福建省2018-2019 年非免疫雞群雞毒支原體血清學調查

周 峰 王晨燕 郭錦玥 侯 博＊

（1.佛山科學技術學院生命科學與工程學院 廣東佛山 528231；2.福建省農業科學院畜牧獸醫研究所/福建省畜禽疫病防治工程技術研究中心 福州 350013）

雞毒支原體 （Mycoplasma gallisepticum，MG）主要導致雞的慢性呼吸道疾病 （Chronic respiratory disease，CRD）和火雞的傳染性鼻竇炎，雞CRD 的癥狀主要包括打噴嚏、咳嗽、流鼻涕、呼吸道啰音和氣囊炎，火雞眶下鼻竇腫脹[1-2]，并且能加重其他呼吸道疾病的癥狀和促進病原如雞傳染性支氣管炎病毒（Infectious bronchitis virus，IBV）[3]、 新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）以及大腸桿菌（E.coli）等的擴散[4]。 MG 感染蛋雞或種雞會導致產蛋率和孵化率降低、 胴體質量下降等， 造成重大經濟損失[3]。為了減少養雞場的損失，特別是蛋雞的經濟損失，防治手段主要基于抗生素的治療與疫苗免疫， 以減少水平和垂直傳播[1]。 然而人們使用抗生素進行防治時， 由于不同菌株在不同地區使用抗生素而導致MG 對抗生素的敏感性不斷下降， 而且產生的耐藥性問題也越發嚴重[5]。目前市售的MG 疫苗主要為滅活油乳疫苗和減毒活疫苗， 這些疫苗在一定程度上減少MG 感染對蛋雞的損失[1]，但是有研究表明，接種一些MG 滅活苗會導致產蛋延遲等不良反應，原因可能是接種滅活疫苗會影響蛋黃脂質的合成，從而影響產蛋率[6-7]。 使用抗生素能夠短期控制MG 在雞群中的發病情況，但不能消除MG 對雞群的感染，并且抗生素的使用往往需要考慮食品安全的問題[8]，這些問題給MG 的防治帶來挑戰，需要對雞毒支原體病進行監測調查，根據MG 感染情況，采取合理的防治措施來降低雞毒支原體感染率。 檢測MG抗體的ELISA 方法于1985 年被Talkington 建立，王樂元等 （1994） 應用Dot-ELISA 檢測MG 抗原。ELISA 具有特異性強，并有較好的穩定性，這為雞群中病原抗體水平的檢測提供了可靠的方法， 為MG感染診斷和流行監測提供了依據與基礎[9]。 來自33個國家的62 篇研究報告表明，雞毒支原體在全世界范圍內流行， 數據庫檢索出22 162 份MG 樣品，平均陽性率為27.0%； 在南亞MG 流行率較高，為37.3%（26.2%～48.9%）；在中亞和歐洲地區感染率較低，為13.9%（6.1%～24.0%）；而在南亞和撒哈拉以南地區MG 感染率相對最高， 為61.5%（39.4%～81.6%）[10]。 此外，MG 感染在我國也廣泛存在，2017年李桂喜等[11]對江蘇、山東、河南、安徽的6 986 例蛋雞病例進行調查， 其中MG 感染率為14.21%；齊新永等[12]對2013 年上海地區雞群進行血清學調查，規?；疵庖進G 疫苗蛋雞場MG 抗體平均陽性率高達97.8%，種雞場MG 抗體平均陽性率為43.3%；2019 年北京市各區雞群MG 抗體陽性率為78.95%～100%[13]。2012 年福建省部分地區規?；疵庖叩半u群MG 抗體平均陽性率為47.22%[14]， 六七年后，雞毒支原體感染情況是否有新的變化， 需要再次監測福建省蛋雞群和種雞群的MG 感染情況， 以及時制定防治措施，降低由MG 造成的經濟損失。本研究收集福建省不同地區21 個未免疫MG 疫苗的蛋雞場血清，使用商品化ELISA 抗體檢測試劑盒對樣品進行檢測，調查福建省近年蛋雞群的MG 感染情況，為科學防治雞毒支原體病奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 血清樣品 2018-2019 年， 自福建5 個地市的21 個雞群采集不同養殖類型、日齡、規模的未免疫MG 疫苗蛋雞血清樣品共916 份。 其中，福州428 份、漳州306 份、莆田72 份、龍巖81 份、南平29 份。

