食品及飼料脂肪檢測方法的優化開發

苗蕾 辛雨霏 李春玲 鄧麗 王鶴亭

摘 要：對食品、飼料、蛋及蛋制品中脂肪檢測方法進行探討，并提出一種改進后新的脂肪測定方法，以酸水解-索氏抽提法為基礎，對實驗條件進行改進后，新方法能夠同時滿足食品、飼料、蛋及蛋制品中脂肪的測定。通過數據比較，新方法的相對標準偏差為0.81%～3.76%。與不同產品脂肪檢測國家標準方法相比，相對誤差平均值在0.77%～1.75%。新方法的提出，為實驗室及日常檢驗檢測工作提供了一個實驗更加便捷、準確度更好、污染更小、試劑回收率更好的檢測方法。

關鍵詞：脂肪；食品；飼料；蛋及蛋制品；酸水解；索氏抽提

Abstract： Discussion on fat detection methods in food， feed， eggs and egg products， and propose a new improved fat determination method. Based on the acid hydrolysis-Soxhlet extraction method， and improving the experimental conditions， the new method can meet the requirements for the determination of fat in food， feed， eggs and egg products. Through data comparison， the average relative deviation of the new method is 0.81%～3.76%. Compared with the national standard method for fat detection of different products， the average relative error is 0.77%～1.75%. The proposal of the new method provides a detection method with more convenient experiment， better accuracy， less pollution and better recovery rate of reagents for laboratory and daily inspection and detection work.

Keywords： fat; food; feed; eggs and egg products; acid hydrolysis; soxhlet extraction

隨著生活質量的提高，人們越來越關注不同食品中的脂肪含量。目前，食品中脂肪的檢測方法多采用《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》（GB 5009.6—2016）[1]；特殊食品，如雞蛋則采用《蛋與蛋制品衛生標準的分析方法》（GB/T 5009.47—2003）[2]進行檢測；飼料等寵物食品采用《飼料中粗脂肪的測定》（GB/T 6433—2006）[3]。不同產品類型檢測方法的條件不同，需要根據經驗進行選擇。不同產品國家標準檢測方法比較見表1。

除了國家標準檢測方法外，國內外也提出了很多新型脂肪檢測方法，如近紅外光譜法[4]、超臨界萃取法[5]等，于曉英等[6]提出直接采用乳脂計對方便面食品中的脂肪進行測定，取得了較好的數據。本文通過對酸水解脂肪檢測方法進行優化及開發，對普通食品、禽蛋產品、飼料中脂肪測定進行數據比較，開發出一種更適用于日常檢驗檢測、精確度更好、檢測效率更高、更加節約成本的檢測方法。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

鹽酸溶液（1+1）、石油醚（沸程30～60 ℃），均為分析純，天津科密歐化學試劑有限公司；實驗用樣品均為日常抽檢及委托樣品。

1.2 儀器與設備

分析天平（BSA224S），梅特勒托利多公司；脂肪提取儀（Soxtectm8000），BUCHI瑞士步琦有限公司；鼓風干燥箱（DHG-9055A），上海一恒科技有限公司。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品制備

分析樣品選用實驗室日常檢驗用具有代表性的樣品，如有必要需進行四分法取樣，取樣后充分混勻，粉碎后裝入自封袋內備用。對于液體樣品搖勻備用。

1.3.2 試樣稱量及水解

稱取試樣3～4 g于50 mL具塞比色管中，水分含量較低的固體樣品，加入5 mL水攪拌均勻后，加入1+1鹽酸溶液10 mL，振蕩分散樣品；對于半固態及液態樣品，直接加入鹽酸溶液（1+1）10 mL，振蕩分散樣。將分散后的樣品管置于80 ℃水浴鍋中水解2 h（視樣品情況而定，至水解完全），水解期間至少振蕩試樣管2～3次，以促進樣品分散及水解。

水解完成后，將水解液轉移至濾紙上過濾，并反復用熱水洗滌濾紙3～4次，直至濾液為中性（藍色石蕊試紙檢驗不變色），每次洗滌時熱水不要過量，以防止水解產物損失，影響最終的檢測結果。連同漏斗將濾紙及其水解產物放入105 ℃干燥箱內干燥1 h后取出，備用。

1.3.3 水解產物的抽提

將冷卻后濾紙定量轉移至脂肪提取儀紙筒內，以30～60 ℃石油醚為提取溶劑，按照設定的浸提程序進行索氏抽提。

對于脂肪含量不同的產品，采用1次抽提（脂肪低于15%采用1次抽提即可達到提取效果）或2次抽提（脂肪含量高于15%的樣品，進行1次抽提后，更換接收罐進行2次抽提可達到提取效果）以達到充分淋洗的目的。1次抽提程序設定為沸騰20 min、淋洗40 min、回收20 min；二次抽提程序的設定為沸騰15 min、淋洗30 min、回收15 min。

