舒泰與賽拉嗪聯合使用對巴馬小型豬的麻醉效果及影響

冉艷洪，顏欣欣，宋 慧，周珊珊，王俐梅，楊 威

（ 廣州灣區生物醫藥研究院 廣東萊恩醫藥研究院有限公司廣東省藥物非臨床評價研究企業重點實驗室 國家中藥現代化工程技術研究中心中藥非臨床評價分中心 廣東省創新藥物評價與研究工程技術研究中心，廣東 廣州 510990 ）

在動物試驗中，良好且穩定的麻醉既要求能夠保證操作順利進行、人員安全和動物福利，又要盡可能避免對采集的試驗數據的干擾。小型豬作為實驗動物具有很強的優勢[1-2]，在生物醫學研究中常需使用藥物對其進行鎮靜或麻醉，其中氯胺酮和舒泰是小型豬最常用的注射類麻醉藥。然而，氯胺酮的購買、管理和使用均受到管控，限制了其在臨床實踐中的日常使用。舒泰作為新型的分離麻醉劑，屬非管制類藥品，易獲得，已廣泛應用于多種屬動物，但肌松效果差。而賽拉嗪作為α腎上腺素受體激動劑，具有良好的鎮靜、鎮痛和肌松效果，二者聯合使用能夠取長補短，具有廣闊的應用前景[3]。值得注意的是，運用任何麻醉藥物均可能導致動物產生潛在的生理并發癥，如呼吸抑制、血流動力學改變和高脂血癥等，但目前有關小型豬聯合使用舒泰和賽拉嗪進行麻醉的用量尚無統一標準，對麻醉的穩定性及安全性也知之甚少。因此，本文旨在探索舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬的麻醉效果，并系統闡述麻醉劑量對動物生理指標的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物

普通級巴馬小型豬6 只，2 雌4 雄，7～8 月齡，體重（14.25±1.32） kg，均購自湖北奧菲生物科技有限公司，飼養于廣東萊恩醫藥研究院有限公司（已獲得國際AAALAC認可）普通環境動物房。

1.1.2 主要儀器

MC-347 型電子體溫計【歐姆龍健康醫療（中國）有限公司】；SP2006 心電圖采集與解析系統、BP-2010E 智能無創血壓計（北京軟隆生物技術有限公司）；XN-1000[B3]全自動血液分析儀【希森美康醫用電子（上海）有限公司】；7180全自動生化分析儀（日本日立公司）；IW2-150電子臺秤【賽多利斯工業稱重設備（北京）有限公司】。

1.1.3 主要試劑

舒泰50（替來他明125 mg+唑拉西泮125 mg），由VIRBAC公司生產；鹽酸賽拉嗪注射液（2 mL∶0.1 g），由吉林省華牧動物保健品有限公司生產；血常規檢測試劑，由Sysmex 公司生產；血液生化學檢測試劑，由浙江伊利康生物科技有限公司生產。

1.2 試驗設計

試驗設置3 個劑量組，6 只巴馬小型豬間隔使用舒泰0.75 mg/kg+賽拉嗪6 mg/kg（A 組）、舒泰0.75 mg/kg+賽拉嗪12 mg/kg（B組）、舒泰1.00 mg/kg+賽拉嗪8 mg/kg（C組）經肌肉注射進行麻醉，注射部位為耳后三角區，不同組麻醉時間間隔5 d 以上，麻醉前禁食不禁水約12～14 h，麻醉過程中采用毛巾覆蓋全身進行保溫處理。

1.3 測定指標及方法

1.3.1 麻醉效果評估

觀察動物麻醉過程中的體動情況和鎮靜鎮痛效果，并記錄麻醉誘導時間、維持時間和恢復時間。誘導時間指從注射麻醉藥物到動物趴臥安靜、翻正反射和眼瞼反射消失的時間間隔；維持時間指無外界刺激下，自動物趴臥安靜、翻正反射和眼瞼反射消失至動物眼瞼反射恢復、肢體恢復自主活動的時間間隔；恢復時間指在無外界刺激下，自動物眼瞼反射恢復、肢體恢復自主活動至動物可以自主站立的時間間隔。

1.3.2 生理指標監測

在麻醉前后對巴馬小型豬進行肛溫、呼吸頻率、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、平均動脈壓（MBP）、心電圖（ECG）以及血常規和血液生化的相關指標進行監測。在安靜狀態下使用智能無創血壓計測量巴馬小型豬前肢的SBP、DBP、MBP，使用Ⅱ導聯監測心電圖；使用全自動血液體液分析儀、全自動生化分析儀及相應的檢測試劑檢測血常規、血清生化檢查指標。上述檢測項目均按照試劑盒或儀器說明書進行操作。

由于實驗室工作人員的待遇跟授課教師的待遇差別很大，沒有得到同教學科研人員同等的待遇，導致很多實驗室管理人員數量不足，并且存在散漫管理的現象，所以，民辦高校要通過多種渠道提高實驗室管理人員的工作熱情。