1.2 主要試劑 MG ELISA 抗體檢測試劑盒， 購自北京愛德士元亨生物科技有限公司。

1.3 未免疫雞群MG 抗體檢測及流行規律分析將待檢測血清樣品提前作500 倍稀釋， 再使用MG抗體檢測試劑盒按照試劑盒說明書進行檢測。 判定標準為： 樣品的S/P 值大于0.50 或效價范圍≥1 076，則判為陽性。 根據檢測結果分析福建省蛋雞和種雞群雞毒支原體流行情況。 用Excel 整理采集到的數據，分析不同日齡（分別為育雛階段1～42 日齡、育成階段43～126 日齡、產蛋期至淘汰126 日齡以上）以及不同養殖類型（蛋雞和種雞）的MG 流行規律。

1.4 統計學分析 運用SPSS.23 軟件進行統計學卡方檢驗分析。采用χ2檢驗及其事后比較不同日齡以及養殖類型的雞群MG 抗體是否存在顯著性差異，P＜0.05 表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 福建省未免疫蛋雞場MG 抗體檢測情況2018-2019 年， 共采集福建省內非免疫蛋雞或種雞場樣品916 份，MG 抗體陽性率為69.43%。其中福州MG 抗體陽性率高達81.07%（347/428），漳州MG 抗體陽性率為48.69%（149/306），龍巖MG 抗體陽性率為82.72%（67/81）， 南平地區抗體陽性率為82.76%（24/29），莆田MG 抗體陽性率為68.06%（49/72）。在福建省內共采集了21 個雞群，其中MG 抗體陽性率在0%～20%的有4 個，21%～50%的有4 個，51～100%的有13 個，其中MG 抗體陽性率為100%的有2 個。各地抗體陽性率見圖1。

圖1 福建省不同地區雞群血清MG 抗體檢測結果

2.2 不同日齡雞群MG 感染情況及MG 流行情況分析 根據不同日齡雞群進行MG 抗體陽性率統計， 發現育雛階段雞MG 抗體陽性率為37.10%，育成階段陽性率在43.06%，產蛋期至淘汰階段陽性率為77.61%，保育階段與126 日齡以上的雞群MG 抗體陽性率差異極顯著（χ2=100.10，P＜0.001），結果見表1、圖2。

表1 不同日齡階段雞群MG 抗體檢測情況

2.3 蛋雞與種雞群MG 抗體檢測結果及MG 流行情況分析 統計顯示，2018-2019 年福建地區蛋雞場與種雞場的血清MG 抗體陽性率無顯著差異（P＞0.05），見表2。

表2 不同養殖類型MG 抗體檢測結果

3 討 論

檢測MG 抗體的ELISA 方法于1985 年被Talkington 建立，為MG 流行病學調查提供基礎[9]。本研究采用ELISA 方法對2018-2019 年福建省內未免疫MG 疫苗的蛋雞和種雞群血清進行MG 抗體檢測，結果顯示MG 抗體總陽性率為69.43%，與黃招玲等[14]在2012 年福建省調查的MG 抗體總陽性率為47.22%相比，在過去的六七年中，福建省未免疫MG 疫苗雞群的MG 感染愈發嚴重。 本次調查發現，種雞群的平均抗體陽性率為75.82%，較高的MG 抗體陽性水平為MG 的垂直傳播提供可能。 育雛階段（1～42 日齡）雞群，其MG 抗體陽性率高達37.10%，產蛋期至淘汰階段雞群MG 抗體陽性率增加至77.61%，MG 抗體陽性率隨著雞群日齡的增加而增加，與2019 年姜蘭蘭等[13]和2012 年黃招玲等[14]的不同日齡雞群MG 感染規律不一致。 導致這些差異的原因可能有：（1）不同雞場抑制MG 藥物的使用；（2）采樣時季節差異的影響；（3）姜蘭蘭等、黃招玲等所調查的小日齡雞群均已存在較高的MG 感染率，結合前兩點原因，可能導致不同日齡感染規律不一致。本次調查福建省育雛階段的雞群就存在37.10%的MG 抗體陽性率， 這可能是種雞場未采取MG 凈化措施，導致病原通過垂直傳播給后代，而雞場引進了受MG 感染的雞群， 也可能是部分雞場生物安全設施較差， 從而導致MG 水平傳播引起雞群MG 抗體陽性率較高。

2018-2019 年， 共采集、 檢測福建省非免疫21 個雞群的血清樣品， 雞群MG 抗體陽性率為90.48%， 說明雞毒支原體感染在福建地區普遍存在， 而且比2012 年福建省雞群MG 感染更加嚴重。因此，對MG 感染需要引起重視，在引種過程中需要加強MG 檢測，杜絕MG 垂直傳播。