淺析安西牛結節病的診斷及預防措施

徐萬勝

（甘肅省武威市涼州區黃羊鎮農業技術服務中心，甘肅 武威 733000）

隨著中國經濟的蓬勃發展和飲食結構的調整，養牛業逐漸得到迅速發展，安西牛是我國甘肅省特有的一種優良種牛，優點較多，生產潛力較大，安西牛養殖模式逐漸轉向規?；?，疾病的暴發率也逐漸升高。牛結節病作為一種病毒性傳染性皮膚病，可致使感染牛發熱、淋巴結腫大、皮膚水腫以及體表皮膚出現大范圍的瘤狀組織，一旦發生影響牛的正常生產。在日常飼養管理過程中，應重視牛結節病的防控工作。由于該病無特效治療藥物，因此，應掌握結節病的流行特點和診斷方法，并結合其特點實施科學的飼養管理方式，降低該病的發生率，從而促進安西牛養殖業的經濟效益收入和健康發展。

1 病原特征

該病的病原為疙瘩皮膚病病毒，屬于痘病毒科、羊痘病毒屬，與羊痘病毒具有相似的形態特征，具有囊膜，無血凝活性，截至目前分離的病毒株只有一個血清型[1]。該病毒對外界因素具有較強的抵抗力，在正常環境溫度下存活時間可長達40 d，若其存在于痂皮中則存活時間更為長久，病變皮膚結節在-80℃下可存活10年之久。但其對熱、強酸、強堿較為敏感，氯仿、乙醚、十二烷基硫酸鈉溶液、甲醛、酒精及碘伏等消毒劑可將其殺滅。

2 流行病學

牛結節病又稱牛疙瘩皮膚病，是一種急性、亞急性或慢性傳染病，在2022年農業農村部公告表示將牛結節性皮膚病由一類動物傳染病調整為二類動物傳染病，該病呈世界性流行，且不同年齡階段、品種、性別的牛均對該病易感，其中奶牛和亞洲水牛的易感性更高。病牛為主要傳染源，其皮膚結節、唾液、乳汁、鼻腔分泌物、精液等均存在病毒，且在恢復期仍會持續帶毒，持續時間約為21 d[2]。該病的主要傳播方式為直接接觸傳播、污染水源、飼料等間接傳播或通過節肢動物進行傳播，由于感染公牛精液中存在病毒，在此時進行配種或人工授精將增加疫病的傳播風險。該病多呈季節流行性，多發于每年夏季，發病率在同一流行地區或不同養殖場均具有較大差異，在相同條件下的感染牛群其臨床癥狀表現也具有差異性。

3 臨床癥狀

病牛因健康狀況和傳播媒介狀況的差異，導致其具有不同的臨床癥狀表現。該病具有2～5周的潛伏感染期，發病初期，病牛體溫可達41℃，呈稽留熱型，持續一周左右，隨后出現眼結膜、口腔黏膜、鼻黏膜發生潰瘍等一些角膜炎、鼻炎、結膜炎的典型癥狀。隨著病情的進一步發展，病牛體表淋巴結腫大，出現大小不一的結節，其中腹股溝、頸部、四肢和耳下的癥狀表現較為明顯，四肢腫大尤為明顯，觸摸有明顯痛感反應，隨后發生漿液性壞死，逐漸形成潰瘍和痂皮，痂皮經長時間摩擦脫落后可形成空洞。病情較為嚴重的牛其頰部及牙床上發生肉芽性腫脹，發生滑膜炎和腱鞘炎而表現跛行，并可發生原發性或繼發性肺炎，容易發生死亡。妊娠母牛感染發病后可導致流產以及并發子宮內膜炎，發病公牛出現睪丸炎、短暫或永久性不育，泌乳牛感染發病后其產奶量發生急劇下降，甚至失去泌乳能力。

