江蘇省免費孕前優生健康檢查乙肝五項室間質評結果分析

周青 林寧 劉帥妹 張瑞金 李孟蘭 封婕 黃麗麗 吳玉璘

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒感染所導致,通過性接觸、母嬰和血液等方式進行傳播,其傳染性強,流行性廣,是引起慢性肝炎、肝硬化甚至肝癌的主要誘因,臨床癥狀主要表現為腹脹和乏力等[1-3]。乙型肝炎不僅可提高妊娠糖尿病、胎膜早破、產前出血和剖宮產等風險,還會造成母嬰傳播[4-6],威脅新生兒的健康;雖然乙型肝炎免疫球蛋白和乙肝疫苗的的聯合應用可以有效阻斷母嬰傳播,但仍然存在5%～10%阻斷失敗的風險[7-10]。有研究報道妊娠期乙肝表面抗原攜帶者會增加膽汁淤積癥和子癇前期的發生風險,同時影響子代遠期生長,對孕婦和胎兒造成很大的危害[11-12]。因此,孕前乙肝五項血清學檢測極其重要。乙型肝炎血清學檢測是國家免費孕前優生項目醫學檢驗的重要內容之一,廣泛開展孕前夫婦乙型肝炎的檢測,有利于降低母嬰傳播的風險和優生優育的開展。為保證項目的規范實施,提高基層實驗室檢測能力和服務質量,從2012年起本中心根據《臨床實驗室室間質評評價要求》[13-14]每年對江蘇省參與免費孕前優生健康檢查的臨床檢驗實驗室,開展兩次乙肝五項血清學試驗室間質評活動,現將2012—2021年乙肝五項血清學試驗相關室間質評結果進行匯總報告。

對象與方法

一、參評單位與檢測方法

參加室間質評活動單位是承擔江蘇地區國家免費孕前優生檢查項目的臨床檢驗實驗室,檢測項目包括乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗體(HBeAb)和乙肝核心抗體(HBcAb)。檢測方法包括ELISA、化學發光法、膠體金、時間分辨免疫熒光法、乳膠法、化學發光微粒子免疫檢測法、磁微?；瘜W發光法。

二、質評方法

1.質控品發放:本中心統一采購質控品,并通過順豐快遞郵寄到各個參評單位臨床檢驗實驗室,每個檢測項目包含5份標本。

2.質控品檢測:各參評單位收到質控品之后,在規定的時間內采用平時檢測常規標本的試劑和方法對質控品進行檢測,并將檢測結果通過網絡回報至本中心。

3.質控品預期結果確定:定性結果按照廠家提供室間質評質控品說明書來確定檢測結果的預期值。

三、評分標準

按照國家衛生健康委臨檢中心室間質量評價的統一要求,使用PT得分評價的方法,PT得分是參照美國CLIA′88能力比對檢驗分析質量標準,代表HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 5個項目檢測結果與預期值一致所得的分數。每份質控品的檢測結果與預期值一致,得20分,否則得0分,每個檢測項目共有5份標本,滿分應為100分,且總分≥80分為合格,總分<80分為不合格。

滿分率為PT得分100分的實驗室數占參與本次室間質評總的實驗室數的百分比、合格率為PT得分≥80 分的實驗室數占參與本次室間質評總的實驗室數的百分比、不合格率為PT得分<80分的實驗室數占參與本次室間質評總的實驗室數的百分比。

漏檢率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標本中檢測結果為陰性與預期值陽性不一致標本例數占檢測結果應為陽性標本總例數的百分比?？傟栃月z率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標本中檢測結果為陰性與預期值陽性或弱陽性不一致標本例數占檢測結果應為陽性或弱陽性標本總例數的百分比;陽性漏檢率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標本中檢測結果為陰性與預期值陽性不一致標本例數占檢測結果應為陽性標本總例數的百分比;弱陽性漏檢率為HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 項目的5份標本中檢測結果為陰性與預期值弱陽性不一致標本例數占檢測結果應為弱陽性標本總例數的百分比。

四、統計方法

采用Excel表進行數據錄入,SPSS 19.0軟件分析處理數據,計數資料以百分率(%)表示,組間比較采用χ2檢驗,P<0.05具有統計學意義。

結 果

一、2012年—2021年室間質評考核成績

2012年—2021年一共組織開展19次室間質評活動,其中2012年僅有一次,其余均為每年2次。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 5個項目室間質評的合格率(≥80分)分別從最低94.2%(81/86)、94.2%(81/86)、94.2%(81/86)、90.9%(70/77)和67.4%(64/95)至100%之間浮動;滿分率分別從最低72.6%(69/95)、73.7%(70/95)、94.2%(81/86)、82.1%(78/95)和13.7%(13/95)至100%之間浮動,詳見表1。將2012—2016年與2017—2021年兩個時間段乙肝五項血清學檢測結果滿分率和合格率進行比較,結果顯示:與2012—2016年相比較,2017—2021年乙肝五項血清學滿分率和合格率均明顯提高,且HBsAg、HBsAb和HBcAb在兩個時間段滿分率和合格率差異均有統計學意義(P<0.05),HBeAg合格率、HBeAb滿分率在兩個時間段差異有統計學意義(P<0.05),詳見表2。

表1 2012年—2021年江蘇省免費孕前優生健康檢查乙肝五項血清學試驗室間質評結果Table1 Pre-pregnancy health examination of hepatitis B serology laboratory quality evaluation results in Jiangsu Province,2012-2021

