枳椇子化學成分及質量控制方法研究進展*

(亳州學院，安徽 亳州 236800)

枳椇子為鼠李科植物北枳椇HoveniadulcisThunb.、枳椇HoveniaacerbaLindl.或毛果枳椇HoveniatrichocarpaChun et Tsiang的干燥成熟種子[1]。枳椇子始載于《唐·新修本草》[2]，以“枳椇子”為名，10～11月果實成熟時，連肉質花序軸一并摘下，取出種子，干燥。具有清熱利尿，止渴除煩，解酒毒，利二便的功效。適用于煩熱，口渴，嘔吐，酒醉，二便不利等癥[1]。

含有枳椇子的中藥方劑較少，但枳椇子近年來被開發成多種保健品(如保然片，艾爾口服液，天健膠囊等)則被廣泛應用。目前，枳椇子的國家標準及相關省中藥材標準或中藥炮制規范中對其質量控制項目及標準限定存在差異[3-5]。為了系統的概述枳椇子質量控制方法和研究進展，本文就枳椇子的化學成分、分析方法、質量標準現狀進行概述和總結，提出枳椇子質量控制中存在的主要問題，為完善枳椇子相關質量標準奠定基礎。

1 枳椇子的化學成分

枳椇子化學成分豐富，主要包括黃酮類、三萜皂苷類、生物堿類和其他類等。

1.1黃酮類 張奇等[6]對枳椇子60%乙醇水提取物進行萃取、分離純化、檢測后，初步推測枳椇子乙酸乙酯部位，具有抗腫瘤活性的物質是二氫楊梅素(dihydromyricelin)。高美華等[7]對毛果枳椇子的醇提物進行分離和鑒定，經鑒定9種化合物分別為：槲皮素(quecetin)、牡荊素2″-O-β-D-葡萄糖苷(vitexin 2″-O-β-D-glucopyrano side)、斯皮諾素(spinosin)、當藥黃素(swertish)、(2R，3R)-二氫楊梅素[(2R，3R)-dihydromyricitin]、雙氫槲皮素(dihydroquercetin)、楊梅素(myricitin)、(-)-沒食子兒茶素[(-)-gallocatechin]和異牡荊素2″-O-β-D-葡萄糖苷(isovitexin 2″-O-β-D-glucopyranoside)。謝蓉蓉等[8]對枳椇子進行提取純化后得到3個新化合物hovenitins Ⅰ，laricetrin，Dihydromyricetin。彭玲[9]采用HPLC-ESI-MS/MS聯用分析技術，從枳椇子總黃酮中分離鑒定出5個黃酮類成分：雙氫楊梅素，枳椇素Ⅲ，雙氫槲皮素，(+)-3，3′，5，5，7-5-OH-雙氫黃酮及棚皮素。晉海洋[10]以80%乙醇為溶劑對枳椇子進行回流提取，經色譜、結晶等手段分離后，對得到的單體化合物鑒定后得知其中包括雙氫楊梅素，楊梅素等黃酮類物質。徐方方[11]從枳椇子醇提取物中分離純化鑒定出4種新的黃酮木脂素類化合物：hovenin A，hovenin B，hovenin C，hovenin D。

1.2三萜皂苷類 徐方方[11]從枳椇子70%乙醇的提取物中分離并鑒定出2種新三萜皂苷類化合物：acerboside A、acerboside B。衣淑珍等[12]從枳椇子中分離出6個三萜皂苷類成分：3-O-豆甾醇-(6-棕櫚?；?-β-D-吡喃葡萄糖苷、hoduloside Ⅳ、β-胡蘿卜苷、saponins C2、hovenidulcioside A1、hoduloside I。張晶等[13]的研究表明枳椇子含有白樺酯醇，2α，3β-二羥基白樺酯酸，3β-羥基-18(19)-烯-齊墩果烷-28-甲酸。

1.3生物堿類 枳椇子中生物堿類研究較少。金寶淵等[14]通過對枳椇子生物堿成分的研究，分離純化得到β-carboline系生物堿化合物perlolyrine。

1.4其他類 曹利雅等[15]利用氣質聯用技術分析了枳椇子油中總脂肪酸的組成，發現(Z)-9-十八烯酸和亞油酸這兩種成分所占比例較高，是其主要成分。申向榮[16]的研究表明枳椇子中含有β-谷甾醇(β-sitosterol)，正二十八烷醇(l-octacosanol)，△22-豆甾烯醇(stigmasterol)和二十烷酸(eicosane acid)等物質。李克明等[17]采用峰面積歸一化法測出枳椇子中31種脂肪酸甲酯的含量。

2 枳椇子的分析方法

2.1枳椇子的鑒別

2.1.1顯微鑒別 王雪等[18]以枳椇子及酸棗仁，理棗仁為研究對象，發現三者性狀差異主要體現在種皮質地、縱線紋有無及表面顏色等方面；顯微特征差異主要體現在種皮柵狀細胞大小、晶體有無及其種類等方面。昌水平等[19]對枳椇子和酸棗仁進行了藥材性狀、顯微特征鑒定比較。發現枳椇子呈扁圓形、較小，中央無隆起的縱紋，味微澀；顯微特征方面，枳椇子柵狀細胞較大，種皮中有色素層，色素層近卵形，壁薄。韓軍營等[20]利用性狀鑒別、顯微鑒別對枳椇子、酸棗仁和理棗仁進行鑒別，也得出類似的結論。孫巍等[21]研究枳椇子與酸棗仁的性狀，得出前者表面呈紅褐色或棕黑色而后者則呈現紫褐色或紫紅色。張紅梅[22]比較了四川中藥材市場上枳椇子，酸棗仁和理棗仁的來源，形狀，表面，質地，胚乳，子葉，氣味方面的差異。觀察得到枳椇子具有如下特征：子葉淡黃色，肥厚，胚乳黃白色等。

