麗江山荊子鏈狀化學成分研究

劉怡君，楊 麗，郎利娟，白惠榮，姜 北，肖朝江*

（1.云南省滇西抗病原植物資源篩選研究重點實驗室，云南 大理 671000；2.大理大學藥物研究所，云南 大理 671000；3.大理大學藥學院，云南 大理 671000；4.畢節醫學高等?？茖W校，貴州 畢節 551700）

麗江山荊子Malus rockiiRehd.系薔薇科Rosaceae 蘋果屬Malus植物，屬喬木，別名喜馬拉雅山荊子，主要分布于我國云南、四川、西藏等地，生長于海拔2 400～3 800 m 的山谷雜木林中〔1〕。麗江山荊子果實可治療肝病、腹瀉、眼疾、月經不調等〔2〕。課題組前期研究發現根皮苷為麗江山荊子的主成分，其具有較好的體內外降脂活性，以及中等的體內抗瘧和鎮痛活性〔3〕；課題組還從麗江山荊子中分離得到2 個二苯并呋喃類化合物，二者在體外均具有顯著的降脂活性〔4〕。

為進一步了解麗江山荊子的化學成分，本實驗對麗江山荊子干燥枝葉95%乙醇提取物進行化學成分研究，從中分離鑒定了7 個鏈狀化學成分，分別為反式植醇（1）、植物烯醛（2）、棕櫚酸植酯（3）、1-十六烷酸甘油單酯（4）、9，12，13-三羥基-（10E，15Z）-十八碳二烯酸甲酯（5）、α-亞麻酸（6）、十八醇（7），所有化合物均為首次從麗江山荊子中分離得到，其中化合物1~6 為首次從蘋果屬植物中分離得到?；衔?~7的結構式見圖1。

圖1 化合物1~7的結構式

1 儀器與材料

AvanceⅢ-400 型核磁共振波譜儀（德國Bruker公司）；AL204 型萬分之一電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；薄層色譜硅膠板GF254、柱層析硅膠（青島海洋化工有限公司）；MCI gel CHP20∕P120（75~150 μm）、MCI gel CHP20P（37~75 μm）（日本三菱公司）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠（瑞典Amersham Bioscience 公司）；工業純石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇，經重蒸后使用。

本實驗所用植物樣品于2018年6月采自云南省大理蒼山，經大理大學藥學院生藥教研室張德全教授鑒定為麗江山荊子，植物標本（編號：20180611-2）存放于大理大學云南省滇西抗病原植物資源篩選研究重點實驗室。

2 提取與分離

麗江山荊子干燥枝葉13.0 kg，粉碎后經95%乙醇冷浸提取4次，每次24 h，合并冷浸液，減壓濃縮得總浸膏2.1 kg?？偨嘟浌枘z柱色譜，氯仿-丙酮梯度洗脫（1：0→0：1），得8 個主要組分（Fr.A～Fr.H）。Fr.A（65.0 g）經反復硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯50：1→10：1，石油醚-丙酮100：1→10：1）和Sephadex LH-20凝膠柱色譜（氯仿-甲醇1：1）洗脫得到化合物1（208.0 mg）和化合物7（800.0 mg）。Fr.B（62.5 g）經反復硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯100：1→10：1，石油醚-丙酮1∶0→0∶1，純氯仿）和Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（氯仿-甲醇1∶1）洗脫得到化合物2（10.3 mg）、化合物3（11.8 mg）和化合物6（224.0 mg）。Fr.C（28.0 g）經反復硅膠柱色譜（氯仿-乙酸乙酯5：1，氯仿-丙酮100∶1）洗脫得到化合物4（65.0 mg）。Fr.E（40.0 g）經反復硅膠柱色譜（石油醚-丙酮10：1，氯仿-丙酮50：1→40：1）、Sephadex LH-20凝膠柱色譜（氯仿-甲醇1：1）和MCI柱色譜（70%甲醇）洗脫得到化合物5（10.5 mg）。

3 結構鑒定

化合物1：無色油狀物。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.40（1H，t，J=7.0 Hz，H-2），4.14（2H，d，J=7.0 Hz，H-1），1.98（2H，t，J=7.4 Hz，H-4），1.66（3H，brs，H-20），0.87（6H，d，J=6.4 Hz，H-16，17），0.85（3H，d，J=6.1 Hz，H-18），0.84（3H，d，J=6.6 Hz，H-19）。以上波譜數據與文獻〔5〕報道基本一致，故鑒定該化合物為反式植醇。

化合物2：黃色油狀物。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：9.99（1H，d，J=8.2 Hz，H-1），5.88（1H，d，J=8.2 Hz，H-2），2.16（3H，s，H-20），0.86（6H，d，J=6.4 Hz，H-16，17），0.85（3H，d，J=6.6 Hz，H-18），0.84（3H，d，J=6.6 Hz，H-19）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：191.5（d，C-1），127.3（d，C-2），164.6（s，C-3），41.0（t，C-4），24.8（t，C-5），36.5（t，C-6），32.7（d，C-7），37.4（t，C-8），24.5（t，C-9），37.3（t，C-10），32.8（d，C-11），37.3（t，C-12），24.7（t，C-13），39.4（t，C-14），28.0（d，C-15），22.7（q，C-16），22.8（q，C-17），19.8（q，C-18），19.6（q，C-19），17.6（q，C-20）。以上波譜數據與文獻〔6〕報道基本一致，故鑒定該化合物為植物烯醛。