表2 2012—2016年和2017—2021年乙肝五項血清學考核成績滿分率和合格率比較(%)Table 2 Comparison of full mark rate and qualified rate of five hepatitis B serological assessment scores from 2012 to 2016 and from 2017 to 2021(%)

二、乙肝陽性漏檢率

2012年第一次—2021年第二次,HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb總陽性漏檢率分別從9.8%(28/285),13.2%(25/190),5.8%(5/86),16.8%(16/95) 和 47.4%(135/285)降至為0%;陽性漏檢率分別從2.9%(5/172)、5.8%(5/86)、5.8%(5/86)、8.2%(19/231)、47.4%(135/285)降至0%;弱陽漏檢率最高達27.4%(26/95)、26.3%(25/95)、1.2%(1/82)、16.8%(16/95)和28.4%(23/81),詳情見表3。

表3 2012年—2021年江蘇省免費孕前優生檢查乙肝五項血清學試驗室間質評結果陽性漏檢率Table 3 Positive missed rate of the external quality assessment of five serological tests of hepatitis B in Jiangsu Province,2012-2021

討 論

室間質評通過向各臨床檢驗實驗室發放質控品,確定實驗室之間檢測方法的可比性,是評價實驗室檢測結果準確性和實驗室檢測質量的重要手段以及促進臨床檢驗實驗室檢測質量持續改進的重要工具?；鶎訉嶒炇覅⒓邮议g質評項目,可獲得能力驗證,及時發現實驗室存在的問題,并針對性制定改正措施,從而提高檢測能力[15-18]?；鶎訉嶒炇覚z測能力的提高和規范化建設,可降低漏報誤報率,提高實驗室的檢測水平[19]。本中心從2012年起,每年組織開展2次乙肝五項血清學試驗室間質評活動,一方面了解各基層臨床檢驗實驗室乙肝五項血清學檢測水平;其次可以幫助成績不理想的基層實驗室進行分析總結找出原因并督促改進,完成基層實驗室的整改,提高乙肝五項血清學檢測水平。

綜合分析2012年—2021年乙肝五項血清學室間質評結果發現,江蘇地區各基層臨床檢驗實驗室乙肝五項血清學檢測能力逐步提升,其中HBsAg的滿分率從2012年72.6%提高到2016年第一次的100%,2016年第二次至2021年第二次滿分率一直保持在98%以上;HBsAb的滿分率從2012年73.7%提高到2014年第一次的100%,2014年第二次至2021年第二次滿分率一直保持在94%以上;HBeAg的滿分率從2012年至2021年第二次一直保持在94.2%以上;HBeAb的滿分率從2012年82.1%提高到2016年第二次的100%,2017年第一次至2021年第二次滿分率一直保持在95%以上,但在2020年第一次出現明顯下滑,僅為84.4%,總陽性漏檢率達8.2%,可能是因為部分實驗室的檢測試劑在長途運輸環境條件未得到保證或者因試劑開封之后未密封暴露時間過長或檢測員操作不當[20];HBcAb的滿分率從2012年13.7%提高到2019年第二次的100%,2020年第一次至2021年第二次滿分率一直保持在96%以上。比較2012年至2016年和2017年至2021年兩個時間段,室間質評考核成績的合格率和滿分率,顯示2017年至2021年合格率和滿分率明顯高于2012年至2016年時間段,可見基層醫療機構乙肝五項血清學檢測能力顯著提高,得益于室間質評工作的開展。當實驗室檢測結果與預期值存在較大差異,基層工作人員認真分析原因,積極采取相應措施并改進[21-23]。但仍有部分實驗室乙肝五項室間質評成績未達到合格,可能是因為檢測人員操作不夠規范、儀器使用不符合操作規程和結果判讀不準確等,因此該地區應強化人員的培訓,并需專家組到現場進行規范指導[24]。2012年至2021年HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb 弱陽漏檢率最高分別達27.4%、26.3%、1.2%、16.8%和28.4%,陽性漏檢率最高分別達2.9%、5.8%、5.8%、8.2%、47.4%,原因可能是操作人員技術差錯,需注重室內質控規范實施,提高檢測精密度,其次實驗室環境、不同試劑廠家、檢測方法及儀器檢測性能對結果也會產生影響。室內質控是保證檢驗質量的關鍵之一,為室間質評的基礎,可檢測實驗室檢測精密度,反映結果準確度的偏離情況,確保實驗室檢測結果的一致。各基層實驗需加強開展室內質控的規范程度,不斷提高檢測意識,確保孕前優生健康檢查的服務質量[25]。HBcAb項目從2012年—2021年第二次陽性漏檢率大多均高于其他項目的原因可能是其檢測方法為競爭性抑制反應,樣本抗體和酶標抗體在同一反應體系中,操作流程不規范,放置溫度較高或者時間較長均會影響結果的判定[26]。10年間HBcAb項目陽性漏檢率從47.4%降為0%,其原因可能是2012年多家實驗室采用膠體金方法,而后實驗室逐漸采用ELISA、化學發光等替代膠體金方法,膠體金試劑檢測靈敏度有限,顯色需要較高濃度的標記物且實驗人員若操作不當反應時間過短會導致漏檢率升高[27]。

乙肝五項血清學檢測是國家免費孕前優生健康檢查的重要環節,其每項檢測的結果都有重要的意義,關乎孕前婦女乙肝病情診斷。各基層實驗室還需不斷堅持室內質控管理,不斷加強乙肝五項血清學實驗質量控制的相關培訓,積極參加室間質評活動,提高各基層實驗室的檢測能力和檢測質量,更好地為育齡人群服務。