尿痛和排尿困難或上尿路梗阻等癥狀[9，10]。因此，根據患者機體不同狀態，確定不同的治療方案，具有重要價值。

本結果顯示，治療后膀胱癌患者DKK1、CYFRA21-1、VEGF水平降低，提示聯合治療可發揮協同作用，可減少術后復發和浸潤現象，療效顯著。研究顯示，血清DKK1、CYFRA21-1及VEGF可作為判斷腫瘤活性的參考指標[11]。TURBT具有操作簡便、安全性高、可縮短術后恢復時間、術中術后出血少等優點，唯一不足之處在于術后1年極易復發[12]。大量研究顯示，治療后膀胱癌復發的原因與臨床治療手段、機體免疫力差、殘留腫瘤細胞及浸潤程度等有關[13，14]。因此，術后行膀胱灌注化療可減少復發率，殺滅殘留腫瘤細胞，且術后早期灌注化療療效比常規灌注化療療效顯著[15]。本研究顯示，聯合治療可降低復發率及患者體內血清DKK1、CYFRA21-1、VEGF表達水平，進而達到抑制腫瘤生長的目的，與上述研究結果基本一致。

IMP3是一種分泌性蛋白，可結合胰島素樣生長因子抑制細胞增殖、促進細胞凋亡等[16]。SVEGFR1是血管內皮生長因子受體（VEGF）的抑制劑，可通過抑制VEGF與膜表面受體結合，進而抑制腫瘤血管生成[17]。經研究證實，惡性腫瘤的發生發展與SVEGFR1、IMP3、IGFBP-3相關[18]。劉繼普等[19]發現，VEGF在膀胱癌患者表達較高，且隨著T分期增加，VEGF表達越高。有研究發現，腫瘤分級越高、T分期越晚、腫瘤復發率越高，IMP3蛋白陽性表達率及SVEGFR1表達就越高，表明腫瘤的惡性程度與IMP3、SVEGFR1表達有關;IGFBP-3表達與之相反、相關分析結果顯示，IMP3蛋白表達陽性是膀胱癌患者預后的獨立危險因素，進一步表明IMP3表達參與膀胱癌疾病過程[20]。石光英等[21]在相關研究中顯示，肝癌患者血清IGFBP-3水平下降，術前IGFBP-3低水平是肝癌早期復發的危險因素。本研究顯示，TURBT、吉西他濱聯合應用治療后膀胱癌患者SVEGFR1、IMP3水平下降，IGFBP-3水平升高，且聯合治療療效優于單一治療，提示SVEGFR1、IGFBP-3、IMP3表達在膀胱癌疾病的發生、發展中具有重要意義。

綜上所述，TURBT聯合吉西他濱應用可提高膀胱癌患者的治療效果，抑制SVEGFR1、IMP3水平，上調IGFBP-3水平，可延長膀胱癌患者的生存時間，且毒副作用小，安全性較好，值得臨床推廣。但本研究樣本納入量較小，可能會使研究結果有偏差，需進一步加大樣本量深入研究確認。

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（收稿日期：2021-10-14）