2.1.2薄層鑒別 劉以霞[23]以槲皮素作為對照品，對枳椇子藥材醇提物鑒別，結果供試品薄層色譜中，在與槲皮素色譜相對應的位置處，顯示相同顏色的熒光斑點。彭玲[9]比較了不同展開系統對枳椇子中黃酮類成分展開效果的影響，在以甲酸-甲醇-氯仿-乙酸乙酯(0.1∶2∶5∶1)為展開劑時，斑點多且清晰。孫巍等[21]研究枳椇子與酸棗仁的薄層色譜鑒別，結果酸棗仁顯10個藍色斑點，枳椇子有4個與其對應的藍色斑點。昌水平等[19]曾對枳椇子和酸棗仁進行了薄層層析及蛋白電泳鑒定比較。

2.1.3光譜鑒別 李同芬[24]對枳椇子、酸棗仁和理棗仁的紫外吸收光譜進行測定，結果表明在不同溶劑提取液中三者的紫外譜圖差異明顯，特別是無水乙醇提取液的紫外譜圖區別最大，據此可把三者區別。孫巍等[21]研究枳椇子與酸棗仁的理化鑒別熒光反應，發現酸棗仁顯現天藍色熒光，枳椇子則顯深黃色熒光。

2.2重金屬檢查 陳維等[25]采用電感耦合等離子體質譜法，對10批黔產枳椇子中銅(Cu)、砷(As)、鎘(Cd)、鉛(Pb)、汞(Hg)進行測定，測得含量依次為5.09～8.01 mg·kg-1，0.011～0.039 mg·kg-1，0.00216～0.0157 mg·kg-1，0.012～0.263 mg·kg-1，0.008～0.182 mg·kg-1，均在限量指標范圍之內。

2.3含量測定 張凰等[26]采用超聲波輔助對枳椇子中總黃酮進行提取，經AB-8型大孔樹脂純化后，總黃酮粉中二氫楊梅素含量達到17.02%。田智勇等[27]優化了枳椇子總黃酮的超聲最佳工藝條件，在最佳提取條件下測得總黃酮含量為1.17 mg·g-1，平均回收率96.92%。孫學惠等[28]研究得出當采用12倍量50%乙醇溶液，提取1.5 h時，經測定枳椇子中槲皮素含量約為0.39%，平均加樣回收率、RSD依次為101.1%、1.7%。曾嶸等[29]用甲醇為溶劑超聲提取枳椇子中槲皮素，經HPLC測定三批樣品中槲皮素的含量依次為0.888，0.889，0.874 mg·g-1，RSD為1.08%，回收率為98.78%。楊航等[30]以蘆丁作為對照品，經過三氯化鋁顯色，采用分光光度法對枳椇各部位(種子、葉子、果梗、種殼、果渣、枝干)總黃酮含量進行測定，結果枳椇子中總黃酮的含量為5.081 mg·g-1。宋粉云等[31]對枳椇子樣品提取方法和水解條件進行優化后，采用反相HPLC測定不同產地枳椇子中槲皮素含量，結果廣東、山西、廣西的枳椇子中槲皮素平均含量分別為0.64%、0.64%、0.01%。時濤等[32]采用超臨界CO2流體萃取技術結合氣相色譜-質譜聯用技術測得枳椇子脂肪油含量為8.3%，其中不飽和脂肪酸約占37.6%。

2.4指紋圖譜 建立中藥指紋圖譜有利于保持原料和成品的一致性、完善中藥質量標準以及減小不同批之間的差異性[33]。劉聰等[34]采集了12個省(市)的24份枳椇子藥材，建立了該藥材的HPLC指紋圖譜體系。經分析，不同地區枳椇子HPLC指紋圖譜能在一定程度上反映其所含化學成分的類型及其組成的產地差異。楊雪艷等[35]對不同產地17批枳椇子藥材建立了HPLC指紋圖譜，確定14個共有峰。

3 枳椇子質量標準現狀

對國內現行的標準進行檢索，梳理比較了不同標準中有關枳椇子的名稱、來源、性狀、鑒別、檢查、浸出物、含量測等檢測項目，見表1(部分列舉)。

表1 枳椇子國家及地方質量標準

續表1 枳椇子國家及地方質量標準

4 枳椇子質量控制存在的問題

從表1可以看出大多數質量標準對枳椇子來源描述一致，均表述為鼠李科植物枳椇的干燥成熟種子，但還有一些例外，如臺灣中藥典中則表述為鼠李科植物枳椇、北枳椇或毛果枳椇的干燥成熟種子，這表明不同地區有關枳椇子原植物種質的界定存在差異。另外，有些地方標準鑒別項包括了顯微和薄層，有些標準僅包括一種鑒別方式甚至尚未對枳椇子鑒別項提出要求，由此可以看出枳椇子的鑒別項較為單薄。再者，除香港中藥材標準外，其他質量標準缺少安全性檢查項目(如霉菌毒素、重金屬及有害元素、農藥殘留等)、浸出物和含量測定等，不利于枳椇子的質量控制。

5 結語

有關枳椇子中化學成分和主要成分含量測定方面的研究頗多，但是衛生部藥材標準和地方標準中檢測項目及標準限定差異大。枳椇子質量標準體系相對簡單，如何提高和完善枳椇子的質量標準，從而更大發揮其藥用價值是值得深思的問題。