4 病理變化

對病死牛進行尸體剖檢，皮下組織有灰紅色漿液浸潤，明顯可見其體表肌肉、咽、氣管、肺臟、支氣管、瘤胃、皺胃甚至腎臟表面黏膜發生顯著的結節樣病變。結節處皮膚、皮下組織和肌肉組織發生充血、出血、水腫及壞死等癥狀并可見紅黃色的漿液性或出血性滲出液，同時發生明顯的炎癥反應。結節腔內有干酪樣的灰白色壞死組織，偶爾可見周圍充血紅腫，結節可深入皮下組織甚至骨骼。體表淋巴結發生增生性腫大、充血和出血癥狀，真皮以及皮下組織血管淋巴結處形成栓塞，其消化道和呼吸道黏膜可發生不同程度的潰瘍，病牛癥狀嚴重時其肺小葉發生膨脹，縱隔淋巴結發生感染，關節液內可見纖維蛋白滲出物。組織病理學檢查可見其表皮脂腺細胞發生明顯腫脹，胞質內含有空泡，胞漿中有卵圓形或者圓形的包涵體[3]。

5 診斷

可根據該病的流行特點、臨床癥狀表現和病理變化進行初步診斷，同時注意與偽牛痘、貝諾蟲病、蠕蟲病、昆蟲叮咬等混淆性疾病的鑒別診斷。牛結節病作為二類動物疫病，在進行實驗室檢測時應有相應的限制條件，如需透射電鏡和PCR儀器等專業檢測儀器，以及實驗室應具備病原學、血清學和分子生物學檢測相應的儀器設備和專業條件，然后才可進行病毒的分離、中和試驗或PCR檢測等，實現進一步確診。

5.1 病毒鏡檢

透射電鏡診斷是直接快速的確診方法。將病料研磨制成懸液，然后滴于蠟板上，間隔60 s后滴加Tris-EDTA緩沖液，靜置20 s后滴加1%磷鎢酸，自然干燥后進行鏡檢，可發現病毒形狀為短管狀或者磚塊狀，大小約為270 nm × 290 nm[4]。

5.2 動物試驗

采集病牛的新鮮皮膚結節并制作成乳劑，皮內或皮下接種于易感牛，一周左右后可觀察到接種部位淋巴結腫大、局部堅硬腫脹，可在腫脹物或唾液中分離出牛疙瘩皮膚病病毒，該病毒常用?；蛏窖虻脑蛡鞔毎M行培養。

5.3 血清學試驗

病毒中和試驗為常用且有效的經典方法，但由于該病毒主要引起細胞免疫，因此對于再次感染或者中和抗體水平較低的病牛較難確診。在牛感染發病后一周，機體并未產生相應的中和抗體又表現臨床癥狀，此時采集的病料方可進行ELISA方法檢測。在使用熒光抗體技術進行診斷時應注意該病抗體與其他痘病毒引起的相似疾病之間存在的交叉反應[5]。

5.4 PCR鑒定

該鑒定方法靈敏快速、成本較低，可將采集病料進行相應處理后進行病毒基因組的提取，通過特異性PCR擴增可快速對牛結節病進行鑒定。

6 預防措施

6.1 科學選擇消毒劑，嚴格執行消毒措施

在養殖過程中應建立完善的消毒工作制度，包括日常預防性消毒措施和發病應急性消毒措施，確保落實生物安全工作。根據牛疙瘩皮膚病病毒的特性，科學選擇對其較為敏感的強酸強堿、醛類或含脂溶劑的消毒藥物[6]，進行環境消毒滅源工作。（1）加強日常預防性消毒工作，首先可以使用過硫酸氫鉀復合物粉進行養殖環境的整體噴霧消毒，在此過程中應注意墻壁、飼養設備的消毒，其次在養殖場各入口處設置消毒池、消毒間和消毒盆，最后加強對進入養殖場車輛物資進行噴霧、浸泡或擦拭消毒。（2）嚴格執行發病后消毒工作，養殖場發生牛結節病后應立即進行消毒，及時切斷病毒的擴散。首先，針對全場養殖環境，可配合使用3%次氯酸鈉、戊二醛進行噴霧消毒，牛舍地面可間隔使用漂白粉與0.1%戊二醛癸甲溴銨溶液，采取熏蒸或者火焰方式進行金屬設施的消毒，各入口消毒池內可放入2%燒堿溶液；其次，針對病牛和隔離區，可使用苯扎溴銨等季銨鹽類消毒劑進行環境消毒，同時使用1%過硫酸氫鉀溶液進行帶牛噴霧消毒，病牛體表分泌物應及時清理，尸體采取嚴格的無害化處理方式，疫情暴發期間，養殖場每周需至少進行3次消毒工作。