1.3.4 油脂稱量

抽提完成后取出接收器（接收器提前于105 ℃干燥箱中干燥1 h后冷卻稱重，待用），置于105 ℃烘箱中干燥1 h后取出置于干燥器內，室溫放置30 min后稱量。重復以上操作直至恒重（需要根據樣品脂肪含量調整浸提程序及次數，以達到充分浸提的效果）。

1.4 脂肪含量的計算

脂肪含量計算公式為

2 結果與分析

2.1 精密度實驗

選取6種具有代表性的樣品進行精密度實驗，平行測定6次，測定結果詳見表2。6種樣品的相對標準偏差（Relative Standard Deviation，RSD）為0.81%～3.76%，平均相對標準偏差為1.97%，表明方法重復性良好。

2.2 食品中脂肪含量結果與國家標準方法比對數據

分別采用實驗室方法與《食品安全國家標準 食品中脂肪的測定》（GB 5009.6—2016）國家標準方法，對18批次食品類樣品進行脂肪檢測，相對誤差0%～4.55%，平均相對誤差1.75%，見表3。

2.3 飼料中脂肪含量結果與標準方法比對數據

《飼料中粗脂肪的測定》（GB/T 6433—2006）指出，在檢測B類產品中脂肪的過程中，鹽酸水解過程中需要不斷振搖，否則樣品極易黏附在錐形瓶壁上造成檢測結果偏低的現象，且在后續抽提過程中，需要連續抽提至少6 h才能保證樣品脂肪提取完全，此過程大大降低了檢測效率。使用本實驗方法后，檢測效率提升，避免了由于微沸回流水解可能導致的檢測結果偏低的現象，且水解更加完全，整個抽提程序僅需要1.5 h即可完成。分別采用本實驗方法與《飼料中粗脂肪的測定》（GB/T 6433—2006）國家標準方法，對飼料類（含寵物食品）樣品進行脂肪檢測，相對誤差為0%～2.70%，平均相對誤差為0.77%，見表4。

2.4 蛋與蛋制品中脂肪含量結果與標準方法比對數據

《蛋與蛋制品衛生標準分析方法》（GB/T 5009.47—2003）中，脂肪采用三氯甲烷冷浸法進行提取測定，但三氯甲烷毒性較大，且在浸提過程中，需要至少洗滌浸提管10次才能達到浸提效果，否則脂肪檢測數據偏低，不能達到提取效果，本方法能將蛋制品脂肪檢測統一到普通食品脂肪檢測中，使檢測效率及準確度都得到顯著提升。分別采用本方法與《蛋與蛋制品衛生標準分析方法》（GB/T 5009.47—2003）國家標準方法，對蛋及蛋制品進行脂肪檢測，相對誤差為0%～2.11%，平均相對誤差為0.88%，見表5。

3 結論

作為四大核心營養素之一，脂肪的測定一直是檢測機構的重點檢測項目。通過對現有不同產品國家標準檢測方法的整合及改進，新的檢測方法不但能夠同時滿足不同基質產品中脂肪含量的測定，在檢測效率、數據準確度及操作適用性等方面都有顯著提升。本方法的相對標準偏差為0.81%～3.76%，平均相對標準偏差為1.97%。針對食品、飼料、蛋及蛋制品進行分類數據比對，其結果相對誤差分別為1.75%、0.77%、0.88%，結果遠遠低于國家標準10%、5%以及3%，方法適用性強。利用索氏抽提對水解后的脂肪進行提取，還可以對提取溶劑進行回收利用，也可以避免脂肪水解提取液在轉移過程中的損失。

參考文獻

[1]國家食品藥品監督管理總局，國家衛生和計劃生育委員會.食品安全國家標準 食品中脂肪的測定：GB 5009.6—2016[S].北京：中國標準出版社，2016.

[2]中華人民共和國衛生部.蛋與蛋制品衛生標準的分析方法：GB/T 5009.47—2003[S].北京：中國標準出版社，2003.

[3]國家標準化管理委員會，國家質量監督檢驗檢疫總局.飼料中粗脂肪的測定GB/T 6433—2006[S].北京：中國標準出版社，2006.

[4]代啟虎，馬晨晨，李冉.近紅外光譜分析技術在食品脂肪含量測定上的應用[J].廣東化工，2017，44（2）：58-59.

[5]何鋼，謝濤，謝碧霞.超臨界CO2萃取測定食品中總脂肪的研究[J].經濟林研究，2003，21（3）：28-31.

[6]于曉英，賈薇，張大鷹，等.方便面中脂肪測定新方法的研究[J].中國衛生檢驗雜志，2003，13（6）：699-700.

作者簡介：苗蕾（1987—），女，遼寧錦州人，碩士，高級工程師。研究方向：食品及化工產品檢驗檢測。