血常規指標包括：白細胞數（WBC）、紅細胞數（RBC）、血紅蛋白（HGB）、血細胞比容（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）、平均血紅蛋白含量（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板數（PLT）、嗜中性粒細胞數（NEUT）、淋巴細胞數（LYMPH）、單核細胞數（MONO）、嗜酸性粒細胞數（EO）、嗜堿性細胞數（BASO）。

血清生化檢查指標包括：谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、乳酸脫氫酶（LDH）、谷氨酰轉移酶（GGT）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）。

1.4 數據統計分析

采用SPSS 21.0 軟件對試驗數據進行統計分析，組間比較采用LSD-t檢驗，組內比較采用獨立樣本t檢驗。結果以“平均值±標準差”表示，P＜0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬麻醉效果的影響（見表1）

表1 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬麻醉時間的影響Tab.1 Effect of zoletil combined with xylazine on anesthesia time in Bama miniature pigs 單位：min

A 組、B 組和C 組巴馬小型豬在注射麻醉藥物后均穩定進入麻醉狀態，麻醉成功率100%，且維持麻醉期間內肌肉松弛良好、眼瞼反射和角膜反射均消失，針刺四肢內側皮膚無痛覺，亦未見動物死亡。

由表1 可知，各組誘導時間差異不顯著（P＞0.05）；B 組、C 組維持時間顯著高于A 組（P＜0.05），B 組與C 組維持時間差異不顯著（P＞0.05）；C組恢復時間顯著高于A組、B組（P＜0.05），A組、B組間差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬生理指標的影響

表2 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬肛溫的影響Tab.2 Effect of zoletil combined with xylazine on the rectal temperature of the Bama miniature pigs 單位：℃

表3 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬呼吸頻率的影響Tab.3 Effect of zoletil combined with xylazine on the respiratory rate of the Bama miniature pigs 單位：次/min

由表2、表3可知，A組、B組和C組的肛溫和呼吸頻率在麻醉后整體上呈現出降低趨勢，在蘇醒后約1 h 時已恢復至正常范圍。組內分析結果顯示，麻醉中（30±5） min時A 組豬的肛溫顯著低于麻醉前（P＜0.05）；麻醉中（50±5） min 時B 組豬的肛溫顯著低于麻醉前（P＜0.05）；麻醉中（30±5）、（50±5） min 時C 組豬的肛溫顯著低于麻醉前（P＜0.05）。麻醉前后A 組、B 組豬的呼吸頻率差異均不顯著（P＞0.05）；麻醉中C組豬的肛溫呼吸頻率均顯著低于麻醉前（P＜0.05）。組間比較，麻醉前后各組豬的肛溫和呼吸頻率差異均不顯著（P＞0.05）。

2.2.2 舒泰聯合賽拉嗪對麻醉中巴馬小型豬無創血壓的影響（見表4）

表4 舒泰聯合賽拉嗪對麻醉中巴馬小型豬無創血壓的影響Tab.4 Effect of zoletil combined with xylazine on the non-invasive blood pressure of the Bama miniature pigs under anesthesia 單位：mmHg

由表4可知，隨著麻醉時間延長，各組豬的SBP、DBP、MBP 均呈下降趨勢，并且隨著舒泰使用劑量增高，其對SBP、DBP、MBP 的影響更明顯。麻醉中、后期B 組和C 組豬的SBP、DBP、MBP均顯著低于麻醉初期（P＜0.05）。

2.2.3 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬心電圖各間期的影響（見表5）

表5 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬心電圖各間期的影響Tab.5 Effect of zoletil combined with xylazine on the electrocardiogram intervals of the Bama miniature pigs 單位：ms

由表5 可知，巴馬小型豬使用舒泰聯合賽拉嗪麻醉首先會造成Q-T 間期延長，之后QRS 波群和P-R 間期也逐漸受到影響。

A 組豬整個麻醉期內的QRS 波群與麻醉前和蘇醒后1 h 相比差異不顯著（P＞0.05），麻醉中（30±5） min 的P-R間期和麻醉中（10±5）、（30±5） min的Q-T間期顯著高于麻醉前（P＜0.05）。B 組與C 組麻醉過程中（30±5）、（50±5） min的QRS波群、P-R間期和整個麻醉期內的Q-T間期均顯著高于麻醉前（P＜0.05），其中Q-T 間期在蘇醒1 h 后仍未恢復至正常范圍（P＞0.05）。

此外，B 組和C 組豬麻醉過程中（30±5） min 的QRS波群和Q-T間期時長均低于A組（P＜0.05），而P-R間期時長高于A 組（P＜0.05）；蘇醒后1 h 各組豬QRS 波群和P-R間期未見明顯差異（P＞0.05）。

2.3 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬血常規指標的影響（見表6）

表6 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬血常規指標的影響Tab.6 Effect of zoletil combined with xylazine on the blood routine indicators of the Bama miniature pigs