6.2 加強蚊蠅防控，定期進行驅蟲工作

牛結節病可通過節肢動物進行傳播，因此在養殖過程中應加強昆蟲、蚊蠅的防控工作。首先必須及時清理牛舍內糞便，進行堆積密封發酵處理，以及清除場內及周邊雜草，防止蚊蠅的滋生，牛舍內安裝防罩網以及黑光燈，進行蚊蠅的誘殺，在吸血蟲媒介活躍的季節嚴格執行定期驅蟲計劃，殺滅蜱蠓等蟲媒媒介。

6.3 及時隔離治療，控制病毒傳播

在日常檢疫過程中，若發現牛結節病后應將疫情狀況報告于畜牧獸醫主管部門，然后進行隔離和對癥治療。目前針對病牛并無特異性療法，針對破潰結節可使用外科方法進行徹底清創，然后注入抗菌消炎藥物或0.1%高錳酸鉀溶液進行沖洗，并涂抹碘甘油，然后全身使用磺胺類藥物防治繼發性感染[7]，同時嚴格執行相應消毒措施。及時淘汰無治療價值病牛并嚴格按照無害化處理措施進行尸體銷毀，嚴格禁止病牛銷售貿易行為。

6.4 科學接種疫苗，提高機體抵抗力

我國農業農村部明確指出接種山羊痘活疫苗，牛產生較強的細胞免疫水平，一定程度上可預防牛結節病的感染和傳播，但其存在一定的安全問題，且有概率發生再次感染，在不發生該病的地區并不推薦接種弱毒疫苗。目前該病毒的雞胚化弱毒疫苗為常用接種疫苗，牛接種免疫后可產生良好的免疫保護作用，新生犢?？赏ㄟ^初乳獲得母源抗體，進而可獲得半年的免疫保護力。耐過本病的牛在恢復后可存在較高滴度的中和抗體，并且可以維持數年之久。

6.5 加強飼養管理，全面凈化污染源

首先保證牛群處于一個舒適的養殖環境，做好通風干燥和防寒保暖工作，嚴格按照不同生長階段進行科學飼養，同時可采用藥物預防措施，在飼料或飲水中添加黃芪多糖、復合維生素等添加劑，從而提高牛群自身的免疫能力。養殖戶應當堅持自繁自育，盡量避免引種，如若必須進行引種，應做好疫情調查工作，避免從疾病高風險地區引進，實行全進全出養殖管理方案，嚴格按照引進程序執行隔離飼養觀察，做好安西牛的進出檢疫監管，強化調運過程中疫病防控工作，嚴禁病牛銷售，減少疾病擴散。

7 結語

牛結節病對于安西牛養殖具有較大的危害性，其具有強烈的傳染性，嚴重時可導致病牛死亡。若疫情暴發較為嚴重時，需要獸醫主管部門劃定相應疫點、疫區、受威脅區，并組織采取隔離撲殺、銷毀消毒、無害化處理等各種嚴格防疫措施。由于該病無特異性治療藥物，因此養殖場應重視日常防控工作，科學選擇敏感消毒劑進行消殺滅原，定期檢疫監管及時隔離對癥治療，結合該病的發病規律和流行特點，對其進行有效控制，保護安西牛種質資源，促進安西牛養殖業的健康發展。