化合物3：白色固體。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.33（1H，t，J=7.1 Hz，H-2），4.58（2H，d，J=7.1 Hz，H-1），2.29（2H，t，J=7.6 Hz，H-2'），2.00（2H，t，J=6.7 Hz，H-4），1.69（3H，brs，H-20），0.81~0.87（15H，overlap，H-16，17，18，19，16'）；13CNMR（100 MHz，CDCl3）δ：61.3（t，C-1），118.2（d，C-2），142.7（s，C-3），39.9（t，C-4），25.1（t，C-5），36.7（t，C-6），32.9（d，C-7），37.5（t，C-8），24.5（t，C-9），37.3（t，C-10），32.7（d，C-11），37.4（t，C-12），24.9（t，C-13），39.4（t，C-14），28.0（d，C-15），22.7（q，C-16），22.8（q，C-17），19.8（q，C-18），19.8（q，C-19），16.4（q，C-20），174.0（s，C-1'），34.5（t，C-2'），24.9（t，C-3'），29.2~29.8（t，C-4'~13'），32.0（t，C-14'），22.8（t，C-15'），14.2（q，C-16'）。以上波譜數據與文獻〔7〕報道基本一致，故鑒定該化合物為棕櫚酸植酯。

化合物4：白色粉末。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：4.18（1H，dd，J=11.6，4.8 Hz，H-1a），4.13（1H，dd，J=11.6，6.1 Hz，H-1b），3.92（1H，m，H-2），3.68（1H，dd，J=11.5，3.8 Hz，H-3a），3.58（1H，dd，J=11.5，5.9 Hz，H-3b），2.34（2H，t，J=7.6 Hz，H-2'），1.61（2H，m，H-3'），1.24（24H，brs，H-4'~15'），0.87（3H，t，J=6.8 Hz，H-16'）；13C-NMR（100 MHz，CDCl3）δ：65.1（t，C-1），70.3（d，C-2），63.3（t，C-3），174.5（s，C-1'），34.2（t，C-2'），24.9（t，C-3'），29.2~29.7（t，C-4'~13'），32.0（t，C-14'），22.7（t，C-15'），14.2（q，C-16'）。以上波譜數據與文獻〔8〕報道基本一致，故鑒定該化合物為1-十六烷酸甘油單酯。

化合物5：白色固體。1H-NMR（400 MHz，CD3COCD3）δ：5.61（2H，overlap，H-10，11），5.32（2H，overlap，H-15，16），3.93（1H，brs，H-9），3.80（2H，overlap，H-12，-OH），3.64（1H，s，-OH），3.57（1H，s，-OH），3.48（3H，s，-OCH3），3.30（1H，brs，H-13），2.20（1H，m，H-14a），2.17（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），1.98（1H，m，H-14b），1.93（2H，m，H-17），1.46（2H，m，H-3），1.34（2H，m，H-8），1.19（8H，brs，H-4~7），0.81（3H，t，J=7.5 Hz，H-18）；13C-NMR（100 MHz，CD3COCD3）δ：174.1（s，C-1），34.2（t，C-2），25.6（t，C-3），29.7（t，C-4），30.0（t，C-5），30.2（t，C-6），26.1（t，C-7），38.3（t，C-8），72.0（d，C-9），136.5（d，C-10），130.4（d，C-11），75.3（d，C-12），75.3（d，C-13），31.3（t，C-14），126.6（d，C-15），133.3（d，C-16），21.2（t，C-17），14.5（q，C-18），51.4（q，-OCH3）。以上波譜數據與文獻〔9〕報道基本一致，故鑒定該化合物為9，12，13-三羥基-（10E，15Z）-十八碳二烯酸甲酯。

化合物6：無色油狀固體。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.35（6H，m，H-9，10，12，13，15，16），2.80（4H，m，H-11，14），2.34（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），2.06（4H，m，H-8，17），1.63（2H，m，H-3），1.25~1.32（8H，brs，H-4~7），0.97（3H，t，J=7.5 Hz，H-18）。以上波譜數據與文獻〔10〕報道基本一致，故鑒定該化合物為α-亞麻酸。

化合物7：白色粉末。1H-NMR（400 MHz，CDCl3）δ：3.64（2H，t，J=6.7 Hz，H-1），1.56（2H，qui，J=6.7 Hz，H-2），1.25（30H，brs，H-3~17），0.87（3H，t，J=6.8 Hz，H-18）。以上波譜數據與文獻〔11〕報道基本一致，故鑒定該化合物為十八醇。

4 討論

本實驗首次從麗江山荊子干燥枝葉95%乙醇提取物中分離鑒定了7 個鏈狀化合物，包括2 個鏈狀二萜類化合物（1 和2）、4 個脂肪酸類化合物（4~7），以及1 個鏈狀二萜和長鏈脂肪酸的加合物（3），所有化合物均為首次從麗江山荊子中分離得到，其中化合物1~6為首次從蘋果屬植物中分離得到。根據文獻報道，反式植醇具有抗菌活性，高度抑制MTB C171Q 受體結核分枝桿菌KasA，體外活性接近異煙肼〔12〕；α-亞麻酸具有抗過敏、抗炎、改善肥胖引起的胰島素抵抗等藥理活性〔13-14〕。由此推斷，麗江山荊子的民間用藥有一定合理性，其潛在藥用價值亟待開發。