由表6 可知，麻醉后A 組豬WBC 顯著高于麻醉前（P＜0.05）；各組豬其他血常規指標麻醉前后差異均不顯著（P＞0.05）。結果表明，巴馬小型豬使用舒泰聯合賽拉嗪麻醉后約24 h，血常規指標不會發生明顯改變。

2.4 舒泰聯合賽拉嗪對巴馬小型豬血清生化指標的影響（見表7）

表7 不同劑量舒泰和賽拉嗪對巴馬小型豬對血清生化指標的影響Tab.7 Effect of zoletil combined with xylazine on the serum biochemistry indicators of the Bama miniature pigs

由表7可知，麻醉后A組豬血清BUN含量以及B組與C 組豬血清AST 活性和BUN 含量均顯著高于麻醉前（P＜0.05），表明巴馬小型豬使用舒泰聯合賽拉嗪麻醉后約24 h能夠影響肝腎功能相關指標。

3 討論

在麻醉效果方面，本試驗使用0.75～1.00 mg/kg舒泰聯合6～12 mg/kg賽拉嗪進行麻醉，巴馬小型豬均能夠快速且穩定地進入良好的麻醉狀態，維持麻醉期間鎮痛、肌松效果良好，維持時間甚至可達到90 min以上，優于申晨等[4]使用氯胺酮復合賽拉嗪麻醉巴馬小型豬的麻醉時長；麻醉維持時間與舒泰或賽拉嗪的使用劑量表現出明顯的劑量-效應關系，這與薛來恩等[5]、Hernande-Godine 等[6]的研究結果一致，即麻醉維持時間隨著麻醉藥物使用劑量的增大而延長，同時二者誘導時間無較大差異，而麻醉恢復時間差異較大則主要與評判標準不一致有關。

在體溫、呼吸頻率影響方面，麻醉后各組巴馬小型豬的肛溫、呼吸頻率整體上均呈降低趨勢，之后在維持麻醉期內保持穩定，但麻醉期內的體溫與麻醉前相比最大降幅度可達2.4 ℃，這與麻醉藥物具有抑制體溫調節中樞、擴張外周血管作用，造成機體體溫自主調節能力喪失和產熱散熱失衡有關[5,7-10]。低體溫可導致動物蘇醒時間延長、凝血功能障礙、心血管不良事件和心肌缺血風險等，因此，在長時間麻醉中對動物在術前、術中和術后的體溫進行連續監測并提供有效的加溫措施非常必要。體溫保護措施可分為被動保溫和主動保溫，被動保溫僅能減少30%的熱量散失，術后仍需根據動物狀態確定是否實施主動保溫措施以預防體溫繼續降低[11]。

在心臟功能抑制方面，本試驗中，各組巴馬小型豬在麻醉期內均出現QRS波群、P-R間期和Q-T間期延長以及SBP、DBP、MBP 降低的情況，證實了賽拉嗪作為強效α 腎上腺素受體激動劑可以通過抑制交感神經并興奮迷走神經，抑制心臟傳導，降低心率和心搏出量從而導致低血壓的情況[3]。使用舒泰或氯胺酮聯合賽拉嗪麻醉小型豬后發現，小型豬血壓未見明顯變化，這可能主要與使用劑量有關。此外，血壓測量方法、測量部位也會造成一定差異[5,12-14]。值得注意的是，使血壓維持在基礎值±20%的范圍內可有效避免心肌缺氧梗死，因此，當麻醉動物處于低血壓狀態時，應適時給予麻醉拮抗劑、α腎上腺素受體激動劑或腎上腺素、阿托品和多巴胺等升壓藥物進行解救[15-16]。

在肝臟、腎臟功能方面，本試驗中各組巴馬小型豬的血常規指標在麻醉后24 h 未見明顯改變，而A 組豬血清BUN 含量以及B組、C組豬血清AST 活性、BUN 含量顯著升高。申晨等[4]、李雯雯等[13]、秦超等[17]和賀紹君等[18]研究結果顯示，單獨或聯合使用不超過2.2 mg/kg 賽拉嗪麻醉小型豬等動物后，血液生化指標未見明顯改變，這主要與麻醉后的血液樣本采集時間有關，種屬差異也會產生一定影響，說明巴馬小型豬使用賽拉嗪的麻醉劑量超過6 mg/kg時會影響肝腎代謝功能。但由于本試驗未對上述血常規、血清生化指標的變化情況進行連續監測，因此，舒泰聯合賽拉嗪麻醉對巴馬小型豬肝腎功能影響的持續時間以及是否可逆仍有待進一步確認。

4 結論

本研究結果表明，巴馬小型豬使用0.75～1.00 mg/kg舒泰聯合賽拉嗪麻醉時，機體耐受性良好，并且可通過調整麻醉劑用量實現對麻醉時長和生理指標影響程度的控制，是一種安全、穩定的麻醉方法。